卵白蛋白诱发变应性鼻炎豚鼠模型的特点及鉴定

目的:建立卵白蛋白(ovalbumin,OVA)诱发的变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)豚鼠模型,观察其临床症状、病理学和免疫炎症反应有关指标的变化特点。方法:实验豚鼠分为正常组和模型组。模型组动物经腹腔注射0.8ml的OVA混悬液进行全身致敏,并经双侧鼻腔按每侧20μl的OVA生理盐水溶液(60mg/ml)滴鼻进行局部致敏,致敏期限为21d;间隔1周后,以OVA生理盐水溶液(60mg/ml)滴鼻激发,每天1次,连续7d,而后改为两天1次,连续14d,剂量均为50μl/kg。正常组动物以生理盐水代替OVA悬液或OVA生理盐水溶液,用法用量与模型组相同。激发阶段,动态观察各组豚鼠喷嚏、抓鼻、眼泪、鼻涕及呼吸困难症状变化;激发期结束,动物取血制备血清用于IgE含量检测,剥取鼻黏膜用于组织病理学观察及组胺含量测定。结果:与正常组比较,模型组豚鼠出现典型的变应性鼻炎症状,喷嚏数增加并伴有严重抓鼻现象,血清IgE及鼻黏膜组胺含量均明显升高(P<0.01);鼻黏膜组织出现嗜酸粒细胞浸润、血管扩张及上皮脱落等典型的炎性病理变化。结论:OVA诱发的变应性鼻炎豚鼠模型,可较好模拟人类变应性鼻炎的临床特征,该模型是研究变应性鼻炎机制及治疗药物的良好模型。

重组人白细胞介素-1受体拮抗剂对甲苯-2,4-二异氰酸酯诱发豚鼠变应性鼻炎的治疗作用

目的 利用甲苯-2,4-二异氰酸酯（TDI）诱发的变应性鼻炎豚鼠模型,评价重组人白细胞介素-1受体拮抗剂（rh IL-1ra）的治疗效果。方法 以TDI作为致敏剂,通过致敏和激发两步法制作变应性鼻炎模型,同时设置正常对照组,仅给予致敏剂溶媒。豚鼠随机分为6组,即正常对照组、模型组、阳性药物（布地奈德鼻喷雾剂25.6μg/kg）组和rh IL-1ra 50、100和200μg/kg剂量组,每组10只动物。各给药组动物从激发前1 d（第8天,d 8）开始鼻腔给药,1次/d,连续14 d,正常对照及模型组动物相同方法给予rh IL-1ra溶媒。实验期间,按照临床评分标准对动物进行动态记录评分。待最后一次给药且临床评分结束后,麻醉并活杀动物,快速制备血清用于Ig E水平测定;分离鼻黏膜组织用于组胺含量测定及组织病理学观察。结果 与正常组比较,模型组豚鼠表现出典型的变应性鼻炎症状;与模型组比较,rh IL-1ra给药组动物的临床评分、喷嚏数、血清Ig E水平、鼻黏膜组胺含量均显著降低（P〈0.05）,且鼻黏膜组织病理学变化有显著改善。阳性药物组的表现与rh IL-1ra给药组基本相同,二者无显著性差异。结论 成功建立了TDI诱发的变应性鼻炎豚鼠模型;在（50~200）μg/kg剂量范围内,rh IL-1ra显示出肯定的治疗效果,提示rh IL-1ra有望成为变应性鼻炎的新型防治药物。

