c-myc反义寡核苷酸对结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响

目的:研究体外c-myc反义寡核苷酸(ASODN)对人结肠癌HT-29细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响.方法:利用脂质体LipofectamineTM2000介导将c-myc ASODN转染入大肠癌HT-29细胞中,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、Western blot方法检测c-myc基因mRNA及蛋白的表达,MTT、流式细胞仪(FCM)检测c-myc ASODN对人结肠癌HT-29细胞增殖抑制及其对奥沙利铂敏感性影响.结果:转染c-myc ASODN后,HT-29细胞内c-mycm RNA水平显著降低(0.464±0.029vs0.974±0.027,0.945±0.012,均P<0.01).在HT-29细胞中存在分子质量62kDa的特异性条带,与c-myc分子质量相符,ASODN组在PVDF膜上的特异性条带明显弱于对照组;MTT结果显示转染c-myc ASODN48h后的HT-29细胞的增殖速度较对照组细胞明显减慢.FCM显示c-myc ASODN转染后72h后,奥沙利铂+c-myc ASODN组细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05).结论:体外c-myc ASODN可抑制c-myc mRNA及蛋白的表达,阻断c-myc可抑制HT-29细胞增殖并增强其对奥沙利铂的敏感性,可能为大肠癌的基因治疗提供新的靶点.

热风炉自动控制技术应用

主要介绍安钢2000 m3级热风炉工艺流程和及自动控制系统,并着重阐述了热风炉燃烧过程的串级控制部分,使煤气在炉内能充分燃烧,提高燃烧效率,节省了能源,减少了大气的污染、保护了环境。

Beclin 1增强三阴性乳腺癌BT-549细胞对紫杉醇的敏感性

目的:研究Beclin 1对于三阴性乳腺癌BT-549细胞对紫杉醇的敏感性的影响。方法:应用慢病毒介导Beclin 1表达载体转染BT-549细胞,嘌呤霉素筛选阳性细胞;MTT法检测各组细胞的增殖抑制率;流式细胞术和Hoechst33342染色法检测细胞凋亡情况;吖啶橙染色法检测细胞内酸性囊泡形成情况。结果:成功构建稳定表达Beclin 1的BT-549细胞;紫杉醇作用24 h,Beclin 1组的IC50为(416.85±16.97)μg/L,显著低于空载体组(1725.43±99.70)μg/L和未转染组(2130.10±190.74)μg/L(F=154.847;P<0.00);作用48 h,Beclin 1组IC50为(74.48±10.18)μg/L,显著低于空载体组(280.18±14.78)μg/L和未转染组(614.80±9.29)μg/L(F=1638.484;P<0.00);50μg/L紫杉醇处理48 h,Beclin1组BT-549细胞凋亡率为(46.40±1.00)%,显著高于空载体组(37.81±1.85)%和未转染组(35.55±3.36)%(F=14.661;P<0.005),Beclin 1组细胞细胞核凋亡特征改变较其他两组更明显;紫杉醇处理后,Beclin 1组细胞酸性囊泡形成显著多于其他两组。结论:Beclin 1显著增强三阴性乳腺癌细胞对紫杉醇的敏感性。

HIF1α、PTEN与VEGF在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF1α)、第10染色体磷酸酶基因(PTEN)与血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色SP法检测44例乳腺癌组织及10例乳腺良性病组织中HIF1α、PTEN和VEGF蛋白的表达情况。结果HIF1α与VEGF在乳腺癌组织高表达,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),PTEN在乳腺癌组织的表达低于对照组(P<0.01),HIF1α与VEGF的高表达与乳腺癌组织学分级、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05);PTEN表达在腋淋巴结是否转移及ER状况之间比较差异均有显著性(P<0.05);HIF1α表达与VEGF表达呈显著正相关(rs=0.344,P=0.022),与PTEN表达显著负相关(rs=-0.374,P=0.012)。结论在乳腺癌中HIF1α、VEGF与PTEN蛋白表达水平有相关性,三者在乳腺癌发生、发展和转移中有重要意义,对临床判断乳腺癌预后也有一定价值。

