赭曲霉毒素A模拟抗原表位及噬菌体展示酶联免疫吸附分析法的建立

以驴抗鼠二抗包被微孔板,以捕获方式包被抗赭曲霉毒素A（OTA）单克隆抗体,利用噬菌体随机七肽库筛选OTA模拟抗原表位,并以其替代检测抗原,建立了基于噬菌体展示技术的酶联免疫吸附分析（Phage ELISA）检测OTA的方法。结果表明,筛选获得的模拟OTA抗原表位七肽氨基酸序列为GMSWMMA。基于模拟表位噬菌体建立的Phage ELISA方法半数抑制浓度（IC50值）为（0.15±0.02）ng/m L,检测OTA的线性范围为0.03~0.50 ng/m L,OTA的检出限为0.03 ng/m L,且Phage ELISA与其它4种常见真菌毒素（黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇及玉米赤霉烯酮）无交叉反应。大米样品OTA加标实验表明,批內加标回收率为97.0%~115.2%,批间加标回收率为107.2%~123.1%,与ELISA试剂盒检测结果比较,无显著性差异。