TDI诱发变应性鼻炎豚鼠模型的建立

目的建立甲苯-2,4-二异氰酸酯(TDI)诱发的变应性鼻炎(AR)豚鼠模型。方法模型组和布地奈德治疗组动物,利用10%的TDI经鼻通过反复致敏和激发两个步骤诱发AR模型。致敏和激发均采用TDI双侧鼻孔滴鼻(每侧鼻孔以12.5μl/kg计算),其中,致敏过程共7 d,每天1次;激发过程共14 d,隔天1次。自致敏开始,记录动物临床评分和喷嚏数。待实验结束后,分离鼻黏膜并制备血清,观察鼻黏膜组织病理学变化,检测鼻黏膜组胺含量及血清中IgE含量。布地奈德治疗组动物,自致敏结束次日开始通过双侧鼻孔滴鼻给药(每侧鼻孔给药为10μl/kg),每天1次,连续14 d;模型组按相同方式给予等体积生理盐水。正常对照组动物,以橄榄油替代10%TDI,其余处理同模型组。结果与正常对照组比较,模型组豚鼠的临床评分、鼻黏膜组织组胺含量及血清IgE含量均明显升高(P<0.05),鼻黏膜组织出现嗜酸性粒细胞浸润、小血管扩张、组织水肿及上皮脱落等典型的炎性病理变化;布地奈德给药则可显著改善以上病变。结论 TDI在豚鼠体内能够诱发典型的变应性鼻炎模型,具有方法简便可靠、成功率高的优点。

原代培养大鼠肾小管上皮细胞在有机阴离子转运中的应用

目的优化原代培养大鼠肾小管上皮细胞(RTEC)的方法,探讨其应用于有机阴离子转运分析研究的优点。方法将大鼠肾皮质剪碎,经消化、过滤、短暂贴壁,所得大鼠RTEC在含体积分数10%胎牛血清的达尔伯克改良伊格尔培养基/F12培养基中培养,同时加入胰岛素-转铁蛋白-硒(ITS)营养添加剂。人肾小管HK-2细胞的培养条件同大鼠RTEC,但不添加ITS。反转录聚合酶链反应法检测大鼠RTEC及人肾小管HK-2细胞中β-actin、α-酮戊二酸(盐)受体1及有机阴离子转运蛋白1(OAT1)mRNA的表达。将HK-2细胞、大鼠RTEC应用于荧光素转运实验,观察2种细胞荧光强度随时间变化的差异。结果大鼠RTEC可传代,且生长状态良好。HK-2细胞无OAT1表达,不具有转运荧光素的能力;大鼠RTEC有OAT1表达,具有转运荧光素的能力。结论 ITS营养添加剂有利于原代培养大鼠RTEC的传代生长,该细胞可成功用于有机阴离子转运的研究,较HK-2细胞株更能客观地反映肾小管的转运功能,是研究肾脏相关功能的理想细胞学模型。

曲酸的抗氧化作用与辐射损伤防护效应的关系

目的 探究曲酸的抗氧化作用与辐射防护效应的关系.方法 将C57小鼠按随机数字表法随机分为健康对照组、模型照射组、曲酸低浓度组及高浓度组.健康对照组不做任何处理,其他组在照前27 h分别皮下单次给予无菌蒸馏水、75及300 mg/kg的曲酸,经4 Gy60Co γ射线单次全身照射,并于照后第3、4、7天处死小鼠,分别测定小鼠血清及肝肾组织中的总超氧化物歧化酶（T-SOD）活力、丙二醛（MDA）含量、股骨骨髓细胞DNA含量及骨髓细胞微核率,并体外测定曲酸对DPPH·自由基的清除作用.结果 曲酸300 mg/kg给药组小鼠血清及肝肾组织中总SOD活力、骨髓细胞DNA含量明显高于模型照射组（F =22.63、7.29、67.58、57.32,P＜0.05）,而其血清及肝肾组织中MDA含量、骨髓细胞微核率明显低于模型照射组（F =26.22、27.06、4.51、14.28,P＜0.05）,体外检测显示曲酸对DPPH·自由基具有明显的清除作用,曲酸、丁基羟基甲苯（BHT）清除DPPH·自由基的IC50值分别为（4.55±0.26）和（1.83±0.10） mg/ml,其浓度同为20 mg/ml时DPPH·自由基清除率分别为（82.38±3.51）％和（96.41±0.45）％.结论 曲酸可清除体内自由基,保护小鼠遗传物质免受射线损伤,从而实现其抗辐射作用.