金水缓纤方对肺纤维化大鼠肺组织内质网应激/未折叠蛋白反应通路的影响

目的观察金水缓纤方对肺纤维化大鼠肺组织内质网应激/未折叠蛋白反应(ERS/UPR)通路的影响.方法选择32只SPF级SD大鼠,按随机数字法分为正常对照组、模型组、金水缓纤方组与吡非尼酮组,每组8只.采用一次性气管内注射博来霉素(5 mg/kg)复制肺纤维化大鼠模型.于制模前1d和制模后28 d、42d测定大鼠肺功能;制模后42d处死大鼠取肺部组织,行苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色观察各组大鼠肺组织病理学改变;采用原位末端缺刻标记试验(TUNLE)测定肺组织细胞凋亡情况;采用定量比色法测定肺组织羟脯氨酸(HYP)含量;采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)测定葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、X-框结合蛋白1(XBP-1)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的mRNA表达水平;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)测定E-钙黏蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、GRP78、XBP-1、磷酸化真核细胞翻译起始因子-2α(p-eIF2α)、CHOP、Smad2/3的蛋白表达水平.结果与正常对照组比较,制模后42d模型组大鼠肺功能指标潮气量(TV)、呼气峰流速(PEF)、吸气峰流速(PIF)均明显下降[TV(mL):1.55±0.24比2.39±0.37,PEF(mL/s):17.64±2.79比21.94±3.05,PIF(mL/s):18.30±3.99比26.95±2.09,均P<0.05],气道狭窄指数(Penh)明显升高(0.71±0.12比0.52±0.05,P<0.05);光镜观察肺组织病理学改变可见:模型组肺泡间隔增厚,肺泡和肺间质有广泛炎症细胞浸润,且胶原纤维大量沉积,肺泡炎和肺纤维化评分均明显升高[肺泡炎评分(分):2.50±0.84比0.17±0.41,肺纤维化评分(分):6.17±1.17比0.33±0.52,均P<0.01];肺组织HYP含量、细胞凋亡指数(AI)和GRP78 mRNA、XBP-1 mRNA、CHOP mRNA及p-eIF2α、α-SMA、GRP78、XBP-1、CHOP、Smad2/3的蛋白表达水平均明显增加[HYP(μg/g):16.98±3.58比11.57±2.35,AI:(24.27±2.73)%比(1.40±0.78)%,GRP78 mRNA(2^(-ΔΔCt)):5.01±0.57比1.00±0.12,XBP-1 mRNA(2^(-ΔΔCt)):2.20±0.39比1.00±0.25,CHOP mRNA(2^(-ΔΔCt)):2.40±0.45比1.00±0.14,α-SMA/GAPDH:1.24±0.15比0.17±0.04,GRP78/GAPDH:1.50±0.11比0.07±0.02,XBP-1/GAPDH:1.97±0.10比0.61±0.06,p-eIF2α/GAPDH:1.21±0.18比0.11±0.02,CHOP/GAPDH:1.32±0.15比0.04±0.02,Smad2/3/GAPDH:1.12±0.17比0.19±0.12,均P<0.01],E-cad的蛋白表达水平明显降低(E-cad/GAPDH:0.34±0.07比1.44±0.19,P<0.01).与模型组比较,金水缓纤方组和吡非尼酮组TV、PEF、PIF均升高[TV(mL):2.03±0.17、2.10±0.36比1.55±0.24,PEF(mL/s):21.84±3.43、19.25±2.06比17.64±2.79,PIF(mL/s):22.78±2.67、24.25±2.16比18.30±3.99],Penh明显降低(0.58±0.10、0.58±0.11比0.71±0.12,均P<0.05),肺组织病理学变化显著改善,胶原纤维有所减少,金水缓纤方组和吡非尼酮组肺泡炎和肺纤维化评分均明显降低[肺泡炎评分(分):1.50±0.55、1.33±1.03比2.50±0.84,肺纤维化评分:4.67±1.37、3.83±1.17比6.17±1.17,均P<0.05],HYP含量、AI明显减少[HYP(μg/g):13.31±2.94、13.20±2.21比16.98±3.58,AI:(5.20±1.20)%、(7.43±1.79)%比(24.27±2.73)%,均P<0.05],肺组织GRP78、XBP-1、CHOP的mRNA表达和α-SMA、GRP78、XBP-1、p-eIF2α、CHOP、Smad2/3的蛋白表达水平均降低[GRP78 mRNA(2^(-ΔΔCt)):1.64±0.35、2.10±0.22比5.01±0.57,XBP-1 mRNA(2^(-ΔΔCt)):1.75±0.40、1.06±0.30比2.20±0.39,CHOP mRNA(2^(-ΔΔCt)):1.94±0.16、1.83±0.32比2.40±0.45,α-SMA/GAPDH:0.46±0.14、0.48±0.23比1.24±0.15,GRP78/GAPDH:0.75±0.03、0.56±0.05比1.50±0.11,XBP-1/GAPDH:1.16±0.07、0.62±0.06比1.97±0.10,p-eIF2α/GAPDH:0.81±0.12、0.61±0.09比1.21±0.18,CHOP/GAPDH:0.49±0.10、0.30±0.06比1.32±0.15,Smad2/3/GAPDH:0.71±0.12、0.76±0.20比1.12±0.17,均P<0.05],E-cad的蛋白表达升高(E-cad/GAPDH:0.57±0.11、0.76±0.07比0.34±0.07,均P<0.05).结论金水缓纤方能改善肺功能,减少胶原沉积,减轻肺纤维化,其机制与其作用ERS/UPR通路抑制上皮间质转化和细胞凋亡有关.

