ctDNA在结直肠癌患者全程管理中的临床应用现状及展望

循环肿瘤DNA(ctDNA)是来自于凋亡/坏死肿瘤细胞释放到体液中的单链和双链DNA片段,具有与肿瘤组织相似的遗传构成。结直肠癌(CRC)患者体液中的ctDNA携带肿瘤细胞的遗传特征并描述肿瘤组织的分子学特性。越来越多的研究表明ctDNA在CRC早期诊断、围手术期全程管理以及辅助晚期治疗等各个方面都发挥一定的应用价值。该文就ctDNA在CRC发生发展各个阶段中的应用现状作一综述。

肥胖基因多态性与代谢综合征痰证病位、病性兼杂规律及理化指标相关性研究

目的探讨肥胖基因(FTO)多态性位点rs9939609(A/T)与代谢综合征(MS)痰证病位、病性兼杂规律及理化指标的相关性。方法选择MS痰证患者199例,MS非痰证患者113例,健康人198名,采用证素辨证法分析各证素分布情况;采用SNPscanTM多重SNP分型技术方法检测FTO单核苷酸多态性(SNPs)位点rs9939609的基因型频率、等位基因频率及其与痰证病位、病性兼杂规律的相关性。结果FTO多态性位点rs9939609的3种基因型频率3组比较差异有统计学意义(P<0.01);痰证组、非痰证组基因型AA与AT频率高于健康组(P<0.01)。FTO基因位点rs9939609健康组、痰证组等位基因T频率高于非痰证组(P<0.01)。痰证组中,阴虚的TT基因型频率高于非阴虚(P<0.01),AT基因型的男性比例高于女性(P<0.05),AT基因型的低密度脂蛋白(LDL-C)、肌酐(Cr)明显高于TT基因型(P<0.05,P<0.01)。结论FTO基因与MS形成有关,携带FTO基因多态性位点rs9939609基因型AA、AT和风险等位基因A会增加MS发生风险;FTO多态性位点rs9939609与MS痰证及兼杂病性阴虚的形成相关,FTO是MS痰证易感基因之一;在MS痰证组中,男性更易携带FTO基因多态性位点rs9939609AT基因型;FTO基因多态性位点rs9939609与MS痰证的LDL-C、Cr代谢有关。

抗抑郁药蒲郁胶囊对雄性大鼠性功能的影响及其机制初探

目的观察蒲郁胶囊对雄性大鼠性功能与血清雄激素的影响,并与米氮平和药氟西汀进行比较,研究蒲郁胶囊的药理学特点。方法60只雄性大鼠随机分为空白、氟西汀、米氮平和蒲郁胶囊低、中、高剂量共6组。重复给药1周和2周后,通过大鼠交配行为模型和非接触行为模型观察大鼠性功能的差异;之后分别加入五羟色胺1A受体拮抗剂WAY100635和部分激动剂丁螺环酮观察交配行为和非接触性阴茎勃起行为;最后取血,分离血清,ELISA法检测各组雄性大鼠血清雄激素水平。结果氟西汀对性功能有抑制作用,而蒲郁胶囊和米氮平对大鼠性功能均无影响;3种药物对大鼠雄激素均无影响。加入WAY100635和丁螺环酮后能逆转氟西汀引起的性功能障碍,对蒲郁胶囊无影响。结论蒲郁胶囊对雄性大鼠雄激素与性功能的影响均较小,优于氟西汀等SSRIs类抗抑郁药物,其原因可能与其不影响5-HT有关。