消除胶印铜板纸背面粘脏方法浅探

联系印刷生产实际,在分析铜版纸胶印过程中发生背面粘脏原因的基础上,探讨了消除胶印铜版纸背面粘脏的措施和方法。

VEGF反义寡核苷酸对体外生长的大肠癌HT-29细胞的抑制作用

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸(ASODN)对体外生长的人大肠癌HT-29细胞的抑制作用.方法:实验设空白对照组、脂质体转染组、错义链转染组(SODN组)和不同浓度反义链转染组(ASODN组).用LipofectamineTM2000介导的VEGF ASODN和错义寡核苷酸(SODN)转染人大肠癌细胞株HT-29,半定量RT-PCR检测各组细胞VEGF mRNA的表达;Western blot测定转染48、72h后VEGF蛋白表达;MTT法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡.结果:转染48h后,ASOND组的VEGF mRNA表达水平明显低于脂质体对照组和SODN组(0.455±0.032vs0.934±0.031,0.915±0.004,P<0.01);脂质体对照组与SODN组之间无显著差异.细胞转染48、72h后,ASODN组蛋白表达明显弱于脂质体对照组和SODN组,且72h弱于48h.与对照组比较,VEGF ASODN对HT-29细胞有明显的生长抑制作用,并且抑制呈剂量和时间依赖性(P<0.05).结论:VEGF ASODN通过抑制VEGF的基因表达,对体外生长的人大肠癌HT-29细胞的增殖进行抑制.

板坯去毛刺机的技术改进

介绍了板坯去毛刺机的结构特点,对该设备存在的问题与缺点进行了分析,并提出了相应的改进措施,通过对去毛刺机气缸以及其它一些辅助设备的改进,取得了良好的效果。

Beclin 1蛋白增强三阴性乳腺癌细胞对5-Fu敏感度的研究

目的探讨Beclin 1蛋白与三阴性乳腺癌细胞对5-Fu敏感度的关系。方法应用慢病毒介导p Len O-GTP-BECN1表达载体稳定转染至BT-549细胞,嘌呤霉素筛选阳性细胞,设立对照组。使用不同浓度5-Fu处理各组细胞,MTT法比较细胞对5-Fu的敏感度;流式细胞术和Hoechst33342实验检测细胞凋亡情况;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-8表达情况。结果成功构建稳定表达Beclin 1蛋白的BT-549细胞株。p Len O-GTP-BECN1组对5-Fu敏感度显著高于其他两组;5-Fu作用48 h后,p Len O-GTP-BECN1组的IC50为(3.54±0.20)μg/ml,显著低于空白载体p Len O-GTP组(14.45±1.81)μg/ml和空白组(79.40±8.34)μg/ml(F=207.902;P<0.00)。5-Fu作用前,p Len O-GTP-BECN1组凋亡率为(12.14±0.76)%,同p Len O-GTP组(13.57±1.04)%和空白组(13.75±1.29)%(F=2.096;P=0.204)之间差异并无统计学意义;5-Fu作用48 h后,p Len O-GTP-BECN1组凋亡率为(51.01±3.26)%,显著高于p Len O-GTP组(42.17±4.6)%和空白组(38.42±2.93)%(F=9.32;P<0.01);接受5-Fu处理后,p Len O-GTP-BECN1组细胞核凋亡特征改变较其他两组更明显。5-Fu作用后,p Len O-GTP-BECN1组细胞Caspase-3相对表达量为(0.57±0.0028),显著高于p Len O-GTP组(0.42±0.010)和空白组(0.30±0.046)(F=46.134;P<0.01);p Len O-GTP-BECN1组细胞Caspase-8相对表达量为(0.44±0.0038),显著高于p Len O-GTP组(0.18±0.0095)和空白组(0.27±0.00060)(F=1006.757;P<0.00)。结论Beclin 1显著提高三阴性乳腺癌细胞对5-Fu的敏感度,其中促进凋亡发生可能是重要机制之一。

