杜氏肌营养不良症的治疗研究进展

杜氏肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy, DMD)是一种x连锁的进行性致死性神经肌肉疾病,这种疾病无法治愈,预期寿命在30岁至50岁之间,死亡与心脏或呼吸并发症有关。近年来,DMD的治疗也取得了一些重要进展,极具前景的CRISPR/cas9介导的基因组编辑有望从基因水平彻底治愈DMD,本文将对DMD治疗的研究现状进行综述,并分析不同治疗策略在其治疗中的研究进展和潜力。

WFDC基因参与多种肿瘤发生发展的研究进展

监测生物标志物可预测肿瘤的发生和预后,为临床治疗和用药指导提供帮助。随着检测技术的不断发展和完善,肿瘤标志物的应用前景也越来越广阔。虽然肿瘤标志物的检测在肿瘤诊断、治疗和监测中发挥重要作用,但一些常见的肿瘤标志物敏感度和特异性不高,无法满足临床需要。由WFDC基因家族编码的蛋白质具有多种活性功能,参与多个瘤种的不同生物学行为,本文就其在恶性肿瘤发生、发展中的作用机制进行综述。

辐射对小鼠骨髓多能造血祖细胞的慢性损伤

目的:通过测定辐射后小鼠骨髓内多能造血祖细胞相关指标,探索电离辐射对多能造血祖细胞(MPPs)的慢性损伤及可能机制。方法:将16只C57BL/6成年小鼠随机分为正常对照组和照射组,每组8只小鼠,照射组小鼠经6 Gy X-射线全身照射。通过流式细胞术检测照射后2个月小鼠骨髓内多能造血祖细胞比例、细胞凋亡及增殖情况。采用Mitotracker Red探针和DCFDA探针结合流式细胞术分别检测各细胞群的线粒体活性及活性氧(ROS)水平,并分析骨髓内多能造血祖细胞的老化状态。结果:辐射能降低小鼠骨髓多能造血祖细胞的比例,6 Gy X-射线全身辐射后,小鼠骨髓内MPP1、MPP3和MPP4比例和数量显著减少(P<0.05)。辐射后骨髓多能造血祖细胞克隆形成能力显著降低(P<0.05),骨髓内MPP1和MPP4细胞群的凋亡细胞比例显著升高(P<0.05)。与对照组比较,骨髓MPP2、MPP3和MPP4细胞群内线粒体活性均显著降低(P<0.05)。辐射能升高骨髓多能造血祖细胞ROS水平,骨髓中MPP2、MPP3和MPP4细胞群内ROS含量均显著升高(P<0.05)。照射后骨髓内MPP1、MPP3和MPP4细胞群的老化细胞比例较对照组显著升高(P<0.05)。结论:电离辐射可导致小鼠多能造血祖细胞慢性损伤,其损伤与细胞氧化应激、细胞凋亡和细胞老化密切相关。

大鼠烫伤后血浆CGRP和NPY水平变化对肠粘膜屏障损害的影响

目的 :探讨大鼠烫伤后血浆CGRP和NPY变化及其意义。方法 :应用放射免疫分析测定烫伤后不同时间点血浆CGRP和NPY含量。结果 :大鼠烫伤后血浆CGRP逐步降低 ,1 2小时组最低 ,2 4小时组乃明显低于对照组 ;烫伤后血浆NPY逐步升高 ,1 2小时组最高 ,2 4小时组基本恢复正常 ;烫伤后血浆CGRP和NPY的变化呈负相关。结论 :烫伤后血浆CGRP降低 ,NPY升高 ,且呈负相关 ,CGRP。

