糖尿病对大鼠左室心外膜细胞短暂外向钾电流的影响及分子基础

目的研究大鼠左心室肌短暂外向钾电流(Ito)在糖尿病状态发生下降改变的分子机制。方法取体重150～200 g的雄性Sprague-Dawley大鼠,腹腔注射链脲菌素建立糖尿病大鼠模型,采用酶解法获得单个左室心外膜细胞,应用膜片钳全细胞方法记录Ito;用逆转录-聚合酶链式反应技术半定量编码该通道α亚单位mRNA的表达水平。结果与对照组相比,糖尿病大鼠左室心外膜细胞Ito密度显著降低,+60 mV时分别为27.38±1.16pA/pF(n=12)和16.85±2.31 pA/pF(n=25)(P<0.01);糖尿病大鼠左室心外膜肌细胞Ito通道α亚单位编码基因Kv4.2、Kv4.3 mRNA表达水平较对照组分别显著下调56.88%和46.57%;而Kv1.4 mRNA则较对照组上调约48.02%,三组基因表达水平的改变均具有显著性差异。结论糖尿病大鼠左心室肌外膜细胞Ito密度显著降低系编码该通道α亚单位的基因表达下调所致。

钾流在糖尿病大鼠心室肌细胞的改变机制

目的研究糖尿病对大鼠心室肌细胞瞬间外向钾流(I_(to))的影响及其分子机制,探讨糖尿病引起的心脏损害与心律失常的关系。方法取体质量150～200 g 的雄性 Sprague-Dawley 大鼠,单次腹腔注射链脲菌素(STZ,65 mg/kg,pH=4.5)建立糖尿病大鼠模型,采用酶解法获得单个心室肌细胞,应用膜片钳全细胞方法记录I_(to);并用反转录聚合酶链式反应技术进一步半定量编码该电流通道α亚单位基因(Kv4.2、Kv4.3和 Kv1.4)mR-NA 的表达水平。结果与对照组比较,+70 mV 时,糖尿病大鼠心室肌细胞 I_(to)密度显著降低[对照组:(30.6±3.8)比糖尿病组:(18.9±3.3)pA/pF,P<0.01);半定量分析法显示糖尿病大鼠心室肌细胞 I_(to)通道α亚单位编码基因 Kv4.2、Kv4.3 mRNA 表达水平分别下调56.9%和46.6%;而 Kv1.4 mRNA 表达则上调约48.0%,3组基因表达水平的改变差异均有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病大鼠心室肌细胞 I_(to)密度显著降低主要与编码该通道α亚单位的基因表达下调有关。

成年糖尿病大鼠心室肌细胞的分离

目的探索成年糖尿病大鼠心室肌细胞成功分离的方法。方法取体质量150～200g的Sprague—Dawley大鼠20只，单次腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立DM大鼠模型，3周后取大鼠心脏行主动脉逆行灌流分离心室肌细胞；并在倒置显微镜下观察分离的单个心室肌细胞状态。结果建模成功率达90％，糖尿病大鼠的血糖水平稳定维持在20mmol／L以上；分离的单个心室肌细胞存活率达70％～90％，且纹理清晰状态好。结论该糖尿病心室肌细胞的分离方法简单有效。

运动试验后收缩压的异常恢复对冠心病的诊断价值

目的评价运动试验后收缩压的异常恢复对冠心病的诊断价值。方法将110例先后行平板运动试验和选择性冠状动脉造影（CAG）检查的胸闷、胸痛患者，根据CAG结果分为CAG阴性组和CAG阳性组。CAG阳性组根据冠状动脉病变支数分为三支、两支、单支病变亚组。采用运动后收缩压的异常恢复为运动试验阳性判定标准，即运动后3min时收缩压与运动后1min时收缩压的比值（ratio）≥0．95。结果ratio诊断冠心病的灵敏度为76．27％，特异度为82．35％，准确度为79．09％，阳性预测值为83．33％，均高于ST段压低标准；且ratio值与冠状动脉病变支数呈正相关（r=0．916，P〈0．01）。结论运动试验后收缩压的异常恢复可作为诊断冠心病的有效指标。