Polo样激酶1在大鼠心肌细胞分化过程中的表达

目的通过检测polo样激酶1(plk1)在大鼠生后不同发育阶段心肌组织中的表达,探讨心肌细胞退出细胞周期的相关机制。方法生后0d、3d、7d、10d、2周和成年健康Wistar大鼠各5只,采用针对横纹肌肌动蛋白和磷酸化组蛋白H3的免疫荧光双标方法,测定各组大鼠心肌细胞有丝分裂指数;用RT-PCR和免疫印迹技术,检测心肌组织plk1 mRNA和蛋白表达的改变。结果大鼠生后0d心肌细胞有丝分裂指数[(0.905±0.087)%]是生后2周[(0.372±0.094)%]的2.4倍(P<0.01);plk1基因和蛋白在大鼠生后表达明显下调,2周后未检测到表达。结论plk1基因的表达下调与大鼠心肌细胞增殖停滞密切相关,在大鼠心肌细胞退出细胞周期的调控机制中发挥重要作用。

激活的Akt对心肌细胞的增殖调控

目的通过检测Akt在大鼠心肌细胞退出细胞周期过程中的表达及Akt表达载体转染后大鼠心肌细胞有丝分裂的改变,探讨Akt对心肌细胞增殖的影响。方法生后不同发育阶段和成年健康Wistar大鼠各5只,用RT-PCR和免疫印迹法,检测心肌组织Akt的mRNA和蛋白磷酸化水平改变;培养大鼠H9c2(2-1)心肌细胞,通过胰岛素刺激和真核表达载体pCIS2-Akt-WT转染两种方式激活细胞内Akt,采用免疫沉淀方法检测细胞内磷酸化组蛋白H3表达改变,观察Akt对心肌细胞有丝分裂的影响。结果大鼠生后7d到2周心肌组织Akt mRNA表达和蛋白磷酸化水平明显下降(P<0.01),激活的Akt促使大鼠H9c2(2-1)心肌细胞磷酸化组蛋白H3表达显著增加(P<0.01)。结论 Akt能促进可增殖心肌细胞的有丝分裂。

磷酸化组蛋白H3--检测心肌细胞有丝分裂指数的可靠指标

目的采用磷酸化组蛋白H3鉴定心肌细胞有丝分裂,为研究心肌细胞增殖机制奠定形态学基础。方法对H9c2(2-1)大鼠心肌细胞进行培养,利用免疫荧光双重染色技术,用横纹肌肌动蛋白IgM单克隆抗体标记心肌细胞,用磷酸化组蛋白H3 IgG单克隆抗体标记有丝分裂的染色体,同时用Hochest 33342显示细胞核,荧光显微镜观察并摄片。结果心肌细胞胞质呈红色荧光,有丝分裂的染色体呈现不同形状的绿色荧光,胞核为蓝色。结论磷酸化组蛋白H3是观察和鉴别心肌细胞有丝分裂的可靠指标。

升主动脉缩窄大鼠左室心肌细胞结蛋白重构

目的 :通过观察左室心肌细胞结蛋白在升主动脉缩窄后心肌肥厚期和心力衰竭期的表达 ,探讨心肌肥厚和心力衰竭发生的机理。方法 :制作大鼠升主动脉缩窄动物模型 ,间接免疫荧光技术检测游离心肌细胞内结蛋白的分布 ,WesternBlot技术检测新鲜心肌组织中结蛋白的表达。结果 :心肌肥厚组和心力衰竭组左室心肌结蛋白表达与对照组相比明显增多 ;心力衰竭组结蛋白纤维在心肌细胞内的分布与对照组相比无明显差异。结论 :心肌细胞结蛋白表达的改变是慢性后负荷性心肌肥厚向心力衰竭转变的重要因素.