大鼠脑底动脉降钙素基因相关肽能神经纤维分布的形态学观察

目的 探讨 14只成年鼠和 14只老年鼠脑底主要动脉降钙素基因相关肽能神经纤维的分布特征。方法 应用免疫组织化学ABC法、神经交点计数法。结果 成年鼠脑底各主要动脉壁上均含有呈线状黑色的CGRP能免疫反应阳性神经纤维 ,分布密度以大脑前动脉最高 ,其次是大脑中动脉、大脑后动脉、基底动脉。各动脉间CGRP能神经纤维密度比较具有统计学意义 (P <0 .0 1) ,成年鼠脑底动脉壁CGRP能神经纤维以环行分布为主 ;老年鼠脑底动脉壁CGRP能神经纤维密度以大脑前动脉最高 ,走行方式以网状分布为主 ;老年鼠脑底各主要动脉壁CGRP能神经纤维分布密度低于成年鼠相应脑底动脉。结论 不同脑底动脉CGRP能神经纤维分布特征各异 。

大鼠烫伤后血浆NPY与DAO含量变化的研究

目的 :探讨大鼠烫伤后血浆NPY与DAO变化及其意义。方法 :分别采用放射免疫分析法、分光光度法测定烫伤后不同时间点血浆NPY含量和DAO活性。结果 :大鼠烫伤后血浆NPY逐步升高 ,12小时组最高 ,2 4小时组基本恢复正常 ;烫伤后血浆DAO活性逐步升高 ,伤后 12小时组最高 ,但 2 4小时组乃明显高于对照组 ;烫伤后血浆NPY与DAO的变化呈正相关。结论 :大鼠烫伤后血浆NPY和DAO均升高且呈正相关 。

一种跨膜蛋白——闭锁蛋白的研究现状

紧密连接存在于上皮细胞的连接复合体中 ,有屏障功能和保持细胞极性的作用 ,已证实闭锁蛋白、Claudin和JAM位于紧密连接处 ,其中闭锁蛋白在维持紧密连接的功能方面有重要作用。闭锁蛋白与质膜下蛋白有密切的联系 ,其功能受到多方面因素的调控。

鼠大脑中动脉肽能神经分布及免疫组织化学研究

目的 :观察鼠大脑中动脉不同部位降钙素基因相关肽 (CGRP)能神经分布特征。方法 :应用免疫组织化学ABC法和神经交点计数法 ,观察 14只SD大鼠大脑的中动脉。结果 :大脑中动脉的近、中、末段均有黑色细线状的CGRP免疫反应阳性神经纤维 ,分布密度以近段明显为高 ,中段和末段依次降低 (P <0 .0 1) ;分布方式近、中和末段分别以环行型、网状型和纵行型为主。结论 :大脑中动脉不同部位CGRP能神经纤维有不同的分布方式和分布密度 。

大鼠烫伤后肠壁微血管通透性和肠组织含水量的变化

目的:观察大鼠烫伤后12h肠壁微血管通透性和肠组织含水量变化,探讨烫伤早期肠粘膜损伤的可能机制。方法:制作成年大鼠严重烫伤模型(Ⅲ度,30%TBSA),在未烫伤鼠及烫伤后12h应用分光光度法测量肠壁微血管通透性,测量回肠组织含水量。结果:对照组肠壁微血管对伊文思蓝有一定的通透性(12.39±5.062μg/g),烫伤后12h肠壁微血管对伊文思蓝通透性较对照组低(10.50±2.031μg/g),但无统计学意义(t=0.923,P>0.05);对照组回肠含水量为83.3±3.8%,烫伤后12h肠组织含水量比对照组稍低(82.9±1.5%),也无统计学意义(t=0.278,P>0.05)。结论:烫伤早期肠壁微血管通透性和肠组织含水量无显著变化,提示炎症介质在烫伤早期肠粘膜损伤中可能不是主要致病因子。

大鼠烫伤后肠壁微血管的形态计量学分析

了解烫伤后肠粘膜微血管形态测量学方面的改变,探讨肠粘膜损伤的机制。以大鼠烫伤为模型,用AKP染色分别显示未烫伤及烫伤鼠回肠壁微血管,并进行体视学测量分析。伤后平均截面面积和平均周长均变小。对照组微血管平均截面面积为56.06±8.03μm2,伤后12 h最低(30.90±6.46μm2,P<0.01);对照组血管平均周长为23.84±4.17μm,伤后6 h降至最低,为19.43±1.59μm(P<0.01)。微血管长度密度除伤后12 h组外,其余各组均较对照组高;在伤后12 h肠壁微血管体积密度降低(P<0.01),其余各组虽较对照组高,但无统计学意义(P>0.05)。结果表明大鼠严重烫伤后肠壁微血管管径缩小,证明存在肠血流量减少的现象,旁证肠粘膜损伤是因为缺血缺氧所致。

