线形与星形端烃羧基聚二甲基硅氧烷的合成与表征

利用三步法合成了一系列具有不同臂数的线形和多臂星形端烃羧基聚二甲基硅氧烷(PDMS-MAAx,x=1,2,3,4):首先,以Si—H数量不同的含氢封头剂分别与八甲基环四硅氧烷(D4)开环聚合,制得线形和多臂星形端氢基聚二甲基硅氧烷(PDMS-Hx);继而与甲基丙烯酸甲酯(MMA)进行硅氢加成反应,制得酯基封端的聚二甲基硅氧烷(PDMS-MMAx);最后将酯基在碱性条件下水解,制得PDMS-MAAx。采用FT-IR和1H NMR对三个合成阶段的反应产物进行了跟踪分析,确认了各步产物的结构,并讨论了PDMS-MMAx和PDMS-MAAx的合成条件对产物结构的影响,在此基础上优化了PDMS-MAAx的制备工艺,确定了PDMS-MMAx的最佳合成条件为:Si—H与MMA的量之比为1.0∶1.2、反应温度70～80℃、催化剂摩尔浓度20×10-6～60×10-6、反应时间5 h;PDMS-MMAx水解制备PDMS-MAAx的最佳条件为:NaOH水溶液中NaOH的质量分数为20%、NaOH水溶液以及乙醇的用量分别为PDMS-MMAx体积的3倍和1倍。

前十字韧带单束重建中前内侧与辅助前内侧入口创建股骨隧道的初期疗效比较

目的比较关节镜下行前十字韧带（anteriorcruciateligament，ACL）单束重建过程中采用前内侧人口与辅助前内侧人口创建股骨隧道的初期临床疗效。方法回顾性分析2012年3月至2014年2月采用自体半腱肌肌腱、股薄肌肌腱行ACL单束重建治疗单纯ACL完全断裂并获得完整随访的患者资料。根据创建股骨隧道时采用的入口方式，将患者分为前内侧入口组[14例，男8例，女6例；年龄19—60岁，平均（35．14±11．85）岁；受伤至手术时间（14．57±15。83）d；合并半月板损伤Stoller分级：0度1例，Ⅰ度3例，Ⅱ度10例]与辅助前内侧入口组[23例，男10例，女13例；年龄18～62岁，平均（39．78±12．72）岁；受伤至手术时间（14．70±15．25）d；合并半月板损伤Stoller分级：0度2例，Ⅰ度5例，Ⅱ度16例]。末次随访时采用Lysholm、Tegner和IKDC评分系统评价膝关节功能，并通过Lachman试验及Pivot-shift试验评价膝关节前后及旋转稳定性。结果两组患者均全部获得随访，前内侧人口组平均随访（16．07±7．31）个月，辅助前内侧入口组平均随访（13．35±5．92）个月。末次随访时，Lysholm、Tegner、IKDC评分：前内侧入口组分别为（89．86±7．90）分、（8．64±1．65）分、（89．31±8．16）分，辅助前内侧入口组分别为（92．17±6．72）分、（8．91±1．16）分、（90．89±7．80）分。Lachman试验：前内侧入口组11例阴性，3例阳性，阴性率为78．6％（11／14）；辅助前内侧人口组20例阴性，3例阳性，阴性率为87．0％（20／23）。Pivotshift试验：前内侧人口组9例阴性，5例阳性，阴性率为64．3％（9／14）；辅助前内侧入口组20例阴性，3例阳性，阴性率为87．0％（20／23）。两组患者术后末次随访Lysholm、Tegner、IKDC评分以及Laehman试验、Pivot-shift试验阴性率比较，差异均无统计学意义。结论关节镜下行膝关节ACL单束重建时，应用前内侧人口与辅助前内侧人口创建股骨隧道，术后均可取得优良的初期临床疗效。