大鼠生后不同发育阶段心肌细胞有丝分裂指数检测

目的检测大鼠生后不同发育阶段心肌细胞的有丝分裂指数,为研究心肌细胞增殖机制奠定形态学基础。方法取大鼠生后不同发育阶段心肌组织行冰冻切片,采用免疫荧光双重染色方法,以横纹肌肌动蛋白单克隆抗体标记心肌细胞,以磷酸化组蛋白H3单克隆抗体标记有丝分裂的染色体,同时用Hochest33342显示细胞核,荧光显微镜观察并拍照。结果心肌细胞胞质呈红色荧光,有丝分裂的染色体呈现不同形状的绿色荧光,胞核为蓝色;大鼠生后零天心肌细胞有丝分裂指数(0.905±0.087%)是生后2w(0.372±0.094%)的2.4倍(P<0.01),4w至成年几乎为零。结论大鼠出生2w后心肌细胞逐渐丧失增殖能力,由增生性生长向肥大性生长转化。

酶标荧光-97检测中性粒细胞碱性磷酸酶活性的新方法

目的用一种新试剂酶标荧光-97(ELF-97)检测人血中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)活性,观察NAP阳性细胞数及阳性颗粒形态和分布。方法用Ficoll为介质的等密度沉降分离法从全血中分离出中性粒细胞,固定后以ELF-97为底物进行酶细胞化学反应,荧光/微分干涉相差显微镜观察并摄片。结果荧光显微镜下可见中性粒细胞内有明亮的黄绿色荧光颗粒,颗粒在细胞内的分布均匀,大小不一,51例健康成人血样NAP阳性率为(94.102±3.133)%。结论ELF-97荧光检测法操作简便,灵敏度高,产物不容易扩散,重复性好,结果精确,可作为不同用途的碱性磷酸酶检测手段。

人参皂苷预防大鼠心肌肥大的评价

目的评价人参皂苷对心肌肥大的预防作用。方法采用升主动脉缩窄的方法制作大鼠压力负荷心肌肥大动物模型,同时用人参皂苷进行预防性治疗,通过三维彩色超声技术和免疫荧光双重染色的方法评价人参皂苷的治疗作用。结果超声学指标,与假手术组相比,心肌肥大组的LVPW、IVS增加(P<0.01),LVDD减小(P<0.01);而与心肌肥大组相比,人参皂苷组LVPW、IVS减少(P<0.01),LVDD增加(P<0.01)。形态学上,人参皂苷能逆转心肌纤维肥大和减少间质增生。结论人参皂苷在早期能预防或延缓心肌肥大的发生。

Transwell小室筛选高侵袭性C6细胞MMP-2和TIMP-2的表达

目的:通过观察Transwell小室筛选的高侵袭性C6细胞中组织金属蛋白酶抑制剂-2(tissueinhibitorofmetalloproteinase-2,TIMP-2)的表达,探讨基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)及TIMP-2在胶质瘤侵袭中的作用机制。方法:通过Transwell小室筛选出一种更具有侵袭能力的C6-C1细胞,用细胞损伤愈合实验及Transwell小室评价其侵袭转移能力,用明胶酶谱、反向明胶酶谱及Westernblot等方法来检测MMP-2和TIMP-2的表达。结果:与同源C6细胞相比,这种体外筛选的C6-C1侵袭能力增加3倍多,增强了快速的单层细胞损伤愈合能力,MMP-2激活水平增加80%,TIMP-2的蛋白表达水平增长2倍。结论:MMP-2的激活水平增加与胶质瘤的侵袭转移能力相关,并与TIMP-2的表达增高相关。TIMP-2表达增加促进了MMP-2的激活和细胞侵袭。

Akt和FoxO1在超负荷性心肌肥大时大鼠心肌的表达

目的通过检测Akt和FoxO1基因在大鼠超负荷性心肌肥大过程中的表达,探讨心肌肥大时的细胞周期调控机制。方法采用升主动脉缩窄的方法制作大鼠超负荷心肌肥大动物模型,通过三维彩色超声技术评价心肌肥大程度,采用RT-PCR技术检测心肌组织Akt和FoxO1的mRNA表达,用Westernblots方法检测Akt磷酸化水平。结果与假手术组相比,模型组的左室后壁厚度(LVPW)、室间隔厚度(IVS)增加(P<0.01),左室舒张末内径(LVDD)减小(P<0.01)。模型组心肌组织中FoxO1的mRNA表达下调(P<0.01),Akt的基因表达没有明显变化但蛋白的磷酸化水平显著增加(P<0.01)。结论大鼠超负荷性心肌肥大时Akt激活,同时FoxO1的表达下调。

