茵陈蒿汤治疗妊娠期肝内胆汁淤积症大鼠的动物实验研究

目的建立妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)大鼠动物模型,并探究茵陈蒿汤干预对于其血清生化指标及肝组织病理改变的影响。方法将40只SPF级中期妊娠(孕10~14 d)Wistar大鼠,随机分为A组30只、B组10只。对A组30只大鼠颈部皮下连续注射5 d苯甲酸雌二醇注射液及黄体酮注射液,进行模型复制,再将模型复制成功的25只随机分为茵陈蒿汤组12只、模型组13只;同时将上述未作模型复制处理的B组10只大鼠标记为对照组。模型组及对照组大鼠予以生理盐水(2 mL·次^-1·d^-1),茵陈蒿汤组大鼠予以茵陈蒿汤水煎剂(1.35 g·kg^-1·d^-1),连续灌服14 d后,对谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)等生化指标进行检测;通过光学显微镜观察大鼠肝脏结构及细胞形态变化,并进行肝脏Knodell组织学活动指数(HAI)评分比较。结果与对照组比较,模型组ALT、AST、TBIL、TBA及肝脏Knodell组织学活动指数(HAI)评分均明显升高(P<0.05)。与模型组比,茵陈蒿汤组血清生化指标ALT、AST、TBIL、TBA及HAI评分均明显低于模型组,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论苯甲酸雌二醇及黄体酮可诱导妊娠中期大鼠发生血清生化指标ALT、AST、TBIL、TBA升高以及肝脏组织病理改变,可作为一种稳定、有效的妊娠期肝内胆汁淤积症大鼠模型复制方法。茵陈蒿汤可有效降低妊娠期肝内胆汁淤积症大鼠血清ALT、AST、TBIL、TBA水平,同时对肝组织病理及肝功能的改善具有明显的治疗作用。

基于网络药理学探讨归肾丸治疗卵巢早衰的作用机制

目的通过网络药理学的方法探讨归肾丸治疗卵巢早衰的信号通路,并预测其可能的作用机制。方法通过计算系统生物学实验室(TCMSP)检索归肾丸中熟地黄、菟丝子、山药、枸杞、山茱萸、杜仲、当归、茯苓等8味中药组成的化合物,设置口服生物利用度≥30%、类药性≥0.18筛选药物的有效活性成分及对应靶点;利用Genecards数据库、OMIM数据库获取卵巢早衰的疾病靶点基因;通过venny R软件获取药物-疾病的179个交集作用靶点,并输入String数据库及Cytoscape 3.7.2软件构建"药物-成分-靶点-疾病"的可视化网络;通过Enrichr数据库、David 6.8数据库进行基因本体(GO)分析和基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。结果归肾丸中药物组成的活性成分有121个,卵巢早衰的疾病靶点有4131个;通过Venny软件得到179个交集靶点,归肾丸治疗卵巢早衰的映射率为4.3%;将179个交集靶点导入String数据库得到由164个节点(node)、673条边(edge)构成的平均节点度为7.52、平均局部聚类系数为0.476的"药物-疾病"蛋白互作网络图;GO富集分析通过Enrichr数据库共得到146条富集结果(P<0.01),并选取靠前排名20位的富集结果绘图;通过David 6.8数据库进行GO功能注释分析,设置P<0.01,结果显示涉及70个生物过程(BP)、15个细胞组分(CC)、21个分子功能(MF);KEGG信号通路富集分析利用David数据库筛选相关信号通路富集结果,共获得144条信号通路(P<0.01),绘制排名靠前20位的信号通路气泡图。结论归肾丸可能通过多成分、多靶点、多通路实现改善卵巢早衰的作用,为进一步的实验研究及临床运用提供了思路和理论依据。

片区廉勤委 巧治“微腐败”

“堰塘修得好不好,公路宽度对不对,眼睛看了不作数,要拿数据出来给大家看。”李天清是达州市通川区蒲家镇第二片区的廉勤监督员,任职后的他习惯了每天随身携带一卷卷尺。在村上修建堰塘时,每日清晨工人上工时,李天清便已到场,对水泥标号、石材规格等按照合同要求认真对比。在修建堰塘内护坡时,李天清用卷尺反复测量,发现厚度不够,立即现场指出,要求施工方马上进行整改。