复合刺激诱导多种呼吸系统疾病急性加重期动物模型的研究进展

基于临床实践的复合因素,如二次打击模式,在呼吸系统疾病急性加重模型的制作中取得了一定进展。本文汇总了复合因素构建的大鼠和小鼠肺纤维化、慢性阻塞性肺疾病和支气管哮喘急性加重模型,从动物品系选择、模型制备方法和主要的组织病理学变化等方面进行比较和分析,阐释每种模型的特征和适用范围,以期为研究者进一步改良和完善模型或合理选择模型提供参考。

实习中期护生共情能力、工作环境、专业满意度现状调查及相关性分析

探讨处于临床实习中期护理专业学生的共情能力、工作环境、专业满意度的现状及相关性,以提升护生的共情能力,促进良好护患关系的建立。

分类讨论思想在高考解题中的应用研究

本文以2018-2022年数学(理)全国Ⅰ卷为例,统计了历年分类讨论思想求解的试题题型与分数占比,并逐一举例说明.让教师与学生充分认识分类讨论思想的重要性与深刻性,为高中的教学和学习提供可信参考与启发.

吃糕如翻书

云片糕看起来平平无奇,但制作起来很是讲究。莫说制作原料多达十来种,且皆需上品,就说这制作方法更是相当精细:糯米要碾去米皮,留下米心后炒熟,既要熟透,又要保持雪白;糯米磨成粉后要连续过筛,以使其又绵又细……最后,由切片师傅手执锋利的大方刀,将长方体状的糕块切成如书页厚的薄片。每块云片糕看起来都像一本小小的书,当你小心翼翼地分出一片时,有没有一种翻书的感觉呢?

基于Pkm2/Nrf2通路探讨补肺益肾方改善线粒体氧化损伤治疗慢性阻塞性肺疾病的机制

目的:探讨补肺益肾方调控Pkm2/Nrf2通路改善肺组织线粒体氧化损伤治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)机制。方法:将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、补肺益肾方组(简称BYF组)和乙酰半胱氨酸组(简称NAC组),每组8只。1~8周,采用香烟暴露联合肺炎克雷伯杆菌反复感染的方法制备COPD大鼠模型。9~16周,正常组和模型组给予0.9%氯化钠溶液灌胃(0.5 mL/100 g),BYF组和NAC组分别给予补肺益肾方灌胃(11.61 g·kg^(-1)·d^(-1))和乙酰半胱氨酸溶液灌胃(54 mg·kg^(-1)·d^(-1)),每日1次,16周结束后取材。检测肺功能、肺病理、线粒体超微结构、氧化应激相关指标、线粒体功能相关指标、Pkm2/Nrf2通路相关指标。结果:COPD大鼠肺功能降低(VT、PEF、EF50、FVC和FEV0.3降低,FRC升高),肺组织病理损伤(MLI、BWt升高,MAN降低),肺组织氧化损伤(T-SOD、T-AOC、GSH-Px、SOD2降低,MDA升高),线粒体功能受损(线粒体膜电位、线粒体呼吸链复合物Ⅰ和Ⅲ酶活性下降),Pkm2/Nrf2信号通路表达降低(Pkm2、Nrf2、GCLM、GCLC mRNA和核蛋白表达下降)(P<0.05,P<0.01)。BYF和NAC均可改善COPD大鼠肺功能(VT、PEF、EF50、FVC、FEV0.3升高,FRC降低),减轻肺组织病理损伤(MAN升高,MLI、BWt降低),提高肺组织抗氧化水平(T-SOD、GSH-Px、SOD2升高),保护线粒体功能(线粒体膜电位、线粒体呼吸链复合物Ⅰ、线粒体呼吸链复合物Ⅲ升高),激活Pkm2/Nrf2信号通路(Pkm2、Nrf2、GCLM、GCLC mRNA和核蛋白表达升高)(P<0.05,P<0.01);BYF组T-AOC显著升高,MDA显著降低(P<0.01,P<0.05);BYF在升高MAN、GSH-Px、T-AOC、Pkm2 mRNA表达及降低MLI的作用方面优于NAC组(P<0.05,P<0.01)。结论:补肺益肾方和乙酰半胱氨酸均可减轻COPD大鼠肺组织氧化应激,改善线粒体功能,提高抗氧化能力,其机制可能与调控Pkm2/Nrf2信号通路有关,补肺益肾方在改善肺泡结构及提高抗氧化酶活性方面优于乙酰半胱氨酸。