鸡环状RNA circSESN1的表达特性探究

本研究旨在鉴定鸡体内存在circSESN1的表达,并进一步探究circSESN1在鸡胸肌中的表达特性。试验一,分别选取不同生长发育阶段(E10、E19、21 d、49 d,n=4)的乌鸡组织样,利用RT-PCR、Sanger测序和qRT-PCR等技术鉴定环状RNA circSESN1,并检测circSESN1及其来源基因SESN1的时空表达特性;试验二,分别选取肉鸡腹腔注射葡萄糖(18 d,n=6)、丙酮酸钠(21 d,n=6)或胰岛素(24 d,n=6)不同时间点后的胸肌组织,探究外源性刺激对circSESN1表达的影响;试验三,选取15%能量限饲和15%蛋白限饲的肉鸡(21 d,n=10)胸肌组织,探究限饲对circSESN1表达的影响;此外,利用生物信息学分析软件对circSESN1的潜在性功能进行预测分析。结果如下:1)circSESN1在鸡体中存在表达,并且具有高度稳定性,不能被RNase R酶消解。2)circSESN1和来源基因SESN1在21 d乌鸡胸肌中的相对表达量最高,其次是腿肌和胰腺(P<0.01)。circSESN1在乌鸡胸肌不同生长发育阶段中表达量不同,在21 d时最高,在E10最低(P<0.01)。SESN1在E19乌鸡胸肌中表达量最高,在E10中最低(P<0.01)。3)外源胰岛素注射后,胸肌中circSESN1在不同时间点的表达量呈现先上升后降低的变化趋势,在注射胰岛素120 min后极显著高于基础状态或注射PBS组(P<0.01)。4)与对照组相比,15%能量限饲和15%蛋白限饲后鸡的胸肌中circSESN1的表达量显著降低(P<0.05)。5)对circSESN1潜在性功能预测后发现,circSESN1可以和多个miRNA结合,但不能编码蛋白。以上结果表明,circSESN1在鸡体内存在表达,且具有和其来源基因SESN1相似的时空表达特性。外源性胰岛素和限饲可以调控胸肌中circSESN1的表达。

杂合型伴性矮小基因对正常体型鸡脂肪沉积的影响

【目的】通过探究杂合型伴性矮小基因对鸡脂肪沉积的影响,了解其脂肪沉积动态变化的规律,为优质肉鸡和地方鸡种生产性能研究奠定基础。【方法】将正常体型的固始公鸡和广西瑶鸡公鸡(ZDWZDW)分别与正常型母鸡(ZDWW)和矮小型母鸡(ZdwW)交配,将杂交后代在同一条件饲养。分别于60日龄、90日龄、120日龄从每个杂交后代中各选取鸡只100只(公母各半),进行体尺指标的测定;分别于60日龄和90日龄从固始鸡的杂交群体中各选取鸡只10只(公母各半),进行体脂含量动态变化的研究;另于120日龄从固始和广西瑶鸡的杂交后代群体中各选鸡只10只(公母各半),进行体脂含量的测定;采用全自动生化分析仪测试血清生化指标;采用索氏抽提法测定胸肌、腿肌中肌内脂肪(IMF)的含量;通过制作石蜡切片,在显微镜下测定肌纤维直径和肌纤维密度。【结果】杂交后代个体体型均为正常型,固始鸡母本正常型群体的公、母鸡随日龄呈现了不同的脂肪沉积特性。母鸡的体脂指标包括腹脂重、腹脂率、皮下脂肪厚和肌间脂肪宽前期均保持在低水平,在120日龄得到显著提高,而公鸡的体脂水平一直维持在低水平;固始鸡母本矮小型群体公、母鸡随日龄表现了相似的脂肪沉积动态变化特性,120日龄公、母鸡的体脂沉积水平均显著高于60日龄/90日龄;母本矮小型群体公鸡(dw杂合子)表现了完全不同于母本正常型群体公鸡(DW纯合子)体脂变化的特性,其90日龄和120日龄的腹脂重、腹脂率、皮下脂肪厚和肌间脂肪宽均显著高于母本正常型群体公鸡。进一步整合120日龄固始鸡杂交群体和广西瑶鸡杂交群体的体脂数据发现,群体因素对腹脂重、肌间脂肪宽、皮下脂肪厚和胸肌肌内脂肪含量的效应均达到显著水平,特别是母本矮小型公鸡(dw杂合子)的腹脂重、腹脂率、肌间脂肪宽、皮下脂肪厚和胸肌肌内脂肪含量均极显著高于母本正常型公鸡(DW纯合子,P<0.01)。母本矮小型与母本正常型群体间在总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)含量、高密度脂蛋白(HDL)含量上均无显著差异。母本正常型和母本矮小型后代的肌纤维特性包括肌纤维密度、肌纤维面积、肌纤维直径均无显著性差异。【结论】杂合伴性矮小型基因改变了公鸡的脂肪沉积特性,显著提高了公鸡的腹部脂肪、皮下脂肪和肌间脂肪的沉积;改善了胸肌的肌内脂肪含量;而对血脂指标无显著影响;对肌纤维特性无显著影响。

