期刊导航
期刊开放获取
河南省图书馆
退出
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
3
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式:
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
抗B7-H4单链抗体库的构建和筛选及抗体特异性鉴定
被引量:
2
1
作者
邵峦峦
徐超超
+4 位作者
纪洪帅
毛伟平
王盈盈
刘小綪
朱岩岩
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第9期1260-1266,共7页
目的构建小鼠抗B7-H4胞外区核糖体展示单链抗体(sc Fv)库,并筛选出特异性高的抗体。方法从A549细胞的c DNA中扩增B7-H4胞外区基因,将其插入原核表达载体p ET-28 a(+)中表达,获得B7-H4胞外区重组蛋白后纯化并免疫BALB/c小鼠。从免疫小鼠...
目的构建小鼠抗B7-H4胞外区核糖体展示单链抗体(sc Fv)库,并筛选出特异性高的抗体。方法从A549细胞的c DNA中扩增B7-H4胞外区基因,将其插入原核表达载体p ET-28 a(+)中表达,获得B7-H4胞外区重组蛋白后纯化并免疫BALB/c小鼠。从免疫小鼠脾脏中提取总RNA,并利用反转录PCR、重叠延伸PCR(SOE-PCR)等技术扩增出重链可变区(VH)、轻链可变区(Vκ)、VH接头(VH-linker)序列和Vκ接头(Vκ-linker)序列,得到重轻链可变区基因的连接产物VH/Vκ。VH/Vκ与p UM19-T载体连接并转化至E.coli DH5α感受态菌株中,利用菌落PCR技术鉴定并测序。使用TNTT7 Quick for PCR DNA试剂盒对构建出的抗体库进行体外翻译与筛选,采用Western blot法和间接ELISA对得到的抗体进行特异性鉴定。结果经生物公司测序分析,得到序列正确的重链可变区(VH)、轻链可变区(Vκ)及二者连接产物(VH/Vκ),大小分别为439 bp、680 bp及1098 bp。经特异性实验分析,从得到的抗体库中筛选出的抗体与B7-H4具有高特异性结合能力。结论成功构建出鼠抗B7-H4胞外区核糖体展示sc Fv库,并筛选出与B7-H4胞外区重组蛋白高特异性结合的目标sc Fv。
展开更多
关键词
B7-H4
胞外区
单链抗体
核糖体展示
重组蛋白
下载PDF
职称材料
抗ICOSL核糖体展示单链抗体库的构建
被引量:
4
2
作者
严浩
王芳
+4 位作者
毛伟平
王文倩
孟素芳
邵峦峦
刘小綪
《安徽农业科学》
CAS
2013年第33期12819-12822,共4页
[目的]构建出鼠源抗ICOSL核糖体展示抗体库。[方法]通过RT-PCR从人B淋巴瘤细胞Daudi的总RNA中扩增出ICOSL胞外区基因,并将此基因插入到原核表达载体pET28a中进行表达。以表达纯化的ICOSL蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾脏提取总RNA,...
[目的]构建出鼠源抗ICOSL核糖体展示抗体库。[方法]通过RT-PCR从人B淋巴瘤细胞Daudi的总RNA中扩增出ICOSL胞外区基因,并将此基因插入到原核表达载体pET28a中进行表达。以表达纯化的ICOSL蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾脏提取总RNA,通过RT-PCR扩增小鼠的重链可变区和Linker(VH-linker)序列,以及轻链可变区和Linker(Vκ-linker)序列。经重组PCR将两段基因连接起来,将VH/κ与pMD19-T载体链接产物转化E.coli DH 5α,PCR鉴定并测序。[结果]VH和κ链得到正确的扩增,长度分别为421和689 bp,VH/κ连接产物正确,连接产物长度为1 079 bp。[结论]所采用的引物及反应条件能够扩增出目的基因,成功构建了鼠源抗ICOSL核糖体展示抗体库,为进行核糖体展示体外筛选抗ICOSL特异性单链抗体奠定基础。
展开更多
关键词
ICOSL(可诱导共刺激因子配体)
单链抗体
核糖体展示技术
原核表达
下载PDF
职称材料
白藜芦醇对镉诱导HEK 293T细胞自噬与凋亡的影响
被引量:
2
3
作者
王芸芸
刘小綪
+3 位作者
邵峦峦
杨颖
蒋琦辰
毛伟平
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第1期52-60,共9页
为了探究白藜芦醇与镉诱导人胚胎肾细胞293(HEK 293T)细胞自噬与凋亡之间的关系,本研究在已证明低浓度镉诱导细胞自噬,高浓度镉导致细胞凋亡的基础上,以HEK 293T细胞为研究对象,并分别与镉、白藜芦醇及各种抑制剂进行联合培养,利用免疫...
