嵌顿疝合并新型冠状病毒感染高龄患者的外科诊治体会

目的探讨新型冠状病毒流行期间针对高龄腹股沟嵌顿疝患者的外科处置方案。方法回顾性分析2022年11月至2023年1月,苏州大学附属第二医院胃肠疝外科接收治疗的16例合并新型冠状病毒感染的腹股沟嵌顿疝老年患者临床资料,依据术前快速评估与术中探查结果,分别对患者进行了腹腔镜经腹腹膜前腹股沟疝修补(TAPP)(10例)、腹腔镜辅助小肠部分切除(3例)、全身麻醉下手法复位(3例)。出院后通过电话随访,观察不同方法处置后的患者病情转归。结果10例行TAPP患者康复出院,随访1个月全部存活。3例行腹腔镜辅助小肠部分切除患者,1例出院后因突发心肌梗死死亡,2例患者出院后随访1个月存活。3例全身麻醉下再次手法复位成功患者,1例康复出院,1例因再次高血压性脑出血死亡,1例出院后失随访。结论针对感染新型冠状病毒的高龄患者快速做出相对全面的术前评估,据此制定灵活的外科治疗策略,多学科协作贯穿救治始终,这些都是保障高龄患者康复的必要条件。

肿瘤相关巨噬细胞自噬状态对人大肠癌细胞凋亡的影响

目的 观察肿瘤相关巨噬细胞自噬调控后对大肠癌loVo细胞凋亡的影响。方法使用佛波酯PMA、人重组白细胞介素（IL）-4诱导人单核白血病细胞THP-1分化为肿瘤相关巨噬细胞（TAM）后,使用流式细胞仪检测其表面CD68、CD204、CD206分子表达,分别使用一定浓度的雷帕霉素（RAD001）,巴弗洛霉素（Bafilomycin a1）对TAM的自噬状态进行调控,应用磺酰尸胺（MDC）荧光染色法观察TAM自噬囊泡形成,免疫荧光检测自噬特异性微管相关蛋白1轻链3（LC3）表达,利用Transwell小室将不同自噬状态的TAM与大肠癌细胞行非接触式共培养,实验分组为TAM自噬上调组、下调组、未调组及单独大肠癌LoVo细胞的空白对照组4组,各组经4 Gy射线照射后分别对大肠癌细胞凋亡细胞比例、存活素（Survivn）蛋白、B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）蛋白,半胱天冬蛋白酶激活剂（Smac）蛋白进行检测。结果 TAM表面CD68、CD204、CD206表达水平显著高于未经处理的THP-1细胞和只经PMA作用得到的未活化巨噬细胞。TAM自噬上调组中MDC染色的自噬囊泡数目多于自噬未调组,LC3荧光也强于自噬未调组,自噬下调组中MDC染色的自噬囊泡数目少于自噬未调组,LC3荧光强度则弱于自噬未调组。共培养体系中细胞同时接受照射处理后,膜联蛋白V/碘化丙锭（Annexin V/PI）双染检测大肠癌细胞凋亡显示：共培养组中大肠癌细胞凋亡率分别为（36.84±0.37）%、（43.23±1.34）%、（29.37±0.82）%,均高于对照组（27.23±0.63%）（P〈0.05）,其中,TAM自噬上调组中大肠癌细胞凋亡率[（43.23±1.34）%]高于自噬下调组[（29.37±0.82）%]和自噬未调组[（36.84±0.37）%,P〈0.05]。各组大肠癌细胞凋亡相关蛋白的检测结果显示：TAM自噬未调组中bcl-2表达量为0.24±0.02、上调组为0.08±0.01、下调组为0.42±0.02,均低于对照组（0.61±0.05）,TAM可下调大肠癌细胞的bcl-2表达（P〈0.05）,共培养组中Smac表达水平（分别为1.26±0.03、1.49±0.24、0.85±0.03）均高于对照组（0.68±0.03）（P〈0.05）,共培养组中Survivin表达水平（分别为0.48±0.01、0.23±0.02、0.55±0.05）均低于对照组（0.80±0.05）（P〈0.05）。结论 上调TAM自噬水平可显著促进大肠癌细胞凋亡,改变大肠癌细胞凋亡相关蛋白的表达,提高射线对大肠癌细胞的杀伤作用。

