雷米普利与骨髓间充质干细胞对Ⅳ型心肾综合征的治疗效果

目的 比较雷米普利与骨髓间充质干细胞(BMSCs)对Ⅳ型心肾综合征的治疗效果。方法 采用单侧输尿管梗阻的方法建立SD大鼠慢性肾病模型32只,随机分为雷米普利治疗组(A组)、BMSCs治疗组(B组)、雷米普利与BMSCs联合治疗组(C组)、Ⅳ型心肾综合征对照组(CRS组)各8只,另选8只健康大鼠作为生理盐水对照组(N组),A组接受雷米普利灌胃,B组经肾动脉移植BMSCs, C组接受雷米普利灌胃的同时经肾动脉移植BMSCs, CRS组与N组在其余3组接受操作的同时采用生理盐水灌胃作为对照。各组在接受治疗后第1周末收集血液、尿液检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)及24 h尿蛋白;处死大鼠收集肾脏与心脏制作病理切片,镜下观察大鼠心脏与肾脏的病理改变;采用TUNEL检测各组大鼠心肌组织中凋亡细胞的数量,同时取新鲜组织于透射电镜下观察组织亚细胞结构。结果 A、B、C、CRS组Scr、BUN及24 h尿蛋白均显著高于N组(P<0.05);与A组相比,C组各检测指标明显下降(P<0.01);与B组相比有下降,但差异无统计学意义(P>0.05);病理切片显示C组较A组与B组肾脏与心脏恢复情况较好;TUNEL结果显示,与N组相比,CRS组凋亡细胞数量明显增加(P<0.05),经治疗后各组表达均有下降,其中C组较CRS组下降最为明显(P<0.05);透射电镜提示C组细胞器形态学较为良好。结论 经肾动脉移植BMSCs联合雷米普利灌胃可抑制受损心肌细胞的死亡过程,改善心、肾功能,减轻纤维化程度,对Ⅳ型心肾综合征具有良好的治疗效果。

超声微泡爆破辅助骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠慢性肾病

目的观察超声微泡爆破辅助骨髓间充质干细胞(BMSC)移植治疗大鼠慢性肾病(CKD)。方法40只SD大鼠随机分为4组各10只。BMSC+微泡组、BMSC组、CKD组均制备CKD模型,制模后BMSC+微泡组大鼠经肾动脉注射0.5 mL的BMSC(2×10^(6)/mL),随之注入0.5 mL声诺维造影剂微泡(2×10^(8)个/毫升),注射完毕后立即启动西门子S3000超声诊断仪对两侧肾脏每隔10 s分别爆破1次,共3次;BMSC组大鼠经肾动脉注射0.5 mL的BMSC(2×10^(6)/mL)悬液;对照组及CKD组大鼠经肾动脉输注等量0.9%氯化钠溶液。采用自动生化分析仪检测各组大鼠治疗前和治疗2周后血清BUN、血清Cr、24 h尿蛋白,HE染色及Masson三色染色评估治疗2周后肾脏组织病理变化。结果与同组治疗前比较,BMSC+微泡组大鼠血清Cr、血清BUN、24 h尿蛋白水平降低,BMSC组大鼠血清Cr、24 h尿蛋白水平降低,CKD组大鼠治疗后血清Cr、24 h尿蛋白水平升高(P均<0.05)。与对照组比较,BMSC组大鼠治疗后血清BUN及CKD组治疗后血清Cr、血清BUN、24 h尿蛋白水平升高(P均<0.05)。与CKD组比较,BMSC+微泡组和BMSC组大鼠血清Cr、血清BUN、24 h尿蛋白水平均降低(P均<0.05)。与BMSC组比较,BMSC+微泡组大鼠血清Cr、24 h尿蛋白水平降低(P均<0.05)。与CKD组比较,BMSC组HE染色及Masson三色染色显示CKD样病理有所改善,BMSC+微泡组CKD样病理改善更为明显。结论超声微泡爆破联合BMSC移植治疗大鼠CKD效果较好,其可减轻大鼠CKD肾脏损伤程度,改善肾脏功能。

人脐带间充质干细胞在帕金森病的应用进展

帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种复杂的神经系统疾病,其典型病理特征为与黑质多巴胺能(DA)神经元丢失有关的运动系统功能受损。目前尚无有效的治疗方法逆转DA神经元的进行性损失阻止PD的恶化。近年来,干细胞移植意逐渐被临床用于治疗神经退行性疾病,包括间充质干细胞(mesenchvmal stem ce11s,MSCs)移植治疗,其中人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)较其他来源的MSCs优势更明显,已广泛用于多种疾病的治疗。MSC能分化为DA神经元并分泌多种保护因子发挥功能。本文对hUC-MSCs的特性及其应用于PD治疗的研究现状进行综述,分析目前hUC-MSCs治疗研究存在的问题,旨在为干细胞再生医学治疗PD提供新的思路。

