hsa_circ_0090231与hsa_circ_0004543在急性脑梗死患者颈动脉斑块中的临床意义

目的探讨hsa_circ_0090231与hsa_circ_0004543在急性脑梗死(ACI)患者颈动脉斑块中的临床意义。方法选取2022年1月至12月于浙江省嘉兴市第一医院收治的60例ACI患者作为试验组,根据预后情况分为预后良好组(39例)和预后不良组(21例);选择同期于浙江省嘉兴市第一医院体检中心体检的50例健康体检者作为对照组。采用实时定量聚合酶链反应测定hsa_circ_0090231和hsa_circ_0004543表达;采用Pearson分析hsa_circ_0090231、hsa_circ_0004543与低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的相关性;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析hsa_circ_0090231、hsa_circ_0004543对ACI患者不良预后的诊断效能。结果试验组hsa_circ_0090231、hsa_circ_0004543及LDL-C水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组hsa_circ_0090231、hsa_circ_0004543及LDL-C水平均高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,ACI患者hsa_circ_0090231、hsa_circ_0004543表达均与LDL-C水平呈正相关(r=0.650、0.726,P<0.001)。ROC曲线显示,hsa_circ_0090231的曲线下面积为0.84375(95%CI:0.736~0.939),特异度为0.875,灵敏度为0.700;hsa_circ_0004543的曲线下面积为0.96875(95%CI:0.922~0.996),特异度为0.900,灵敏度为0.950。结论hsa_circ_0090231和hsa_circ_0004543在ACI患者中表达激活,其在不良预后患者中表达高于预后良好者,且其对患者不良预后具有一定诊断价值。

灵菌红素对创面分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌效果及作用机制

目的探讨灵菌红素对创面分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑菌效果和作用机制。方法选取2021年至2022年嘉兴市第一医院分离培养的64株创面组织感染MRSA菌株,采用微量肉汤稀释法测定单用灵菌红素及与左氧氟沙星联合作用时的最低抑菌浓度(MIC),计算部分抑菌指数评价联合抑菌效果;并通过透射电镜观察灵菌红素对MRSA菌株的抑菌作用。结果灵菌红素对MRSA菌株的50%MIC为0.5 mg/L,90%MIC为1.0 mg/L;与左氧氟沙星联用时1株(1.54%)结果为协同作用,30株(46.15%)结果为相加作用;透射电镜观察到灵菌红素对MRSA菌株细胞膜结构完整性破坏作用明显。结论灵菌红素通过破坏细菌胞膜达到对MRSA菌株的抑菌作用,与左氧氟沙星联合使用时具有一定的协同或相加作用。

日本血吸虫病患者γ干扰素及其受体检测意义

目的 研究γ干扰素 (IFN γ)及I型γ干扰素受体 (IFN γR1)在慢性血吸虫病 (慢血 )及晚期血吸虫病 (晚血 )患者中表达水平 ,探讨IFN γ和IFN γR1表达的临床意义及其和肝纤维化的关系。 方法 用流式细胞术检测慢血及晚血患者外周血淋巴细胞IFN γR1的表达水平 ;用ELISA法检测慢血及晚血患者血清IFN γ水平 ;用放射免疫法检测血清中透明质酸 (HA)、Ⅳ胶原 (Ⅳ C)、层粘连蛋白 (LN)、Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )等肝纤维化指标。采用对比分析 ,观察IFN γR1、IFN γ及肝纤维化指标在慢血及晚血患者中的表达水平及相关性。 结果 慢血患者IFN γR1和IFN γ与健康对照组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;晚血未切脾患者IFN γR1表达明显低于其他组 (P <0 .0 5 ) ,而IFN γ增高 (P <0 .0 1) ;晚血切脾患者此两项指标又恢复正常 ;IFN γR1和IFN γ与HA、Ⅳ C、LN、PCⅢ之间无相关性 (r分别为 0 .19、0 .2 0、0 .14、0 .2 1)。结论 IFN γR1和IFN γ之间存在相互对应关系 ,IFN

两种血小板稀释液溶解红细胞的机理探讨

目的探讨复方尿素稀释液和草酸铵稀释液溶解红细胞的机理。方法用含10%尿素和1%草酸铵的不同浓度氯化钠溶液作红细胞脆性试验;用自动生化分析仪测定不同压积红细胞浓度与NH4+的关系;用生理盐水、复方尿素稀释液和草酸铵稀释液计数富血小板血浆(PRP)血小板数。结果尿素在红细胞膜两侧不形成有效渗透浓度,复方尿素稀释液对红细胞而言为一个低渗溶液(有效渗透浓度50mOsm/L);草酸铵稀释液的NH4+能主动转运到红细胞内,形成细胞内高渗而造成红细胞破坏;两种稀释液对血小板有相同的影响,即使血小板体积增大。结论复方尿素稀释液中尿素无破坏红细胞作用,溶解红细胞主要是溶液的低渗性;草酸铵稀释液溶解红细胞与红细胞膜对NH4+主动转运有关;两种稀释液对血小板计数无影响。