为了探究白藜芦醇与镉诱导人胚胎肾细胞293(HEK 293T)细胞自噬与凋亡之间的关系,本研究在已证明低浓度镉诱导细胞自噬,高浓度镉导致细胞凋亡的基础上,以HEK 293T细胞为研究对象,并分别与镉、白藜芦醇及各种抑制剂进行联合培养,利用免疫印记分析检测自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ/Ⅰ、溶酶体标志蛋白cathepsin L、组蛋白去乙酰化酶相关蛋白SIRT1和凋亡蛋白caspase-3的表达水平,激光共聚焦检测细胞自噬质粒(GFP-LC3)和溶酶体相关膜蛋白结合因子(LAMP2)的表达量,同时检测活性氧(ROS)水平,倒置相差显微镜和流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果显示:白藜芦醇进一步增强镉诱导HEK 293T细胞的自噬,且这种效应发生在自噬体溶酶体融合之前,其作用原理可能与白藜芦醇的抗氧化性有关并与SIRT1基因有密切联系,以上结果说明白藜芦醇对镉诱导的细胞自噬有一定的调控作用,此外,细胞凋亡与自噬之间关系紧密,白藜芦醇可抑制镉诱导的细胞凋亡。
展开更多
关键词
白藜芦醇
镉
HEK
293T细胞
自噬
细胞凋亡
下载PDF
职称材料
题名
抗B7-H4单链抗体库的构建和筛选及抗体特异性鉴定
被引量:
2
1
作者
邵峦峦
徐超超
纪洪帅
毛伟平
王盈盈
刘小綪
朱岩岩
机构
南京师范大学生命科学学院
江苏省分子医学重点实验室
江苏省医药超分子材料及应用重点实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第9期1260-1266,共7页
基金
江苏省教育厅自然科学基金(08KJD35002)
文摘
目的构建小鼠抗B7-H4胞外区核糖体展示单链抗体(sc Fv)库,并筛选出特异性高的抗体。方法从A549细胞的c DNA中扩增B7-H4胞外区基因,将其插入原核表达载体p ET-28 a(+)中表达,获得B7-H4胞外区重组蛋白后纯化并免疫BALB/c小鼠。从免疫小鼠脾脏中提取总RNA,并利用反转录PCR、重叠延伸PCR(SOE-PCR)等技术扩增出重链可变区(VH)、轻链可变区(Vκ)、VH接头(VH-linker)序列和Vκ接头(Vκ-linker)序列,得到重轻链可变区基因的连接产物VH/Vκ。VH/Vκ与p UM19-T载体连接并转化至E.coli DH5α感受态菌株中,利用菌落PCR技术鉴定并测序。使用TNTT7 Quick for PCR DNA试剂盒对构建出的抗体库进行体外翻译与筛选,采用Western blot法和间接ELISA对得到的抗体进行特异性鉴定。结果经生物公司测序分析,得到序列正确的重链可变区(VH)、轻链可变区(Vκ)及二者连接产物(VH/Vκ),大小分别为439 bp、680 bp及1098 bp。经特异性实验分析,从得到的抗体库中筛选出的抗体与B7-H4具有高特异性结合能力。结论成功构建出鼠抗B7-H4胞外区核糖体展示sc Fv库,并筛选出与B7-H4胞外区重组蛋白高特异性结合的目标sc Fv。
关键词
B7-H4
胞外区
单链抗体
核糖体展示
重组蛋白
Keywords
B7-H4
extracellular domain
single chain antibody
ribosome display
recombinant protein
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
R392-33 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
抗ICOSL核糖体展示单链抗体库的构建
被引量:
4
2
作者
严浩
王芳
毛伟平
王文倩
孟素芳
邵峦峦
刘小綪
机构
南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学重点实验室
出处
《安徽农业科学》
CAS
2013年第33期12819-12822,共4页
文摘