代谢综合征痰证大鼠模型建立与评价的实验研究

目的探索代谢综合征痰证大鼠模型的建立与评价方法。方法50只SPF级Wistar雄性大鼠适应性喂养1周后按体质量随机分成空白组(n=12)和造模组(n=38),分别予以普通饲料和高糖高盐高脂饲料喂养12周。造模期间每4周动态检测两组大鼠体质量、腹围、血压、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、高密度脂蛋白(high fensity lipoprotein,HDL)、甘油三酯(tirglyceirde,TG)等,12周末增加血清胰岛素(fasting Insulin,FINS)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)的检测,计算Lee′s指数和胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment insulin resistance index,HOMA-IR),根据模型评价标准评价造模情况,筛选成模动物。将24只造模成功的大鼠其按体质量随机分为模型组(n=12)和二陈汤组(n=12),二陈汤组予以二陈汤(5.3 g/kg)灌胃,模型组及空白组则予以生理盐水(10 mL/kg)灌胃,1次/d,连续干预4周。16周末测体质量、腹围、血压、FINS、FBG、TG、HDL、LDL、TC、计算Lee′s指数和HOMA-IR。结果12周末,造模组大鼠体质量、腹围、舒张压(SBP)、收缩压(DBP)、HDL、TG、FBG、FINS、Lee′s指数、HOMA-IR均明显升高,HDL明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05),根据模型标准,最终24只大鼠造模成功。二陈汤干预后,与模型组大鼠各指标比较,二陈汤组大鼠体质量、腹围、DBP、HDL、TG、FBG、FINS、Lee′s指数、HOMA-IR均明显下降,HDL明显上升,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论通过证候表现、客观指标及药物反证等论证,本实验成功复制出代谢综合征痰证大鼠模型,同时将证候表现、客观指标及药物反证等结合应为中医病证动物模型建立和评价的基本思路。

不同时长脱氢表雄酮诱导多囊卵巢综合征大鼠模型的比较

目的观察脱氢表雄酮(DHEA)诱导多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型21 d、49 d后血清性激素水平和卵巢形态学改变,比较不同时长DHEA诱导PCOS大鼠模型的差异,为选择合适的诱导时长提供实验依据。方法将28只SPF级SD雌性大鼠分为正常组(n=10)和造模组(n=18),正常组大鼠每日皮下注射0.2 mL的注射用大豆油剂48天,造模组大鼠每日皮下注射脱氢表雄酮20天。于第11天采集并观察各组大鼠阴道脱落细胞;第21天,尾静脉采血检测各组血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平,同时各组随机抽取2只大鼠进行卵巢组织HE染色观察,并将造模组再分为模型组Ⅰ(n=8)和模型组Ⅱ(n=8)。模型组Ⅰ每日皮下注射0.2 mL的注射用大豆油剂,模型组Ⅱ每日皮下注射脱氢表雄酮,均连续注射28 d。第49天,采集各组血清及卵巢标本,分别检测各组血清T、FSH及LH水平,HE染色法观察各组卵巢组织形态学变化。结果造模组大鼠动情周期失去规律;第21天,造模组血清T、LH水平高于正常组(P<0.01),FSH水平与正常组比较差异无统计学意义;第49天,模型组Ⅰ及模型组Ⅱ的T、LH水平高于正常组(P<0.01);模型组Ⅱ的T水平高于模型组Ⅰ(P<0.01);模型组Ⅰ及模型组Ⅱ的FSH水平和黄体个数均低于正常组(P<0.05,P<0.01),同时模型组Ⅱ黄体个数少于模型组Ⅰ(P<0.01);模型组Ⅰ卵巢指数高于正常组,模型组Ⅱ卵巢指数低于正常组,差异无统计学意义,模型组Ⅱ卵巢指数低于模型组Ⅰ(P<0.05)。结论采用DHEA诱导20 d的PCOS大鼠模型,经历4周后,不存在自愈,与持续造模相比更为简便易行,同时其卵巢形态结构以及激素水平变化也更符合临床表现。

中医状态指导下的糖组学应用探讨

状态是结构与功能、时间与空间的统一体,状态在外界因素刺激下,可以通过脏腑、经络、气血等作出相应的反应。人的状态分为未病状态、欲病状态、已病状态、病后状态4种。文章通过文献梳理,探讨系统生物学中糖组学研究方法在中医疾病状态下的应用,以期在系统论、整体论的思维指导下,运用糖组学技术,寻找疾病状态下的特异性糖组、阐释中医状态的物质基础、丰富中医状态的微观参数采集方法、建立微观辨识模型。