外源胰岛素和能量限饲对鸡PPP1R3C表达的效应

旨在检测PPP1R3C在爱拔益加肉鸡不同组织中的表达情况,探究外源胰岛素和能量限饲对鸡体胰岛素敏感组织中PPP1R3C表达的影响。试验一,取不同发育阶段的雌性肉鸡(E14、E19、D7和D21,n=10)组织样,通过qRT-PCR技术检测PPP1R3C在不同时期胸肌中的表达;试验二,腹腔注射胰岛素(INS)或PBS,取两组注射后不同时间点(0、15、120和240 min,n=5)的D24雄性肉鸡组织样,检测PPP1R3C在肉鸡不同组织中的表达,探究外源胰岛素处理对肉鸡胰岛素敏感组织中PPP1R3C表达的影响;试验三,取D18雌性肉鸡,一组饲喂常规日粮(n=20),另一组饲喂限制30%能量的日粮(n=20),饲喂至48天屠宰取样,探究30%能量限饲对肉鸡PPP1R3C表达的影响;试验四,D7雌性肉鸡随机分为3组,对照组、15%能量限饲组和15%蛋白限饲组(n=10),分别饲养至D21屠宰取样,探究能量限饲是否具有剂量依赖性。结果表明:1)PPP1R3C在胸肌组织中高表达,其次是心和腿肌组织(P<0.05)。2)PPP1R3C表达量呈现了明显随鸡发育而升高的趋势。3)INS注射显著下调了胸肌中PPP1R3C的表达,在注射后120 min时PPP1R3C的表达显著低于0和15 min(P<0.05);PBS注射后胸肌中PPP1R3C的表达没有显著差异,在注射后120和240 min时,INS组PPP1R3C表达显著低于PBS组(P<0.05)。INS注射也降低了肝中PPP1R3C的表达,在INS处理15 min时PPP1R3C的表达已显著低于0 min(P<0.05);PBS注射后肝中PPP1R3C表达处于动态平衡,在注射后120 min时,INS组PPP1R3C表达显著低于PBS组(P<0.05)。胰岛素注射后在腹脂中出现了与胸肌和肝相反的结果,在胰岛素注射后15 min时PPP1R3C的表达显著高于0、120、和240 min(P<0.05),而0、120、和240 min之间没有显著差异;PBS注射后腹脂中PPP1R3C表达没有显著变化,在注射后15 min时,INS组PPP1R3C表达量显著高于PBS组(P<0.05)。4)30%能量限饲导致PPP1R3C在胸肌和肝中的表达均显著下调(P<0.05)。5)15%能量限饲和15%蛋白限饲不能显著影响胸肌中PPP1R3C的表达。以上研究表明,PPP1R3C在胸肌中表达最高,并随着个体发育表达上升,且外源胰岛素对PPP1R3C的表达效应具有明显的组织特异性。30%能量限饲可产生类似于外源胰岛素的效应,且能量限饲存在一定的剂量依赖性,本研究结果为进一步揭示鸡PPP1R3C功能奠定了基础。