调控肿瘤相关巨噬细胞自噬对大肠癌移植瘤放疗后凋亡的影响

目的观察调控肿瘤相关巨噬细胞自噬后对大肠癌移植瘤放疗后凋亡的影响。方法药物诱导人单核白血病细胞THP-1(中国科学院上海细胞研究所)分化为肿瘤相关巨噬细胞(TAM)后,流式细胞术检测表面分子;使用雷帕霉素(RAD001),巴弗洛霉素(Bafilomycin a1)上调、下调TAM自噬,蛋白质印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白表达;TAM与大肠癌LoVo(美国组织细胞库)细胞混合接种于BALB/c-nu/nu裸鼠(苏州大学实验动物中心),分为TAM自噬上调组、下调组、未调组,LoVo细胞单独接种为对照组。对荷瘤鼠行8 Gy局部外照射,比较照光前后瘤体病理改变、瘤细胞凋亡变化。涉及数据应用SPSS 17.0统计软件分析,计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示,统计分析采用单因素方差分析(One-way ANOVA),以P<0.05为差异有统计学意义。结果TAM表面CD68、CD204、CD206[(62.32±1.58)%、(33.49±2.11)%、(52.42±2.65)%]表达显著高于THP-1细胞[(39.69±1.59)%、(8.56±1.25)%、(7.93±0.53)%]和仅由PMA作用得到的未活化巨噬细胞[(49.72±1.82)%、(7.90±1.19)%、(14.39±0.85)%,P<0.05]。自噬相关蛋白LC3BⅠ、Ⅱ、ATGs、Beclin-1表达结果证明,利用药物成功上调,下调了TAM自噬。照光后凋亡检测结果表明,TAM自噬未调节组[(25.18±0.37)%]高于LoVo细胞单独接种组[(13.74±0.61)%],上调组[(41.75±1.15)%]高于LoVo细胞单独接种组,下调组[(19.34±0.72)%]高于LoVo细胞单独接种组;自噬上调组凋亡率[(41.75±1.15)%]高于未调组[(25.18±0.37)%]与下调组[(19.34±0.72)%];免疫组织化学结果显示,存活素(Survivin)与Livin在上调组表达最少;照光后凋亡相关蛋白表达显示:与单独接种组比较,混合接种组p53、Smac表达均升高,而Livin表达下降,上调组下降最为显著;混合接种后MRP4表达显著上升,调控TAM自噬后,LoVo细胞中MRP4表达下降,其中上调组中表达显著降低。结论上调TAM自噬可改变大肠癌细胞凋亡相关蛋白表达,诱导放疗后大肠癌细胞凋亡发生,增强大肠癌细胞的放疗敏感性。

双镜联合治疗复杂性结肠息肉30例临床分析

目的探讨电子结肠镜联合腹腔镜手术治疗复杂结肠息肉的可行性与安全性。方法回顾性分析30例基底直径≥2．0cm，位置特殊，无法内镜下摘除的结肠息肉，在电子结肠镜辅助下行腹腔镜手术治疗的近期疗效。结果30例均在双镜联合下顺利完成手术，其中肠镜辅助腹腔镜下部分肠壁切除19例，腹腔镜下肠段切除6例，双镜联合小切口辅助部分肠切除3例，术中病理证实为恶性者行腹腔镜结肠癌根治术2例。手术时间50～185min，平均（79．6±28．6）min；术后无吻合口漏和吻合口梗阻发生；有1例患者出现吻合口出血，经保守治疗痊愈。术后肠功能恢复时间1～4d，平均（2-3±2．7）d；住院时间3～12d，平均（5．0±2．0）d。术后随访6—15个月，平均（9．8±2．7）个月；除6例失随访外，24例复查肠镜未见息肉残留、复发。结论腹腔镜联合电子结肠镜不仅定位准确，对恶性患者更改切除术式灵活，而且术后并发症发生率较低，是一种治疗复杂结肠良恶性息肉安全、有效的方法。

雷帕霉素激活M2巨噬细胞自噬影响大肠癌放射敏感性的研究

目的探讨雷帕霉素(RAP)激活M2巨噬细胞(type-Ⅱmacrophage)自噬对大肠癌移植瘤放射敏感性的影响。方法经佛波酯(PMA)单独及联合人重组白介素4(IL-4)诱导人单核白血病细胞THP-1分化为M0和M2型巨噬细胞。使用RAP激活M2自噬,设置巴弗洛霉素(bafilomycin A1)下调M2已被激活的自噬作为对照。将大肠癌LoVo细胞接种于BALB/c-nu/nu裸鼠,待形成直径10 mm瘤体后,利用随机数表法,将18只裸鼠分为M2自噬未激活组、激活组和激活后下调组,LoVo细胞单独成瘤为阴性对照组,每组6只。对荷瘤鼠行2次8 Gy X射线局部照射,分析各组间移植瘤放射敏感性的变化。结果M2巨噬细胞标志物Arg-1、CCL-22的相对表达量显著高于M0巨噬细胞(t=78.77、60.02,P<0.05)。M2自噬未激活组瘤体质量、体积和微血管密度(MVD)[(1.93±0.05)g、(2.14±0.06)cm^(3)、36.37±1.04]较阴性对照组[(1.35±0.05)g、(1.77±0.02)cm^(3)、25.69±1.34]显著提高(t=20.07、14.56、10.92,P<0.05);激活M2自噬后,瘤体重量、体积和微血管密度均显著下降[(0.89±0.03)g、(1.24±0.01)cm^(3)、13.60±1.52](t=44.37、40.32、21.43,P<0.05)。利用巴弗洛霉素下调M2自噬后,瘤体质量、体积和微血管密度有所回升[(1.02±0.07)g、(1.37±0.02)cm^(3)、21.06±1.41](t=4.67、13.79、6.23,P<0.05)。与阴性对照组相比,自噬未激活的M2能够抑制Livin和Survivin在瘤体组织中的表达(t=2.64、7.90,P<0.05);RAP激活M2自噬后,可进一步下调上述蛋白的表达(t=5.43、9.39,P<0.05)。利用巴弗洛霉素下调M2自噬后,Livin、Survivin表达量均有所回升(t=2.80、3.17,P<0.05)。结论利用RAP激活M2自噬,可抑制M2促进肿瘤微血管形成的能力,从而抑制移植瘤生长;同时,通过下调大肠癌移植瘤中抗凋亡基因Livin与Survivin的表达,诱导大肠癌移植瘤放疗后凋亡的发生,提高大肠癌的放射敏感性。