李灿东治疗胃病验案举隅

李灿东教授认为,胃病的病位虽然在胃,但和脾也有很大的关系。对于脾胃虚寒的胃病,要注重温补脾胃。对于胃病的治疗,要立足于整体,不能只拘泥于胃。此外,对于寒热失调的胃病,又该平调寒热;对于表里不和的胃病,又该和解表里;对于阴虚痰扰的胃病,又该滋阴化痰。总之,审其疾病的表里寒热、阴阳虚实而治之。多主张消补兼施,使祛邪不伤正,扶正不敛邪。常以神曲、山楂、鸡内金等消食之品与大枣、党参、白术等扶正之药同用。用药精炼,随证化裁,疗效确切。

腹腔镜基础技能模拟培训BEST课程的实施效果与思考

目的:分析总结近10年腹腔镜基础技能模拟培训课程实施效果及课程内容与模具更新的实践经验。方法:收集2012年至2022年参加腹腔镜基础技能模拟培训(basic essential surgical technique training,BEST)课程的学员的课前评估问卷、腹腔镜基本操作考核成绩及课后评估问卷等信息。按照课程建设的时间段分为两组,即参加前期使用单一培训系统课程的学员(传统组)和后期课程模具更新后使用多种培训系统整合课程的学员(试验组)。比较两组学员完成轨道移圈、穿隧道和高低柱3项操作的客观成绩及学员对课程设置、实施效果方面的主观课程反馈评价。研究依照数据类型使用SPSS 13.0分别进行t检验、Wilcoxon检验或卡方检验。结果:150名传统组学员完成轨道移圈、穿隧道和高低柱3项的用时分别是1.08 min(0.81 min,1.60 min)、2.20 min(1.60 min,3.27 min)和4.86 min(3.28 min,6.36 min),而75名试验组学员对应用时为1.27 min(0.87 min,1.83 min)、2.57 min(1.58 min,4.07 min)和4.35 min(2.90 min,6.42 min),差异均无统计学意义(P>0.05)。学员对课程评价方面,试验组学员在课堂环境氛围、授课方式安排、培训设备器械、培训练习机会、助力临床工作及符合课前预期这6项的主观评价满意百分率均高于传统组。结论:不断更新的BEST课程可保证学员的培训质量并获得学员们对课程更高的满意度,而本课程对临床实际中的获益可通过对这些培训学员进行长期随访而进一步验证。

二陈汤对代谢综合征痰证大鼠血清代谢组学的影响

目的:利用UHPLC-QE-MS代谢组学技术筛选代谢综合征(MS)痰证可能的特征标志物,从代谢角度初步探讨二陈汤改善MS痰证的机制,为寻找化痰的靶点提供参考依据。方法:50只SPF级雄性Wistar大鼠随机分成空白组12只,造模组38只,以高糖高盐高脂饮食喂养12周复制MS痰证大鼠模型。检测大鼠的一般状况、生长、血压、糖脂代谢情况,根据模型评价标准筛选成模大鼠,将24只成模大鼠随机分为模型组和二陈汤组各12只,二陈汤组予二陈汤5.3 g/kg灌胃,模型组及空白组予0.9%氯化钠溶液10.5 mL/kg灌胃,每日1次,连续4周。收集第16周末空白组(9只)、模型组(8只)和二陈汤组(9只)大鼠血清。利用LC-MS技术进行检测,对数据进行分析以筛选差异代谢产物,并登入京都基因与基因组百科全书数据库整理出差异代谢产物映射的所有通路,通过对差异代谢物所在通路的富集和拓扑分析,寻找差异代谢通路。结果:以VIP>1且P<0.05为卡值,空白组和模型组最终鉴定出357种差异代谢产物;模型组和二陈汤组最终鉴定出109种差异代谢产物。空白组-模型组与模型组-二陈汤组,P<0.05或影响因子>0的共同代谢通路分别是甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢。空白组和模型组共同的代谢通路命中的差异代谢产物为甘氨酸、L-丝氨酸、D-丝氨酸、L-苏氨酸、L-天冬氨酸、L-别苏氨酸、肌酸;模型组和二陈汤组则为二甲基甘氨酸、肌酸和琥珀半醛。结论:甘氨酸、L-丝氨酸、D-丝氨酸、L-苏氨酸、L-天冬氨酸、L-别苏氨酸、肌酸可能是MS痰证的特征标志物,二甲基甘氨酸、肌酸和琥珀半醛等代谢产物则与二陈汤化痰作用紧密相关,其所在代谢通路可能是治疗痰证潜在切入点。