寿胎丸化裁联合西药治疗复发性流产Meta分析

目的:系统评价寿胎丸化裁联合西药对复发性流产患者妊娠结局的影响。方法:电子检索PubMed、EMBASE、Cochrane Library、中国知网、维普期刊数据库、中国生物医学文献数据库及万方数据库,从建库至2018年9月发表的相关文献。由2名研究员各自独立严格进行纳入研究的质量评价和资料提取,对符合要求的随机对照试验用RevMan5.2软件进行Meta分析,用TSA v0.9软件进行试验序贯分析。结果:纳入文献14篇,共纳入1034例样本量,其中使用常规西药治疗的有516例,寿胎丸化裁联合常规西药治疗的有518例。与常规西医疗法比较,寿胎丸化裁联合西药治疗总有效率明显较优[OR=5.69,95%CI(3.83~8.48),P<0.00001],再次妊娠保胎成功率显著提高[OR=3.23,95%CI(92.45~4.25),P<0.00001]。结论:寿胎丸化裁联合西药治疗复发性流产疗效优于常规西药治疗。

基于网络药理学研究归肾丸对薄型子宫内膜大鼠的治疗作用机制

目的:该研究通过网络药理学的方法探讨归肾丸治疗薄型子宫内膜的关键核心靶点及相关信号通路等作用机制,进一步运用动物实验加以验证所得靶点,验证归肾丸对薄型子宫内膜的影响。方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库检索归肾丸中8味中药组成的有效化学成分、活性成分靶点和靶点简称;运用GeneCards数据库和在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)检索薄型子宫内膜相关的靶点基因;运用韦恩软件对归肾丸的药物靶点和薄型子宫内膜的疾病靶点进行取交集操作,将交集靶点导入STRING数据库及Cytoscape 3.7.2软件进行可视化分析获得"药物-疾病"的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络;再将交集靶点输入Enrichr数据库和David数据库分别进行基因本体(GO)富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。以得到的可能核心关键靶点作为理论基础,建立大鼠薄型子宫内膜模型,归肾丸及雌激素干预21 d后,通过苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠的内膜厚度;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测表皮生长因子受体(EGFR),基质金属蛋白酶9(MMP9),白细胞介素1β(IL^(-1)β),丝裂原激活蛋白激酶14(MAPK14)这4个核心关键靶点的蛋白和mRNA的表达水平。结果:通过韦恩软件共获得130个交集靶点;将130个交集靶点导入STRING数据库和Cytoscape软件中,得到包括33个节点,107条边的蛋PPI网络;DAVID 6.8数据库进行GO分析中的功能注释分析,共涉及167个生物过程(BP),22个细胞组分(CC),39个分子功能(MF);DAVID 6.8数据库进行KEGG富集分析,与薄型子宫内膜相关的通路共34条;Western blot和Real-time PCR分别对6组大鼠子宫内膜组织中的EGFR,MMP9,IL^(-1)β,MAPK14蛋白和mRNA的表达结果进行分析,归肾丸能够增强EGFR,MMP9,IL^(-1)β,MAPK14蛋白和mRNA在薄型子宫内膜上的表达。结论:通过网络药理学的理论分析及动物实验的研究结果发现,归肾丸能够有效改善薄型子宫内膜的相关指标,并通过增加EGFR,MMP9,IL^(-1)β,MAPK14蛋白和mRNA表达水平,促进内膜组织增殖,改善内膜偏薄的症状。

同源基因A10对10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因信号通路的调控机制研究

目的验证同源基因A10(hoxA10)对10号染色体缺失的磷酸酶、张力蛋白同源基因(pten)、磷脂酰肌醇-3-激酶(pi3k)和蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响。方法设计SD大鼠骨髓间充质干细胞hoxA10基因的短发夹RNA(shRNA)靶序列,并构建pLVSHG01-Rat HoxA10重组慢病毒。用敲低型慢病毒感染SD大鼠的骨髓间充质干细胞(BMSCs),将BMSCs分为感染组(感染hoxA10敲低型慢病毒)和空白对照组(未感染)。用嘌呤霉素筛选出感染成功的细胞株后,以蛋白质印迹法检测感染后BMSCs中HoxA10蛋白表达,用实时荧光定量反转录-PCR法检测各组骨髓间充质干细胞中hoxA10、pten、pi3k和akt基因的表达水平。用双染流式细胞凋亡试剂盒检测各组细胞的凋亡率和周期。结果成功构建了hoxA10低表达的SD大鼠骨髓间充质干细胞,空白对照组和感染组的hoxA10基因表达量分别为6.22±0.20和3.09±0.06;这2组的pten基因表达量分别为1.97±0.18和5.09±0.07;这2组的pi3k基因表达量分别为6.06±0.05和2.72±0.10;这2组的akt基因表达量分别为5.98±0.09和2.48±0.35。上述指标:空白对照组与感染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.001)。空白对照组的细胞凋亡率(18.88±1.71)%明显低于感染组(36.01±0.45)%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论HoxA10基因能够负向调控pten/pi3k/akt信号通路。