川崎病患儿血小板α-颗粒膜蛋白及血小板参数变化的观察与探讨

目的 探讨川崎病 (KawasakiDisease ,KD)患儿急性期血小板α 颗粒膜蛋白 (CD6 2P)、血小板参数的动态变化与本病发病机制及冠状动脉并发症之间的关系。方法 应用荧光标记单克隆抗体和流式细胞仪以及自动血球记数仪分别对 30例KD急性期患儿血清CD6 2P及 5 0例KD急性期患儿血小板参数进行了检测 ,并与 2 0例健康体检儿童进行对照。结果 KD组急性期血浆CD6 2P表达明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,血小板计数 (PLT)、血小板压积(PCT)、血小板分布宽度 (PDW )水平也明显高于对照组 (P <0 .0 1)。结论 KD急性期患儿血浆CD6 2P呈高表达 ,PLT、PCT、PDW水平明显增高 ,提示急性期KD患儿体内血小板代谢旺盛 ,释放因子较多 ,活化程度显著增高 ,表现为高聚集、高黏附 ,高凝固及低血浓度的血液流变特点 ;而此期也正是临床KD患儿动脉血栓及冠状动脉瘤形成的高峰期 ,提示活化的血小板参与或促发了冠状动脉血栓的形成 ;因此动态检测CD6 2P、血小板参数的变化 ,及时采取有效抗炎抗凝措施 ,对于减轻KD患儿血管炎症 ,防止血栓形成 ,预防冠状动脉并发症的发生具有重要的临床意义。

铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的临床分布和耐药性分析

目的调查分析医院2012～2013年铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性，为临床合理使用抗菌药物和及早预防和控制医院感染提供科学依据。方法回顾性统计2012年1月～2013年12月嘉兴地区两所综合性三甲医院中分离的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的临床资料，进行耐药性分析。结果铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌分离率以痰液最高，分别占68．35％和81．79％；科室分布铜绿假单胞菌以呼吸内科为主（17．65％），鲍曼不动杆菌以ICU为主（19．03％）；铜绿假单胞菌对亚胺培南和美洛培南的耐药率呈逐年上升趋势，分别从8．45％、8．09％上升到13．10％、11．16％；鲍曼不动杆菌对头孢吡肟、亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮衔巴坦、左氧氟沙星等抗菌药物耐药率为19．36％～32．80％，对氨曲南、头孢曲松的耐药率达90％。结论铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌是医院最常见的条件致病菌，临床应加强耐药性监测，减少多重耐药菌的产生，避免院内感染和暴发流行。

1212株嗜麦芽窄食单胞菌的临床分布及耐药性分析

目的调查分析嗜麦芽窄食单胞菌的耐药性,为临床合理使用抗菌药物和及早预防与控制医院感染提供科学依据。方法回顾性统计2014年1月~2016年12月嘉兴地区两所综合性三甲医院中分离的嗜麦芽窄食单胞菌的临床资料,进行耐药性分析。结果 2014年1月~2016年12月共分离到嗜麦芽窄食单胞菌1212株。标本来源前5位为下呼道标本、创面分泌物、尿液、腹腔引流液和胆汁,分别占86.30%、4.04%、3.14%、2.56%、2.15%。菌株主要分布于ICU、呼吸内科、神经外科、急诊医学科和肝胆外科,检出率分别为29.29%、12.79%、10.56%、8.00%、7.34%。3年间嗜麦芽窄食单胞菌对米诺环素、复方磺胺甲噁唑、左氧氟沙星敏感,耐药率低于15%;而对头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶耐药性较高,且呈逐年上升趋势。结论嗜麦芽窄食单胞菌主要来源于呼吸道标本,该菌对多种抗菌物固有耐药,但对CLSI推荐的米诺环素、复方磺胺甲恶唑、左氧氟沙星的耐药率低,头孢他定对该菌耐药性高。临床应以药敏试验结果合理选用治疗嗜麦芽窄食单胞菌感染的抗菌药物。

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的 调查分析临床产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的耐药性,为临床合理使用抗菌药物和及早预防和控制医院感染提供科学依据。方法 回顾性统计2012年1月~2013年12月嘉兴地区两所综合性三甲医院中分离的产ESBLs肺炎克雷伯菌的临床资料,进行耐药性分析。结果 2012年1月~2013年12月间共检出肺炎克雷伯菌4145株,其中产ESBLs菌株855株,且2012、2013年阳性检出率分别为19.95%（387/1940）、21.22%（468/2205）;菌株来源主要为呼吸道标本和尿液标本;2012、2013年亚胺培南、美洛培南和厄他培南对产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药率分别为11.17%、4.55%,6.01%、5.38%和9.34%、8.23%;头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星和替加环素对产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药率分别为10.42%、12.65%,4.39%、6.62%和8.70%、11.01%。结论 产ESBLs肺炎克雷伯菌比非产ESBLs菌株具有更高的耐药率,药物治疗可以选择亚胺培南、美洛培南、厄他培南、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星和替加环素。