四君子汤对高脂饮食C57BL/6小鼠脂质代谢和组织脂蛋白酯酶基因表达的影响

目的:观察四君子汤对高脂饮食C57BL/6小鼠脂质代谢的影响,探讨四君子汤健脾益气化痰的作用机制。方法:40只C57BL/6雄性小鼠分为正常组(8只)和高脂组(32只),分别用普通饲料和高脂饲料喂养10周。造模成功后,于第11周将高脂组随机分成模型组、四君子汤组、二甲双胍组和辛伐他汀组,每组8只。除正常组、模型组给予0.9%氯化钠溶液外,其余各组分别给予相应的药物,连续灌胃4周。每2周记录各组体质量、体长、腹围,第4、10周末眼眶静脉丛取血,第14周末摘眼球取血,进行血清总胆固醇(TG)、甘油三酯(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)检测。14周末处死小鼠,取内脏脂肪和骨骼肌检测脂蛋白酯酶(LPL)mRNA和蛋白表达。结果:干预后,各治疗组小鼠体质量、腹围及血清TG、TC、LDL-C均显著低于模型组(P<0.05,P<0.01)。小鼠内脏脂肪中,四君子汤组LPLmRNA和蛋白表达显著低于模型组(P<0.01,P<0.05)。结论:四君子汤能降低高脂饮食小鼠的体质量、腹围及血清中TG、TC、LDL-C含量,可能是通过抑制内脏脂肪中LPL表达,减少脂肪囤积,达到益气健脾化痰的目的。

不同化痰法对高脂饮食C57BL/6小鼠脂质代谢肝脏组织PPARγ基因表达的影响

目的观察不同化痰法对高脂饮食诱导C57BL/6小鼠脂质代谢的影响,分析小鼠肝脏组织中PPARγ基因表达的变化,初步探讨二陈汤燥湿化痰和四君子汤健脾化痰降脂的分子机制。方法将40只SPF级C57BL/6雄性小鼠分为正常组(n=8)和高脂组(n=32),分别给予正常饲料和高脂饲料喂养10周。第11周,将高脂组随机分成模型组、二陈汤组(8.7g·kg-1·d-1)、四君子汤组(6.6g·kg-1·d-1)和辛伐他汀组(2 mg·kg-1·d-1),每组8只。正常组和模型组以相同体积蒸馏水灌胃(10 mL·kg-1·d-1),其余3组给予相应药物灌胃,每日一次,连续4周。第4周和第10周记录各组体质量、体长和腹围,以及计算其Lee’s指数;第10周小鼠眼眶静脉窦采血,测血清总胆固醇(TG)、甘油三酯(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。第14周采集标本,检测各组小鼠血清的TG、TC、HDL-C、LDL-C水平及肝脏组织中PPARγ基因和蛋白的表达量。结果第10周末,高脂组的体质量、腹围、Lee’s指数、TG、TC、HDL-C和LDL-C均明显高于正常组(P<0.05)。干预4周后,各治疗组的体质量、腹围、Lee’s指数、TG和TC均显著低于模型组(P<0.05)。同时在肝脏组织中,模型组的PPARγmRNA和蛋白表达均明显低于正常组(P<0.05,P<0.01);二陈汤组的PPARγmRNA和蛋白表达均显著高于模型组(P<0.05,P<0.01);四君子汤组的PPARγmRNA表达显著高于模型组(P<0.05),蛋白表达有升高的趋势但无统计学意义。结论不同化痰法对高脂饮食小鼠的治疗作用主要表现在降低体质量、腹围、Lee’s指数、TG和TC,上调肝脏组织中PPARγ的表达是两者化痰的共同作用机制之一。