胫骨平台骨折术后肺栓塞一例

患者男，32岁，因车祸致左上肢、右膝部疼痛、流血1 h于2010年7月13日入院。患者既往体健，入院前无昏迷史，无心慌、胸闷等不适，生命体征平稳。入院查体：左上肢多处玻璃划伤，左前臂有一长约6 cm伤口，右膝关节肿胀明显，因疼痛拒绝活动，前下方外侧有一长约1 cm伤口，深达深筋膜下，局部流血，皮肤张力较高，右足背动脉、胫后动脉可及波动，右足趾感觉、运动正常。入院时急诊予以头颅、胸腹腔CT、胸腹腔超声等检查，均未见明显异常，X线片示：右胫骨外侧平台劈裂伴塌陷（图1A）。以“（1）右胫骨平台开放性骨折（Schatzker Ⅱ型）；（2）左前臂皮肤挫裂伤”收治入院。入院后急诊予伤口清创缝合，右下肢膝踝石膏托外固定，甘露醇250 ml每日2次静滴消肿、头孢替安1.5 g每日2次静滴抗感染等治疗，并于入院第3天行右跟骨结节骨牵引。待右膝部肿胀消退，软组织条件适宜后，于7月27日在全麻下行右胫骨平台骨折切开复位内固定＋取自体髂骨植骨融合术（图1B）。术后第4天（7月31日）上午9时许，患者诉有头痛，痰中带血，查体见体温37.8℃，口唇红润，咽部无明显出血，双肺呼吸音可闻及，右膝部切口无明显红肿及渗液，右下肢轻度肿胀，足背动脉搏动正常，足趾末梢血运正常。予以行胸部平片检查未见明显异常，查血D-二聚体稍高，为0.6 mg/L。当日下午17时余，患者头痛加重，体温达38℃，神经内科会诊后考虑血管性头痛，与发热相关，遂予以头孢丙烯0.25 g每日2次口服抗感染治疗。术后第5天（8月1日）早晨，患者诉仍痰中带血，头痛、胸痛、呼吸困难。查体：右肺呼吸音稍弱，右下肢稍肿胀，末梢血运良好。给予心电监护、吸氧等处理。再次行胸部平片检查仍未见明显异常。进一步行胸部CT检查提示创伤性湿肺。患者在等待颅脑MRI检查过程中感胸闷，遂未完成颅脑MRI检查即返回病房。请相关科室会诊后，考虑下肢深静脉血栓形成并肺栓塞，给予复查D-二聚体0.2 mg/L，红细胞沉降率61 mm/1 h，并行双下肢彩超未见明显异常，肺血管CTA检查（图2A）提示：（1）考虑为双下肺动脉分支栓塞；（2）双下肺创伤性湿肺，不排除合并右下肺节段性梗死可能；（3）双侧胸腔积液。遂转入ICU予低分子肝素4000 IU每日2次皮下注射及华法林2.5 mg每日2次口服抗凝、美罗培南0.5 g每8 h一次静滴抗感染，并予以特布他林0.25 mg、布地奈德1 mg及糜蛋白酶4000 IU雾化吸入等治疗。于8月5日，患者病情平稳后，转呼吸内科继续予以头孢地嗪2g每日2次静滴联合阿奇霉素0.5 g每日1次静滴抗感染，低分子肝素4000 IU每日2次静滴（因INR达1.99于8月9日停用）及华法林2.5 mg每日3次口服抗凝，同时予以特布他林5 mg、布地奈德1 mg及糜蛋白酶4000 IU雾化吸入等处理，2 d后（8月7日）改用比阿培南0.3 g每日2次静滴抗感染，1周后咳嗽、咯血、胸闷等症状消失，并于8月19日复查肺部CTA示：双侧肺动脉未见异常密度，栓子已基本消除，右下肺少许斑片状阴影，较8月1日病灶明显吸收。患者病情平稳，于9月7日出院后，继续予以华法林抗凝3个月，肺梗死治愈（图2B）。患者于术后20个月时复查X线片示骨折愈合良好，患肢活动自如，去除内固定物（图1C）。

人Sec61β蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

目的构建人Sec6β基因的表达载体并在大肠埃希菌中表达Sec61β蛋白并制备多克隆抗体，为后续研究Sec61β蛋白及其自身抗体在人大肠癌诊断中的价值奠定基础。方法用RT-PCR技术从人大肠癌组织中扩增出Sec61β基因，并与克隆载体pMD18-T连接转入XL1-BLUE克隆菌中，筛选出重组阳性菌落并提取质粒，用EcoR1、XholI将目的基因从重组克隆载体上切下并与同样双酶切后的表达载体pET-28a连接，转入表达菌BL21（DE3）中，IPTG诱导表达Sec61β重组蛋白，SDS-PAGE鉴定蛋白表达情况。从SDS-PAGE凝胶上切取目的蛋白免疫家兔，获得抗血清。经镍柱纯化后复性获得基因重组蛋白，以该蛋白为抗原，间接ELISA法测定血清抗体效价。Western印迹法检测抗体特异性。结果成功扩增出Sec61β基因（270bp），并诱导表达出Sec61β基因工程蛋白，大小约为15kD，以包涵体形式存在。制备的Sec61β多克隆抗体经Western印迹分析，可与人体组织中目的蛋白特异性结合。结论成功构建了Sec61β的原核表达载体并在大肠埃希菌表达了人Sec61β蛋白，通过SDS-PAGE凝胶的方法切取重组蛋白免疫家兔获得了特异性多克隆抗体。