京津冀数据开放共享研究现状、问题及对策

京津冀协同发展是当前中国三大国家战略之一,是在新的历史条件下作出的重大决策部署。本文首先阐述了京津冀一体化的意义及数据开放共享在其中的作用。接着介绍了京津冀三地在各重点领域数据共享平台/项目的建设现状及相关的政策法规,并分析了京津冀数据开放共享中存在的问题。最后从大数据产业链、数据采集体系、数据共享机制、大数据人才培养和数据开放生态五个角度提出了推进京津冀数据开放共享的建议。

云服务认证浅析

介绍了云计算背景下云服务的应用情况以及企业对实施云服务解决方案的担忧,并由此引出了云服务认证的概念;总结了云服务认证的优势以及遵循认证标准所带来的挑战;提出了一些进行云服务认证的监测和评估方法。

PBL教学法在神经外科研究生带教中的应用与思考

研究生教育是医学教育的重要组成部分，是为临床培养高素质人才的必要途径，其教育更注重学生思维能力、创新意识的培养。神经外科是一门专科性很强、进展迅速的学科，但神经外科学在外科教学中是非主干课程，其内容在本科教材中比例偏少，教学时数少，实习时间的安排往往偏少，学生在短时间内无法形成感性认识，更缺少实际操作的机会Ⅲ。神经外科与神经系统解剖和神经生理学有着密切的联系，其基础知识的复杂性和相关神经系统疾病的专业性大大限制了学生的理解能力和思维能力。如何培养高素质的医学人才，这就需要我们改革传统的教学模式，将PBL教学法引入神经外科的研究生培养中。

Wee1基因在大鼠生后发育不同阶段与压力负荷后心肌组织的差异表达

目的检测wee1基因在大鼠生后不同发育阶段和压力负荷性心肌肥大心肌组织中的表达情况,探讨心肌细胞增殖调控的相关机制。方法采用升主动脉缩窄方法制作压力负荷性心肌肥大动物模型,采用RT-PCR技术检测大鼠生后不同发育阶段和肥大心肌组织wee1基因的mRNA表达。结果 wee1基因在大鼠生后0天呈低表达,生后第3天高表达(P<0.01),之后至成年呈低水平表达;与假手术组相比,压力负荷性肥大心肌组织wee1基因表达水平明显上调(P<0.01)。结论 wee1基因在大鼠生后发育过程中和在压力负荷性心肌肥大组织呈差异表达。

组织学实验教学中应用多媒体数码互动教学系统的思考

医学显微形态学实验是一种综合性的，带有很强的思维性的实验，是理论教学工作的实践基础，是培养高素质人才的重要手段[1]。21世纪是科学技术高速发展的时代，其先进的计算机和网络技术应用于医学形态学实验教学后，使教学方式发生了巨大的变革。多媒体数码互动教学系统应用于组织学等形态学实验教学后，有效的提高了学生的理解和综合能力，增强学生与教师在微细结构水平上的广泛交流[2]。辽宁医学院形态实验室引进了“捷达多媒体数码互动教学系统”，取代了原来的“形态教学”。通过对一年多的实践与探索，对多媒体数码互动教学系统在组织学实验教学上的使用有了几点体会。

A novel resonant cavity enhanced photodetector with flattop and steep-edge response

A novel resonant cavity enhanced(RCE) photodetector with flat-top and steep-edge response is presented.The response is obtained by designing a gradient-thickness P area in the absorption cavity.Simulation results show that the maximum and minimum values of the quantum efficiency in bandpass are 85.242% and 87.564% respectively,the ripple is about 3.6%,and 0.5 dB,3 dB and 20 dB bandwidths are 0.3 nm,0.4 nm and 1.2 nm,respectively.The mesa area is 10 μm×10 μm and the frequency response bandwidth is 87 GHz.Compared with similar photodetectors,this photodetector has high quantum efficiency,narrow spectral response linewidth,good flat-top and steep-edge response and ideal high-speed characteristics.