代谢综合征痰证与湿证患者的血清代谢组学比较研究

目的:比较代谢综合征(MS)痰证与湿证患者血清代谢组学特征。方法:收集MS痰证患者30例、湿证患者30例,30名健康人群,运用核磁共振氢谱(1H-NMR)定量检测血清代谢物含量,采用主成分分析法(PCA)、正交偏最小二乘判别分析法(OPLS-DA)进行多元统计分析。结果:痰证的潜在标志物为胆碱、二甲胺、脂类=CH-CH2-CH-、肌氨酸、苏氨酸;湿证的潜在标志物为丙酮、乳酸、脂类-CH2-C=O、脂类-CH=CH-、丙酮酸、极低密度脂蛋白-CH2-CH2-C=O。结论:MS痰证、湿证患者血清存在物质代谢及代谢通路的改变,MS湿证患者可能存在糖代谢异常及脂代谢异常。

代谢综合征痰证不同症候群病位、病性兼杂与脂蛋白酯酶基因多态性的关系研究

目的:探讨代谢综合征(MS)痰证不同症候群病位、病性兼杂与脂蛋白酯酶(LPL)基因多态性位点rs10503669(A/C)的关系。方法:收集398例MS患者,180名健康人,采用证素辨证法将患者分为痰证(257例)和非痰证(141例),并根据2005年国际糖尿病联盟(IDF)诊断标准,将患者分为不同症候群组:中心性肥胖、高血压、糖代谢异常组(A组),中心性肥胖、高血压、血脂异常组(B组),中心性肥胖、血脂异常、糖代谢异常组(C组),中心性肥胖、高血压、血脂异常、糖代谢异常组(D组),采用多重SNP分型技术测定其LPL基因rs10503669位点的基因多态性,分析痰证和非痰证相应组间基因型频率、等位基因频率差异及其与痰证病位、病性兼杂的关系。结果:痰证A组LPL基因rs10503669位点风险基因型AA、CA及风险等位基因A的比例较健康组、非痰证A组显著升高(P<0.05,P<0.01),痰证A组病位证素肝、脾的AA、CA基因型频率远高于非肝、非脾(P<0.05)。结论:LPL基因rs10503669位点等位基因A是MS痰证人群中心性肥胖、高血压及糖代谢紊乱(A组)症候群的危险因素,其与MS痰证A组的形成有关,同时也可能与MS痰证A组症候群病位肝脾有关。

平胃散对糖脂代谢紊乱小鼠血脂血糖和HNF-1β表达的影响

目的：观察平胃散对高脂饮食诱导的糖脂代谢紊乱小鼠血脂、血糖和肝细胞核因子-1β（hepatocyte nuclear factor-1β,HNF-1β/TCF2）表达的影响,探讨平胃散调节糖脂代谢可能存在的分子机制。方法：40只SPF级C57BL/6J成年雄性小鼠随机分为正常组（n=8）和造模组（n=32）,分别以普通饲料和高脂饲料喂养10周。第11周起,将造模组随机分为模型组,平胃散组（6 g·kg^-1·d^-1）,二甲双胍组（300 mg·kg^-1·d^-1）和辛伐他汀组（2 mg·kg^-1·d^-1）,每组8只。正常组及模型组只给予相同体积蒸馏水,即各组灌胃10 m L·kg^-1·d^-1,通过药物干预4周。喂养期间对体质量、腹围、血脂、血糖和胰岛素进行连续监测。干预结束后取肝脏和肾脏组织检测HNF-1β的mRNA和蛋白表达。结果：第10周末,与正常组比较,造模组体质量,腹围,胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,低密度脂蛋白（LDL-C）,高密度脂蛋白（HDL-C）和空腹血糖（FPG）均明显升高（P〈0.05）,空腹胰岛素（FINS）明显降低（P〈0.05）。用药4周后,与正常组比较,模型组体质量、腹围、血脂和口服葡萄糖耐量试验（OGTT）4个时间段血糖均显著升高（P〈0.01）,FINS,HNF-1β的mRNA和蛋白相对表达量均降低（P〈0.05）。与模型组比较,平胃散组体质量,腹围,TC,TG和OGTT 4个时间段血糖均降低（P〈0.05）,FINS,HNF-1β的mRNA和蛋白相对表达量均升高（P〈0.05）,二甲双胍组体质量,腹围,TC,TG,LDL-C,OGTT 4个时间段血糖均降低（P〈0.05）,FINS,HNF-1β的mRNA和蛋白相对表达量均升高（P〈0.05）,辛伐他汀组体质量、腹围、血脂均显著降低（P〈0.01）,FINS,HNF-1β的mRNA和蛋白相对表达量均升高（P〈0.05）。结论：高脂饮食喂养10周即可建立良好的糖脂代谢紊乱小鼠模型,平胃散可能通过调节HNF-1β的表达来调节血脂和血糖水平。