自发性高血压鼠脑底动脉血管活性肠多肽能神经纤维的分布

目的 探讨肽能神经对高血压鼠脑血管的神经源性调节的形态学基础。 方法 应用免疫组织化学ABC法和图像分析技术 ,观察了 10只自发性高血压鼠 (SHR)和 10只正常血压鼠脑底动脉血管活性肠多肽能神经纤维的分布。 结果 在自发性高血压鼠脑的大脑前动脉、中动脉、后动脉和基底动脉及其分支均可见棕褐色的免疫反应性纤维 ,纤维似细曲线状 ,多呈网状分布 ,与正常血压鼠同一部位脑底动脉血管壁上的免疫反应性纤维密度比较 ,自发性高血压鼠大脑前动脉、中动脉和后动脉的免疫反应性纤维明显减少。 结论 高血压鼠脑底动脉血管活性肠多肽能神经纤维密度的减少 ,提示在 SHR脑血流的自动调节作用中 ,由于非交感性血管扩张神经的减少 ,导致神经源性血管扩张作用减弱 ,交感神经活性相对增加 ,表明血管活性肠多肽能神经在高血压鼠脑血管的神经源性调节中起着重要的作用。

川芎嗪对P2X_3受体介导的神经病理痛的作用研究

目的探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对P2X3受体介导的神经病理痛的作用。方法建立大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)神经病理痛模型,应用vonFrey细丝法和热辐射法测定机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL),观察川芎嗪对CCI大鼠MWT和TWL的影响。结合免疫组织化学方法观察大鼠L4/L5段脊髓P2X3受体的表达变化。结果术后14d,Ⅴ组(CCI模型组)和Ⅰ组(生理盐水对照组)、Ⅱ组(TMP对照组)、Ⅲ组(假手术组)、Ⅳ组(CCI模型+TMP治疗组)相比较大鼠后爪的机械和热痛敏阈值明显降低(P<0.05),大鼠脊髓P2X3受体表达明显升高(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组之间相比大鼠后爪的机械和热痛敏阈值差异没有显著性(P>0.05),大鼠脊髓P2X3受体表达差异没有显著性(P>0.05);Ⅳ组脊髓P2X3受体的表达较Ⅴ组低(P<0.05)。结论川芎嗪对P2X3受体介导的神经病理痛有抑制作用。

大鼠椎动脉基底动脉系脑血管神经肽Y能神经与星状神经节、颈上神经节的关系

应用免疫组织化学技术 ABC法和神经节切除术 ,观察了大鼠脑底血管椎动脉、基底动脉系主要动脉分支神经肽 Y能神经纤维的起始核团。正常组大鼠脑底血管椎动脉颅内段、基底动脉和小脑上动脉均可见棕褐色的神经肽 Y能免疫反应阳性纤维 ,呈细线状 ,攀附于血管壁上。手术 I组作左侧星状神经节切除术 ,术后存活 7～ 10 d,左侧椎动脉颅内段阳性纤维基本消失 ,基底动脉和双侧小脑上动脉阳性纤维明显减少 ;右侧椎动脉颅内段阳性纤维无减少。手术 II组作双侧星状神经节切除术 ,双侧椎动脉颅内段、基底动脉和小脑上动脉阳性纤维基本消失。手术 III组作左侧颈上神经节切除术 ;手术 IV组作双侧颈上神经节切除术 ,上述各动脉阳性纤维密度未发现减少现象。手术 I、II组各组纤维密度数据与正常组者比较进行了统计学分析 ,P<0 .0 5。结果提示 :大鼠一侧星状神经节发出的神经肽 Y能神经纤维分布于同侧椎动脉颅内段、基底动脉和双侧小脑上动脉 ,即大鼠脑血管椎 -基底动脉系神经肽 Y能神经纤维主要起源于星状神经节 。