[目的]构建出鼠源抗ICOSL核糖体展示抗体库。[方法]通过RT-PCR从人B淋巴瘤细胞Daudi的总RNA中扩增出ICOSL胞外区基因,并将此基因插入到原核表达载体pET28a中进行表达。以表达纯化的ICOSL蛋白为抗原免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾脏提取总RNA,通过RT-PCR扩增小鼠的重链可变区和Linker(VH-linker)序列,以及轻链可变区和Linker(Vκ-linker)序列。经重组PCR将两段基因连接起来,将VH/κ与pMD19-T载体链接产物转化E.coli DH 5α,PCR鉴定并测序。[结果]VH和κ链得到正确的扩增,长度分别为421和689 bp,VH/κ连接产物正确,连接产物长度为1 079 bp。[结论]所采用的引物及反应条件能够扩增出目的基因,成功构建了鼠源抗ICOSL核糖体展示抗体库,为进行核糖体展示体外筛选抗ICOSL特异性单链抗体奠定基础。
关键词
ICOSL(可诱导共刺激因子配体)
单链抗体
核糖体展示技术
原核表达
Keywords
ICOS
Sing-chain antibody
Ribosome display
Prokaryotic expression
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
下载PDF
职称材料
题名
白藜芦醇对镉诱导HEK 293T细胞自噬与凋亡的影响
被引量:
2
3
作者
王芸芸
刘小綪
邵峦峦
杨颖
蒋琦辰
毛伟平
机构
南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学重点实验室
出处
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第1期52-60,共9页
文摘
为了探究白藜芦醇与镉诱导人胚胎肾细胞293(HEK 293T)细胞自噬与凋亡之间的关系,本研究在已证明低浓度镉诱导细胞自噬,高浓度镉导致细胞凋亡的基础上,以HEK 293T细胞为研究对象,并分别与镉、白藜芦醇及各种抑制剂进行联合培养,利用免疫印记分析检测自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ/Ⅰ、溶酶体标志蛋白cathepsin L、组蛋白去乙酰化酶相关蛋白SIRT1和凋亡蛋白caspase-3的表达水平,激光共聚焦检测细胞自噬质粒(GFP-LC3)和溶酶体相关膜蛋白结合因子(LAMP2)的表达量,同时检测活性氧(ROS)水平,倒置相差显微镜和流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果显示:白藜芦醇进一步增强镉诱导HEK 293T细胞的自噬,且这种效应发生在自噬体溶酶体融合之前,其作用原理可能与白藜芦醇的抗氧化性有关并与SIRT1基因有密切联系,以上结果说明白藜芦醇对镉诱导的细胞自噬有一定的调控作用,此外,细胞凋亡与自噬之间关系紧密,白藜芦醇可抑制镉诱导的细胞凋亡。
关键词
白藜芦醇
镉
HEK
293T细胞
自噬
细胞凋亡
Keywords
Resveratrol
cadmium
HEK 293T cells
autophagy
cell apoptosis
分类号
R965.2 [医药卫生—药理学]
R992 [医药卫生—毒理学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗B7-H4单链抗体库的构建和筛选及抗体特异性鉴定
邵峦峦
徐超超
纪洪帅
毛伟平
王盈盈
刘小綪
朱岩岩
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
2
下载PDF
职称材料
2
抗ICOSL核糖体展示单链抗体库的构建
严浩
王芳
毛伟平
王文倩
孟素芳
邵峦峦
刘小綪
《安徽农业科学》
CAS
2013
4
下载PDF
职称材料
3
白藜芦醇对镉诱导HEK 293T细胞自噬与凋亡的影响
王芸芸
刘小綪
邵峦峦
杨颖
蒋琦辰
毛伟平
《复旦学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2022
2
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部