移植低氧预处理MSC对CKD大鼠肾功能的影响及机制

目的探讨移植低氧预处理(HP)骨髓间充质干细胞(MSC)对慢性肾脏病(CKD)大鼠肾功能的影响及机制。方法取2只12周龄SD大鼠颈椎脱臼处死,剥离胫骨和股骨骨髓,分离并培养MSC,用流式细胞仪分析MSC表面抗原。将56只大鼠随机分为模型组40只、假手术(Sham)组12只、对照组4只。模型组用左肾切除及尾静脉注射阿霉素(ADR)建立CKD模型,并随机分为CKD组4只及ADR组、干细胞移植(MSC)组、低氧预处理干细胞移植(HP-MSC)组各12只。对照组于相同部位注射等体积生理盐水;Sham组做左侧肋脊角切口,随后缝合包扎,于相同部位注射等体积生理盐水。造模成功后将CKD组、对照组大鼠颈椎脱臼处死,取肾脏组织。将在常氧环境及低氧环境中培养的MSC分别移植至MSC组、HP-MSC组,Sham组、ADR组注射L-DMEM培养液。MSC移植第1、7天用全自动生化分析仪检测PRO、Hb、ALB、BUN和SCr水平,用HE染色法观察肾脏组织病理变化,用RT-PCR检测肾脏组织中基质细胞衍生因子1(SDF-1)mRNA表达。结果HP-MSC的细胞趋化因子受体4(CXCR)表达率高于常氧MSC(P<0.01)。移植第1、7天,与Sham组比较,ADR组PRO、BUN、SCr水平高,Hb、ALB水平低(P均<0.05)。移植第1天,MSC组、HP-MSC组、ADR组生化指标比较差异无统计学意义(P均>0.05);移植第7天,与ADR组比较,MSC组、HP-MSC组PRO、BUN、SCr水平低,Hb、ALB水平高(P均<0.05),且HP-MSC组PRO、ALB、BUN、SCr变化较MSC组明显(P均<0.05)。移植第7天,MSC组与HP-MSC组肾脏组织损伤减轻,MSC组肾小球尚可见局灶节段硬化,HP-MSC组肾小球袢扩张;与MSC组比较,HP-MSC组肾间质纤维化改善更明显,炎症反应更轻。与对照组比较,CKD组肾组织SDF-1 mRNA相对表达量高(P<0.05)。结论移植HP-MSC可改善CKD大鼠的肾功能,其机制可能与SDF-1-CXCR4信号轴有关。

大鼠骨髓间充质干细胞分离方法的改良与比较

目的探索改进大鼠原代骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)的分离培养方法,以获取生长状态良好、数量多、传代所需时间短的BMSCs。方法选取6周龄的SD大鼠,从长骨中提取BMSCs,采用细胞刮刮取法(A组)、胰蛋白酶消化法(B组)及胰蛋白酶消化合并细胞刮刮取法(C组)分离BMSCs,比较原代培养瓶剩余细胞数量、P1代每高倍视野细胞数目、传代后到收获所需的时间。结果A组与C组贴壁细胞数目较少,镜下多数区域几乎未见BMSCs,分离较为彻底;B组瓶底可见较多贴壁细胞,呈圆形,形态相似,大小均一传代后。第1天时C组BMSCs贴壁数目明显多于其余两组(P<0.001),同时各组培养基中可见少量悬浮细胞。第2天起C组贴壁细胞开始呈现鱼群状分布趋势,其余两组仍呈散在分布。第7天时,C组细胞几乎长满瓶底,BMSCs生长融合达80%~90%,其余两组细胞间隙较大,仍未达到收获标准。C组在传代后第5天便有1瓶BMSCs长满瓶底,其余各瓶第7天时也几乎达到收获标准。A组从传代到收获所用时间为(8.1±0.8)d,B组所用时间为(10.3±0.8)d,C组所用时间为(6.7±0.9)d。C组收获时间明显短于其余两组(P<0.001)。结论胰蛋白酶消化合并细胞刮刮取法是一种快速、实用、高效的骨髓间充质干细胞分离培养技术。

直肠癌MRI术前评估价值与术后病理对比研究

目的探讨MRI对直肠癌术前评估的价值。方法选取84例行外科手术治疗的直肠癌患者的MRI、病理、临床资料。用卡方检验评价MRI对诊断肿瘤T分期、N分期、环周切缘(CRM)受累情况、壁外血管浸润的准确性,用配对t检验评估MRI分析病灶与齿状线位置关系的准确性。结果MRI可较准确地评估对诊断肿瘤T分期、N分期、环周切缘受累情况、壁外血管浸润状态(P<0.01),可大致评估低位直肠癌病灶距齿状线距离(P>0.05)。结论MRI可较准确地评估对诊断肿瘤T分期、N分期、环周切缘受累情况、壁外血管浸润状态。受测量习惯、测量误差、肠管走行等因素的影响,MRI可大致评估病灶距齿状线距离,且测量误差在外科可接受范围内。MRI为临床手术选择及术前评估提供了有价值的影像学依据。

肉瘤样肝细胞癌CT与MRI表现及病理分析

目的分析肉瘤样肝细胞癌的CT、MRI影像学表现与其相应病理结构的关系,以提高影像学诊断的准确率。方法回顾性总结9例经病理证实的肉瘤样肝细胞癌患者的CT及MRI影像学资料分析,与其相应临床表现、病理学改变进行对比分析。结果9例患者中7例病灶影像学表现为单发肿块,其中位于右肝5例,尾状叶1例,左肝1例,2例为多发性结节;CT平扫病灶密度不均匀,内可见坏死、囊变及钙化;CT增强扫描表现为不均匀强化,MRI均呈长T1、长T2混杂信号改变;6例发生转移或侵犯其他器官。结论肉瘤样肝细胞癌的影像学表现与其病理结构、免疫组化关系密切,理解其病理及免疫组化的改变可为影像学做出正确诊断提供重要信息。