放射性^(125)碘对移液器容量的比对与校准

目的:建立精确有效、简便快速的同位素标记法用于实验室移液器容量的比对与校准,实现移液器准确度与精确度的有效监控。方法:以125I标记溶液为示踪材料,以放射性γ计数仪为设备,以测定CPM值为观察指标,用已通过重量分析法检定的移液器为标准,其他待检移液器容量通过放射性同位素溶液吸样测定CPM与之比较进行方法学评价。结果:放射性同位素法检测批内精密度在0.88%~1.08%之间;平均回收率98.83%;CPM值与125I浓度梯度及容量之间关系的回归方程分别为:Y=23879X-388.4(r2=0.9992)和Y=572.18X-175.83(r2=0.9994)呈正相关;标准移液器与待检移液器的容量平行试验结果良好。结论:放射性同位素125I标记进行移液器容量比对与校准技术,方法灵敏、精确、简便,可适用于临床实验室。

17例急、慢性白血病染色体的观察

随着肿瘤细胞遗传学研究的进展,发现不少白血病具有一定的特异性染色体变化。这对白血病的诊断分型,指导治疗和估计预后均有一定意义。我院1年多来应用G显带技术,对17例急、慢性白血病患者骨髓染色体进行观察,兹介绍如下。材料和方法一、临床资料 17例中男性13例,女性4例。年龄19～65岁,平均39岁。急性白血病8例（L2 3例,M2 2例,M3 3例）。慢性粒细胞白血病9例(其中1例急粒变M2a)。CR期4例,NR期13例。

铕原子标记技术检验实验室移液器容量误差方法

建立铕原子标记技术对实验室移液器容量的比对与校准，能实现对小容量移液器容量准确度与精密度的有效监控。采用时间分辨荧光检测技术，检验移液器容量的误差来源。时间分辨荧光法检测批内重变性误差在0．17％～7．8％之间。铕标记法与蒸馏水称重法对移液器容量测定的比对试验，相对误差-3．9％～0．62％。时间分辨荧光进行移液器容量比对与误差评估，方法灵敏、精确、简便，可适用于临床实验室移液器容量的误差识别及常规比对。

HIV患者外周血CD4^+/CD25^(hi)/CD127^(low)调节性T细胞的表达及临床意义

目的探讨感染人类自身免疫缺陷病毒(HIV)患者抗病毒治疗前后外周血CD4^+/CD25^(hi)/CD127^(low)调节性T细胞的表达情况及临床意义。方法选择符合HIV诊断标准、接受抗病毒治疗超过3个月的64例患者,采用高效抗逆转录病毒治疗(HARRT),分别于治疗前、治疗3个月后采用流式细胞术检测外周血CD4^+/CD25^(hi)/CD127^(low)调节性T细胞和CD4^+T细胞的表达情况,并与80例健康体检者(对照组)比较。结果与对照组比较,HIV患者CD4^+/CD25^(hi)/CD127^(low)调节性T细胞绝对计数及百分比显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。HIV患者的CD4^+/CD25^(hi)/CD127^(low)调节性T细胞绝对计数和CD4^+T细胞呈正相关(P<0.01);HIV患者治疗3个月后CD4^+/CD25^(hi)/CD127^(low)调节性T细胞均有升高,与治疗前的差异均有统计学意义(均P<0.01)。根据年龄将患者分为18~30岁、31~45岁、>45岁,各年龄段患者治疗后CD4^+/CD25^(hi)CD127^(low)调节性T细胞绝对计数分别是治疗前的4.28倍、3.00倍、2.00倍。结论 HIV患者外周血CD4^+/CD25^(hi)CD127^(low)调节性T细胞的表达与病毒的感染、清除有关;外源性药物可升高调节性T细胞的表达。

脂肪酸气相色谱技术鉴定创伤弧菌

目的建立细菌脂肪酸气相色谱分析技术对创伤弧菌(VV)鉴定的新方法。方法创伤弧菌经35℃、24h血平板培养,收集菌落,皂化、甲基化、萃取、洗涤步骤,采用气相色谱法测定VV菌脂肪酸的种类与含量,并与软件标准图谱进行比对与识别。结果 20分钟内色谱给出VV脂肪酸特征图,峰位与标准图谱的差异仅为0.21%,99.17%的峰能明确识别,VV的脂肪酸种类与含量为C16:0(29.66%),C16:1ω7C/C16:1ω6C(28.32%),C18:1ω7C(13.42%),C14:0(5.41%),C14:03OH/C16:1iso1(4.31%)和C12:03OH(4.01%)。结论细菌脂肪酸的种类与数量可作为细菌鉴定特征,气相色谱分析技术具有灵敏、精确、快速特点,与经典的细菌生化反应及DNA鉴定相比,具有生物安全、成本低廉等优点,为临床实验室细菌的鉴定开辟了新途径。