乳腺浸润性导管癌患者血清HIF-1α、Ala-A水平变化及意义

目的探讨乳腺浸润性导管癌患者血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和丙氨酸(ALa-A)的水平变化及意义。方法用ELISA法检测127例乳腺浸润性导管癌患者(原发性117例、复发性10例)、20例乳腺良性肿瘤患者和31例正常人血清HIF-1α,用高效液相色谱法检测其血清ALa-A。结果乳腺浸润性导管癌患者血清HIF-1α水平明显高于良性肿瘤患者和正常人(P均<0.01),复发浸润性导管癌患者高于原发性者(P<0.05);乳腺浸润性导管癌患者血清ALa-A水平低于乳腺良性肿瘤患者和正常人(P均<0.01);血清HIF-1α和ALa-A水平与乳腺浸润性导管癌病理分期、组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移有关(P均<0.05),HIF-1α与ALa-A呈负相关(r=-0.860,P<0.01)。结论乳腺浸润性导管癌患者血清HIF-1α和ALa-A水平有异常变化,可作为诊断乳腺浸润性导管癌的指标,并可用于评价其生物学行为。

悬浮芯片检测血清HIF-1α的含量对于乳腺癌诊断的价值

目的探讨乳腺浸润性导管癌患者组织和血清中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达水平及其与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用悬浮芯片技术(suspension array)检测31例健康人、20乳腺良性肿瘤患者、117例乳腺原发浸润导管癌患者及10例乳腺复发浸润导管癌患者血清和组织中HIF-1α蛋白的表达水平,分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果(1)原发、复发浸润性导管癌组血清和组织中HIF-1α含量高于良性肿瘤组和正常对照组(P<0.01);(2)复发浸润导管癌组血清和组织中HIF-1α含量明显高于原发浸润导管癌(P<0.01和P<0.05);(3)良性肿瘤组和正常对照组血清和组织中HIF-1α含量之间没有统计学意义;(4)血清和组织中HIF-1α的水平与乳腺浸润性导管癌患者临床分期、病理组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移等密切相关(P<0.01)。血清和组织中HIF-1α的含量变化呈正相关(P<0.01)。结论乳腺浸润性导管癌血清HIF-1α含量的异常变化可能是癌变过程的进展行为,而血清HIF-1α的水平可能成为评价乳腺浸润性导管癌临床分期、病理组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移等生物学的重要指标。

5-杂氮-2′-脱氧胞苷对乳腺癌MCF-7细胞体外迁移能力的影响及机制探讨

目的观察5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对非浸润性人乳腺癌MCF-7细胞体外迁移能力的影响,并探讨其机制。方法将MCF-7细胞分两组,观察组用含5.0μM5-Aza-CdR的培养液处理4 d,对照组加入等体积的DMSO。采用细胞划痕实验观察细胞体外迁移能力,采用RT-PCR、甲基化特异性PCR(MSP)法检测CXC趋化因子受体-4(CXCR4)、乳腺癌转移抑制基因-1(BRMS1)mRNA及其启动子区甲基化状态。结果与对照组比较,观察组36、48 h细胞划痕愈合率明显升高,MCF-7细胞的CXCR4 mRNA表达量明显增加(P<0.05);5-Aza-CdR使CXCR4启动子区甲基化的CpG岛1完全去甲基化,BRMS1启动子区CpG岛B的非甲基化状态亦无明显改变。结论 5-Aza-CdR增强了MCF-7细胞的体外迁移能力,可能与其去甲基化机制上调了促转移基因CXCR4表达有关。

5-杂氮-2'-脱氧胞苷对乳腺癌MCF-7细胞实验性肺转移的影响

目的:探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对非浸润性人乳腺癌MCF-7细胞实验性肺转移的影响及可能的机制。方法:将MCF-7细胞分为对照组与5-Aza-CdR处理组,分别通过半定量RT-PCR(semi-quantitative RT-PCR,SqRT-PCR)与甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)方法检测两组细胞的CXC趋化因子受体-4(CXCR4)、乳腺癌转移抑制基因-1(BRMS1)的mRNA表达与启动子区甲基化状况。然后分别将两组细胞通过边缘尾静脉注射到BALB/c nu/nu裸鼠体内,5周后,用荧光定量RT-PCR(fluorescent quantitative RT-PCR,FqRT-PCR)检测裸鼠肺组织内的目的基因HPRT mRNA丰度。结果:处理组CXCR4mRNA表达明显上调(P<0.05),5-Aza-CdR使CXCR4启动子区甲基化的CpG岛1完全去甲基化;两组BRMS1mRNA表达无明显差异(P>0.05),BRMS1启动子区CpG岛B的非甲基化状态亦无明显改变。处理组裸鼠肺脏HPRT mRNA丰度高,转移癌组织较多。结论:5-Aza-CdR通过去甲基化机制上调了促转移基因CXCR4的表达,从而增强了MCF-7细胞实验性肺转移能力。