国产3D腹腔镜用于住院医师进阶整合二段式腹腔镜模拟培训效果分析

目的探讨国产3D腹腔镜用于住院医师腹腔镜外科基本技能培训的可行性及效果。方法选择2019年12月至2021年12月在上海交通大学医学院附属瑞金医院接受进阶整合二段式腹腔镜模拟培训一阶段课程的35名外科住院医师作为研究对象。学员分别操作传统2D腹腔镜与国产3D腹腔镜,采用问卷调查法收集学员对于3D腹腔镜的主观感受。培训后评估操作考核结果。结果培训过程中部分学员操作3D腹腔镜会产生一定的眼疲劳及眩晕等视觉不适,但对于3D腹腔镜的总体主观感受无明显不适。3D腹腔镜在纵深感(77.1%)、清晰度(62.9%)、空间定位感(80.0%)等方面明显优于2D腹腔镜。学员分别操作3D腹腔镜和2D腹腔镜完成轨道过弯、穿隧道及高低柱3个模块的考核,在用时[(286.6±215.2)s vs.(302.3±249.2)s,(280.1±157.1)s vs.(306.3±248.4)s,(317.2±130.2)s vs.(342.0±283.7)s]、不规范操作次数[(2.3±1.8)次vs.(2.7±3.3)次,(2.6±2.0)次vs.(3.1±4.3)次,(7.0±3.8)次vs.(6.0±9.5)次]及评分[(3.6±0.9)分vs.(3.5±0.9)分,(3.7±0.9)分vs.(3.6±0.9)分,(3.6±0.9)分vs.(3.7±1.0)分]方面,3D腹腔镜组与2D腹腔镜组的客观考核结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论国产3D腹腔镜在腹腔镜外科基本技能培训中有效、可行,学员主观接受程度良好,可以作为在临床工作使用3D腹腔镜前的辅助培训,推进3D腹腔镜的临床应用。

二陈汤对多囊卵巢综合征大鼠卵巢组织Bcl-2及Bax蛋白表达的影响

目的观察二陈汤对脱氢表雄酮(DHEA)诱导的多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)及Bcl-2关联X的蛋白(Bax)表达的影响,探讨二陈汤治疗PCOS可能的分子机制。方法将36只SPF级SD雌性大鼠随机分为正常组(n=10)和造模组(n=26),正常组大鼠每日皮下注射0.2 mL的注射用大豆油剂,造模组大鼠每日同部位皮下注射等量DHEA,造模共20 d。第21天各组取2只大鼠,通过观察大鼠阴道脱落细胞、性激素水平及卵巢形态结构判断是否成模。将成模大鼠分为模型组、二陈汤组(4.35 g/kg)、二甲双胍组(0.30 g/kg),每组8只,以相应剂量药物进行灌胃,模型组及正常组予等量灭菌饮用水。各组给药体积均为10 mL/kg,每天1次,连续干预4周。末次给药后,采集各组大鼠血清及卵巢标本,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清睾酮(T)、促黄体生成素(LH)、促卵泡刺激素(FSH)及雌二醇(E2)等激素水平,苏木精-伊红染色(HE)观察各组大鼠卵巢组织形态学变化,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测卵巢颗粒细胞凋亡指数,免疫组化检测Bax、Bcl-2蛋白表达。结果造模第21天,与正常组比较,造模组大鼠体质量及血清T、LH、E2水平明显上升(P<0.05),FSH无明显变化(P>0.05)。正常组卵巢组织镜下可见颗粒细胞呈多层紧密有序排列;造模组颗粒细胞层变薄,排列稀疏,卵泡呈囊状性扩张。药物干预后,与模型组比较,二陈汤组大鼠血清T、LH水平下降(P<0.05),E2、FSH水平上升(P<0.05);镜下可见卵泡颗粒细胞层较模型组增厚,囊状卵泡数量减少;卵巢颗粒细胞凋亡指数有降低趋势,但差异无统计学意义;卵巢组织Bcl-2蛋白表达水平上升(P<0.05),Bax蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论二陈汤对PCOS的化痰作用可能是通过促进卵巢组织Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达,从而抑制卵巢颗粒细胞凋亡而实现的。