不同年龄高血压鼠脑底动脉神经肽Y能神经纤维的分布

目的 :为了阐明不同年龄高血压鼠脑动脉神经肽Y(NPY)能神经的分布 ,探索高血压与脑动脉NPY能神经分布的年龄相关性。方法 :应用免疫组化法和神经交点计数法 ,对 12只不同年龄高血压鼠脑动脉NPY能神经纤维分布进行观察。结果 :在 6周龄高血压鼠大脑前动脉 (ACA)和大脑中动脉 (MCA)壁上均见黑色NPY纤维 ,较细 ,曲线状 ,以纵行分布为主 ;在 15周龄高血压鼠ACA和MCA壁纤维密度较高 ,纤维走行以环行为主 ;在 3 0周龄高血压鼠ACA和MCA壁纤维走行以网状为主 ,纤维密度较 6周龄和15周龄鼠增高 ,三个年龄组纤维密度依次为 :3 0周龄鼠 >15周龄鼠 >6周龄鼠。结论 :高血压鼠脑底动脉NPY能神经纤维密度随年龄增加而增高 ,纤维走行由纵行转变成环行、网状分布。提示高血压鼠呈年龄相关性增加的血压可能与高血压鼠脑血管呈年龄相关性增加的NPY能神经相关。

热休克预处理对大鼠烧伤后急性胃黏膜损伤的保护作用

目的观察热休克预处理对严重烧伤大鼠胃黏膜的影响。方法热休克预处理诱导热休克蛋白产生,然后制作烧伤大鼠急性胃黏膜损伤模型,进行胃黏膜损伤指数评分。运用免疫组化方法,检测胃黏膜热休克蛋白的表达,并进行图像分析。结果热休克预处理组胃黏膜损伤积分显著低于对照组(P<0.01)。免疫组化分析显示其胃黏膜热休克蛋白表达较对照组明显增强(P<0.01)。结论热休克预处理对烧伤大鼠胃黏膜具有保护作用,其保护机制可能与热休克蛋白诱导表达增强有关。

自发性高血压鼠脑底动脉降钙素基因相关肽能神经纤维的分布

应用免疫组织化学ABC法和神经交点计数技术,观察了10只自发性高血压大鼠和10只正常血压大鼠脑底动脉降钙素基因相关肽(CGRP)能神经纤维的分布。结果证明:在自发性高血压鼠的大脑前动脉、大脑中动脉、大脑后动脉和基底动脉壁上均可见CGRP免疫反应阳性纤维,纤维呈细曲线状,多呈网状走行;与正常血压鼠脑底血管同名动脉比较,其密度明显减少。正常血压鼠脑底血管CGRP能神经纤维多呈环形走行。高血压鼠的CGRP能神经纤维的分布随着高血压的发生而明显减少,提示CGRP能神经纤维的减少与高血压的发生、发展具有一定的关系。

自发性高血压大鼠脑底动脉神经肽Y能神经纤维的分布

应用免疫组织化学技术 ABC法 ,对 1 0只雄性自发性高血压大鼠脑底动脉神经肽 Y能神经纤维分布进行了观察。在自发性高血压大鼠脑底血管的大脑前动脉、大脑中动脉、大脑后动脉和基底动脉壁上均可见棕褐色的免疫反应阳性纤维 ,纤维较粗 ,曲线状 ,呈网状分布 ,密度较高。与正常血压大鼠同一部位脑底动脉血管壁上的阳性纤维密度相比明显增加。结果表明 :高血压大鼠脑底动脉各主要分支较正常血压大鼠脑底动脉各主要分支有更高密度的神经肽 Y能神经纤维分布 ,提示高密度的神经肽 Y能神经可能在高血压大鼠脑血管的神经营养和神经调节方面起着重要的作用。