线粒体损伤在创伤弧菌诱导树突状细胞凋亡中的作用

目的:探讨线粒体损伤在创伤弧菌(Vibrio vulnificus,Vv)诱导树突状细胞(dendritic cell,DC)凋亡过程中的作用及其可能机制。方法:建立Vv 1.1758与DC2.4细胞混合培养模型。采用扫描电镜和透射电镜观察创伤弧菌侵入细胞方式和细胞线粒体病变情况。荧光探针DCFH-DA和Fluo-8/AM分别检测侵入细胞内活性氧(ROS)和Ca2+离子水平。流式细胞术检测细胞线粒体膜电位和细胞凋亡情况。采用Western blotting检测NF-κB p65和TNF-α蛋白的表达。结果:Vv 1.1758可诱导DC2.4细胞凋亡。Vv 1.1758以菌体一端与细胞表面结合的方式侵入细胞,侵入细胞的线粒体有明显病变,细胞内ROS和Ca2+水平升高,线粒体膜电位降低。共培育1 h,NF-κB p65蛋白即开始升高,5 h达高峰,6 h稍有下降;TNF-α蛋白则在共培育2 h开始增高,6 h达高峰。结论:线粒体损伤在Vv诱导DC凋亡中发挥作用,其作用机制可能与细胞内ROS和Ca2+水平升高、线粒体膜电位降低有关,NF-κB p65和TNF-α可能是细胞凋亡过程中的重要信号分子。

传染性单核细胞增多症异型淋巴细胞免疫表型研究

目的研究传染性单核细胞增多症异型淋巴细胞的免疫表型。方法用流式细胞术对21例传染性单核细胞增多症异型淋巴细胞的免疫表型进行分析,并以30名健康体检幼儿作为对照。结果传染性单核细胞增多症异型淋巴细胞在流式细胞仪FS和SS散点图上形成淋巴细胞群向上拖尾的特殊形状,其免疫表型的表达分别是CD3+CD8+占(78.2±5.4)%,CD3+CD4+占(13.1±3.4)%,CD3-CD16+56+占(4.0±1.2)%和CD8+CD28+占(33.5±6.1)%,与对照组比较差别均有显著性意义(均P<0.01)。结论流式细胞术的淋巴细胞群向上拖尾的特征,以及CD3+CD8+高表达,可作为传染性单核细胞增多症的诊断指标之一。

手足口病患者病原学快速诊断方法的比较研究

目的比较荧光RT-PCR法与胶体金免疫层析法(GICA)在手足口病(HFMD)患儿病原学快速诊断中的应用价值,为实验室诊断提供参考。方法选取HFMD患儿454例(其中重症患儿190例,普通患儿264例)以及非肠道病毒感染、健康体检儿童共117例。同时采集患儿急性期咽拭子和血清标本各1份,分别进行肠道病毒EV通用型、EV71型和CA16型病毒核酸以及血清EV71-IgM、CA16-IgM抗体检测。比较两种方法对EV71、CA16的检测结果;并以RT-PCR法为金标准,对GICA法检测的诊断性能进行评价。结果荧光RT-PCR法检测重症HFMD组EV71阳性率72.6%(138/190),CA16阳性率10.0%(19/190);普通HFMD组EV71阳性率28.0%(74/264),CA16阳性率30.3%(80/264),两组HFMD肠道病毒感染分布构成比差异有统计学意义(χ~2=88.66,P=0.00)。454例HFMD患儿中,RT-PCR法与GICA法检测EV71型,阳性率分别为46.7%和58.6%,差异有统计学意义(χ~2=39.01,P=0.00);RT-PCR法与GICA法检测CA16型,阳性率分别为21.8%和30.0%,差异有统计学意义(χ~2=22.74,P=0.00)。以RT-PCR法法为金标准,GICA法诊断EV71的灵敏度95.7%,特异度84.4%,阳性预测值76.3%,阴性预测值95.2%,准确度84.1%;诊断CA16的灵敏度89.9%,特异度86.7%,阳性预测值65.4%,阴性预测值96.8%,准确度87.4%。结论 GICA法是一种简便、灵敏的检测方法,可用于HFMD病原体的快速筛查,与RT-PCR法具有较好的互补性;两种方法联合检测对HFMD的早期诊断与防控具有十分重要的意义。