代谢综合征痰证病性兼杂及理化指标与PPARγ基因的相关性研究

目的通过分析代谢综合征(MS)痰证兼杂及理化指标与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因的相关性,探讨其可能的生物学基础。方法收集MS患者,运用证素辨证法从中筛选MS痰证单纯兼杂患者,即MS痰兼湿证组、痰兼热证组、痰兼阴虚证组,各30例,并以30名健康人作为健康组。理化检测指标包括:BMI、SBP、DBP、TG、TC、HDL-C、LDL-C、ALT、AST、ALT/AST、GGT、BUN、SCr、UA以及FPG,实时荧光定量PCR法(q-PCR)及酶联免疫吸附法(ELISA)检测PPARγmRNA及蛋白表达。结果MS痰证兼杂病性证素频次由高至低依次为:湿、阴虚、热、气滞、气虚、阳虚、血瘀、血虚;MS痰证病位证素频次由高至低依次为:肝、肺、肾、脾、心、胆、胃;与健康组比较,痰兼湿、痰兼热、痰兼阴虚组BMI、SBP、DBP、FPG均显著升高(P<0.01,P<0.05),痰兼湿、痰兼阴虚组FPG显著升高(P<0.01,P<0.05);痰兼阴虚组FPG高于痰兼热证组、痰兼湿证组(P<0.01);痰兼热证组SCr高于健康组、痰兼阴虚组、痰兼湿证组(P<0.01)。痰兼热证组、痰兼阴虚组BUN高于痰兼湿证组(P<0.05)。与健康组比较,痰兼阴虚组、痰兼热证组、痰兼湿证组PPARγmRNA表达量均升高,而蛋白表达降低(P<0.01,P<0.05);痰兼阴虚组及痰兼湿证组PPARγ蛋白表达高于痰兼热证组(P<0.01);痰兼湿证组PPARγmRNA表达与AST/ALT呈正相关(P<0.05);痰兼热证组PPARγ蛋白表达与GGT呈负相关(P<0.05);痰兼阴虚组PPARγ蛋白表达与SCr呈正相关(P<0.05)。结论MS痰证病性证素前三位为湿、阴虚、热;病位证素前三位是肝、肺、肾;MS患者机体PPARγ基因表达的下调可能是其痰证兼杂的生物学基础,PPARγ基因与MS痰证兼杂热证有一定联系。

结直肠癌同时性腹膜转移风险因素分析及预测模型建立

目的构建结直肠癌同时性腹膜转移风险评估模型并评价其临床预测价值。方法回顾性分析2013年9月至2021年3月上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科收治的1670例结直肠癌病人的临床资料,其中104例(6.5%)发生同时性腹膜转移。单因素和多因素分析筛选影响结直肠癌同时性腹膜转移的风险因素,并构建列线图(Nomogram),从而建立结直肠癌同时性腹膜转移的风险评估模型。采用受试者工作特征曲线(ROC)和AUC值评估模型的准确性。结果单因素分析结果表明,梗阻、腹腔积液、肿瘤部位、临床T分期(cT)、临床N分期(cN)、血红蛋白、白蛋白、CA125、CA19-9和癌胚抗原(CEA)与结直肠癌同时性腹膜转移相关(P<0.05)。多因素分析结果显示,肿瘤部位(HR=5.57,95%CI 2.11-14.70,P=0.001)、cT(HR=6.19,95%CI 1.02-37.46,P=0.047)、cN(HR=6.18,95%CI 2.39-15.99,P<0.001)、CA125(HR=27.49,95%CI 8.87-85.17,P<0.001)、CA19-9(HR=46.65,95%CI12.26-177.58,P<0.001)和CEA(HR=1223.07,95%CI 259.99-5753.70,P<0.001)是结直肠癌同时性腹膜转移的独立风险因素。风险评估模型的列线图总分为278分,列线图的AUC值为0.97。结论肿瘤部位、cT、cN、CA125、CA19-9和CEA是结直肠癌同时性腹膜转移的风险因素,构建的风险评估模型具有较好的临床预测价值。