烧结主抽风机自动控制系统的设计与应用

介绍了安钢烧结机主抽风机同步电动机自动控制系统的设计和应用情况。根据各项技术参数表明所采用的液阻起动方式、KGLF-2C型励磁装置和采用PLC自动控制系统性能稳定,运行可靠,具有广泛的应用前景和推广价值。

OPC网络互访技术在转炉控制系统中的应用

介绍了OPC网络互访技术在安钢转炉控制中的应用情况,分析了现场工控网络的系统结构,对于不同网络中站点难于互访这一工业项目中常见的问题提出了一种简单的解决方案。

Trastuzmab F(ab′)_2修饰紫杉醇免疫脂质体对人大肠癌HT-29细胞的杀伤作用

目的构建Trastuzmab F(ab′)2修饰的紫杉醇免疫脂质体并测定其对体外生长的人大肠癌HT-29细胞的杀伤作用。方法采用逆相蒸发法合成紫杉醇脂质体,使用胃蛋白酶在Tastuzumab抗体J链Fc段侧切断抗体以获得抗体F(ab′)2段,抗体交联法制备Trastuzmab F(ab′)2段修饰的紫杉醇免疫脂质体;透射电子显微镜观察免疫脂质体的形态及粒径分布;采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)及荧光标记法测定免疫脂质体包封率和活性;MTT检测细胞的杀伤率。结果成功构建了Trastuzmab F(ab′)2修饰的紫杉醇免疫脂质体;所得免疫脂质体平均粒径为210nm,粒径小于200nm者占91.37%;且其具有较高的包封率和稳定性;相同时间内,HT-29细胞对紫杉醇免疫脂质体的摄取要明显高于对照组;Trastuzmab F(ab′)2修饰的紫杉醇免疫脂质体对HT-29细胞的杀伤作用强于对照组(P<0.01),且该作用具有时间依赖性(P<0.01)。结论成功构建Trastuzmab F(ab′)2修饰的紫杉醇免疫脂质体,其对体外生长的大肠癌细胞具有较强的杀伤作用。

羟考酮不同给药方法对TURP术后患者致痛物质水平及膀胱痉挛痛的影响

目的:探究羟考酮不同给药方法对经尿道前列腺切除术(Transurethral resection of prostate,TURP)术后患者致痛物质水平及膀胱痉挛痛的影响。方法:回顾性分析本院2020年3月至2021年3月收治的116行例TURP术患者的临床资料,依据其不同的给药方式分为A、B、C组,A组45例患者采取患者自控静脉镇痛(patient controlled intravenous analgesia,PCIA)持续泵注,B组37例患者采取PCIA单次给药,C组34例患者不采取PCIA镇痛。对比不同组别患者术后致痛物质[血浆P物质、5-羟色胺(5-HT)]水平、48h膀胱痉挛痛次数、视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)、不良反应发生情况。结果:A、B组患者VAS评分、48h膀胱痉挛次数与总持续时间均明显低于C组,三组患者VAS评分、48h膀胱痉挛次数与总持续时间的组间差异存在统计学意义,P<0.05;A、B组患者P物质、5-HT水平显著低于C组,三组患者P物质、5-HT水平的组间差异存在统计学意义,P<0.05;A(35.56%)、B(32.43%)、C组(20.59%)患者不良反应总发生率差异无统计学意义,P>0.05。结论:羟考酮PCIA持续泵注与单次给药均能够达到TURP术后镇痛及缓解膀胱痉挛痛的作用,且无严重的不良反应,值得临床参考借鉴。