源自天蚕素A和爪蟾素2的杂合肽P18体外抑制内皮细胞血管生成

目的探讨杂合肽P18体外对内皮细胞EA.hy926血管生成的抑制作用。方法采用MTT法检测P18对EA.hy926细胞增殖的影响;应用Matrigel实验检测P18对内皮细胞形成管状结构的影响;利用流式细胞术分析P18对内皮细胞的损伤作用。结果MTT结果显示P18可明显抑制EA.hy926细胞的增殖,且抑制率存在剂量依赖性;Matrigel实验表明P18具有抑制EA.hy926细胞体外分化成管状结构的作用;流式结果显示15μMP18作用内皮细胞6h后,所诱导的细胞坏死比例达到81.4%。结论体外实验结果表明,杂合肽P18具有体外抑制EA.hy926细胞血管生成的作用。

膜相关蛋白Numb在结肠癌中的表达和意义

目的探讨膜相关蛋白Numb在结肠癌组织中的表达和生物学意义。方法对63例结肠癌和20例正常结肠组织的组合组织芯片进行常规免疫组化染色,检测Numb蛋白的表达,结合临床病理资料进行分析。采用免疫荧光染色和Westen blot检测结肠癌SW480、SW620细胞系中Numb的表达。结果低分化的结肠癌组织较正常结肠组织和中、高分化的结肠癌组织胞浆中Numb的表达阳性率下降(P<0.05),Numb表达强度与结肠癌分化程度相关。Westen blot结果显示,结肠癌细胞系中Numb的表达强度,SW480较SW620细胞系高(P<0.05)。激光共聚焦免疫荧光染色观察,Numb呈点状分布于胞质和包膜,SW480较SW620细胞系在胞浆中分布更密集。结论 Numb可能在肿瘤进展过程中起保护作用,对肿瘤的发生发展有重要调控。

NUMB调控肿瘤增殖的机制研究

目的探讨膜相关蛋白NUMB调控肿瘤增殖的机制。方法构建NUMB基因敲除载体,转染Hela细胞后,经抗性筛选获得稳定细胞株,通过实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测NUMB基因和蛋白表达,验证NUMB基因敲除效果。采用裸鼠成瘤实验研究NUMB基因敲除对肿瘤增殖的影响;利用流式细胞术和Brdu标记实验检测NUMB缺失对细胞周期的影响;在体外模型中检测细胞周期各个时期多种调控蛋白的表达水平。结果 Western blot及qRT-PCR结果表明NUMB基因敲除的体外模型构建成功;裸鼠成瘤实验显示NUMB基因敲除促进肿瘤增殖;流式细胞术和Brdu标记实验表明NUMB基因缺失加速细胞周期G1/S期转换,促进肿瘤细胞增殖;Western blot检测发现NUMB基因敲除组细胞周期调控蛋白Cyclin-E的表达增加,而P27的表达降低。结论 NUMB通过调控Cyclin-E以及P27的蛋白水平影响细胞周期,进而调控肿瘤增殖。