EXT2基因、KCNJ11基因单核苷酸多态性与血糖的交互作用对代谢综合征阴虚证易感性的影响

目的探讨EXT2基因和KCNJ11基因的单核苷酸多态性(SNPs)与血糖交互作用对代谢综合征(MS)阴虚证易感性的影响。方法收集MS阴虚证、非阴虚证患者各108例,健康人235例,采用SNPscan;多重SNP分型技术检测SNPs位点。使用SHEsis对MS阴虚证、非阴虚证患者和健康者的基因进行分析。应用广义多因素降维结合逻辑回归模型检测SNPs与血糖交互作用对MS阴虚证的影响。结果携带KCNJ11基因rs5215-C等位基因多态性(CT+CC)个体中患MS阴虚证的风险是携带TT者的0.947倍(P>0.05)。携带EXT2基因rs11037909-C等位基因多态性(CT+CC)个体中患MS的风险是携带TT者的1.839倍(P<0.05)。由EXT2基因rs11037909位点和血糖这两个因素构成的模型是与MS阴虚证风险相关的最佳模型(P=0.001),携带CT/CC基因型的无高血糖个体患MS阴虚证的风险是携带TT基因型的无高血糖MS非阴虚证个体的4.216倍(P<0.05),携带TT基因型的高血糖个体患MS阴虚证的风险是携带相同基因型的无高血糖非阴虚证个体的3.737倍(P<0.05)。结论携带KCNJ11基因rs5215-C等位基因不增加MS阴虚证的易感性。而EXT2基因rs11037909-C等位基因是MS的危险因素,EXT2基因rs11037909与血糖交互作用会增加MS阴虚证的易感性,rs11037909-C等位基因与高血糖均是MS阴虚证的危险因素,二者交互作用后患MS阴虚证的风险比无危险因素者高。

代谢综合征痰证模型大鼠血清及肝组织能量代谢变化特征研究

目的探讨代谢综合征(MS)痰证形成的机制及病理基础。方法50只大鼠随机分为空白组12只和造模组38只。造模组大鼠运用高糖高脂高盐饲养法建立MS痰证大鼠模型。共24只大鼠造模成功,随机分为模型组和二陈汤组各12只。二陈汤组予以二陈汤5.3 g/kg灌胃,模型组及空白组予以生理盐水10 ml/kg灌胃,均每日1次,连续4周。采用分光光度法分别于造模0周、4周、8周、12周检测空白组与造模组血浆乳酸含量。给药后空白组、模型组、二陈汤组采用ELISA法检测血清及肝组织三磷酸腺苷(ATP)水平,采用ELISA法及Real-Time PCR检测肝组织柠檬酸合成酶(CS)、肉毒碱脂酰转移酶I(CPT-1)、乳酸脱氢酶(LDH)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)水平及mRNA表达情况。结果造模期间,空白组与造模组乳酸水平比较差异具有统计学意义,造模第8周和第12周,造模组大鼠乳酸含量较空白组升高(P<0.05)。给药后,与空白组比较,模型组和二陈汤组大鼠血清及肝组织ATP的含量升高(P<0.05),模型组大鼠肝组织LDH、CS、CPT-1、HIF-1α水平均升高(P<0.05);与模型组比较,二陈汤组大鼠血清及肝组织ATP的含量,肝CPT-1 mRNA表达及肝LDH、CPT-1、HIF-1α水平均明显降低(P<0.05)。结论能量失衡促进MS痰证发生发展,能量代谢途径改变是MS痰证形成的病理基础。