HIF-1α通过调控上皮-间充质转化对胆囊癌侵袭转移的影响

目的探讨HIF-1α对胆囊癌细胞迁移侵袭的影响及其相关调控机制。方法构建GBC-SD细胞,使用慢病毒转染,分别得到实验组(HIF-1αshRNA)、阴性对照组(空载慢病毒转染)和空白对照组(未处理)。蛋白质免疫印迹法检测E-Cadherin、N-Cadherin蛋白的表达水平,GBC-SD细胞的迁移能力用细胞划痕实验检测,GBC-SD细胞的侵袭能力用Transwell侵袭实验检测。结果与对照组相比,实验组E-Cadherin蛋白的表达水平明显升高(P<0.001),N-Cadherin蛋白的表达水平明显降低(P<0.001),对照组之间E-Cadherin、NCadherin蛋白的表达水平无明显差异(P>0.05)。实验组细胞划痕愈合度较对照组低(P<0.001)、穿模个数较对照组少(P<0.001),而对照组之间细胞划痕愈合度、穿模个数无明显差异(P>0.05)。结论靶向敲低HIF-1α可以降低GBC-SD细胞的迁移侵袭能力,其作用机制可能与调控上皮-间充质转化有关。

同步多镜联合技术在肝胆管结石病中的应用

目的探讨同步多镜联合技术在肝胆管结石病中的应用价值。方法回顾性分析昆明医科大学第二附属医院自2018年1月至2021年10月收治的159例肝胆管结石病人的临床资料,按治疗方法的不同分为肝外胆管结石组[A组:腹腔镜+十二指肠镜组(A1组,55例)、腹腔镜+胆道镜组+十二指肠镜/胃镜组(A2组,40例)]和肝内外胆管结石组[B组:腹腔镜+胆道镜+十二指肠镜组/胃镜组(B1组,32例)、腹腔镜+胆道镜+T管引流组(B2组,32例)],分别比较各组内肝外胆管直径、手术时间、出血量、术后住院时间、总住院时间、术后并发症严重程度、残石率等指标,并进行统计学分析。结果所有病例均顺利完成手术,A组和B组由于病种不同,组间比较无意义,但组内比较有意义。A组中,术中出血量A1组少于A2组[(25.5±21.1)mL比(48.8±50.2)mL],差异有统计学意义(P<0.05),术后Ⅲ级以上近期并发症发生率(3.6%比5.0%)、远期并发症发生率(3.6%比2.5%)及残石率(1.8%比2.5%)比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。B组中,B1组总住院时间短于B2组[(15.4±3.0)d比(19.0±6.2)d],术后住院时间短于B2组[(7.8±2.1)d比(10.2±3.7)d],差异均有统计学意义(均P<0.05);近期并发症发生率(6.3%比9.4%)、远期并发症发生率(3.1%比6.3%)及残石率(6.3%比6.3%)比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论对于肝外胆管结石,根据胆总管直径选择同步腹腔镜和十二指肠镜或同步腹腔镜、胆道镜和十二指肠镜/胃镜的手术方式有较好的微创手术效果;对于肝内外胆管结石的病人,同步腹腔镜下解剖性肝叶切除、胆道镜取石和十二指肠镜/胃镜下内引流的手术方式能够保证病灶切除、取净结石、通畅引流的同时免T管留置,减少了住院时间,获得了最大化微创效果,有较好的推广应用价值。

LASS2-3'-非翻译区rs8444单核苷酸多态性与膀胱癌易感性的相关性研究

目的:探讨人源性长寿保障基因2(Homo sapiens longevity assurance homologue 2,LASS2)-3'-非翻译区(UTR)单核苷酸多态性与中国云南地区膀胱癌人群之间的相关性。方法:选择2011年1月至2015年1月在昆明医科大学第二附属医院就诊且经病理学确诊的105例膀胱癌作为膀胱癌组、100例非膀胱癌作为对照组进行病例对照研究,对两组患者的膀胱组织进行基因扩增和测序,分析研究LASS2-3'-非翻译区单核苷酸多态性与膀胱癌之间的相关性。结果:在LASS2-3'-非翻译区仅发现1个单核苷酸多态性位点rs8444,经χ2检验和Logistic回归分析显示,膀胱癌组和对照组rs8444T/C等位基因频率及基因型分布差异具有统计学意义(χ2=10.267,P=0.006;χ2=10.634,P=0.001)。与携带T等位基因或TT基因型相比,携带C等位基因或CC基因型的个体发生膀胱癌的风险显著降低(OR=0.489,95%CI为0.309~0.772,P=0.002;OR=0.258,95%CI为0.081~0.827,P=0.023),但与膀胱癌的TNM分期、病理分级和有否转移无明显相关性(P>0.05)。结论:LASS2-3'-非翻译区rs8444C等位基因和CC基因型可降低膀胱癌的发病风险,但与膀胱癌的TNM分期、病理分级和转移情况无关。

miRNA-20a在膀胱癌中的表达及其机制研究

目的:探讨miRNA-20a在膀胱癌组织中的表达及其机制。方法:收集2014年1月至2015年1月昆明医科大学第二附属医院96例患者的组织标本,运用实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)方法检测miRNA-20a在膀胱癌组织和癌旁组织中的表达;生物信息学方法预测miRNA-20a的靶基因并采用双荧光素酶报告基因实验进行验证;q RT-PCR、Western blot以及细胞免疫荧光分别检测人膀胱癌细胞系T24和J82细胞转染miRNA-20a模拟物或阴性对照后对靶基因mRNA和蛋白表达的影响;CCK-8、Transwell侵袭小室和划痕实验检测过表达miRNA-20a后T24细胞体外增殖、迁移和侵袭能力的改变。结果:miRNA-20a在膀胱癌组织中高表达,且与肿瘤的病理分级、临床分期、转移以及复发密切相关(P<0.001);双荧光素酶报告基因实验证实miRNA-20a与人源性长寿保障基因2(Homo sapiens longevity assurance homologue 2,LASS2)的3'-UTR直接靶向结合;转染miRNA-20a模拟物可显著下调膀胱癌细胞中LASS2 m RNA和蛋白的表达(P<0.01),增强膀胱癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力(P<0.01)。结论:miRNA-20a在膀胱癌组织中高表达,且miRNA-20a可通过靶向抑制LASS2促进膀胱癌细胞的增殖、侵袭和迁移,与膀胱癌的发生发展相关。

不同分级与分期膀胱癌人微小核糖核酸3658和人源性长寿保障基因Ⅱ型表达的变化

目的检测人微小核糖核酸3658(miR-3658)和人源性长寿保障基因Ⅱ型(LASS2)在不同病理分级、临床分期膀胱癌组织中的表达情况。方法通过实时荧光定量PCR检测96对新鲜膀胱癌组织(膀胱癌组)和癌旁正常组织(癌旁组)中miR-3658和LASS2基因的表达情况;采用免疫组化法检测LASS2的蛋白表达。结果采用2^(-ΔΔCt)的相对表达量分析,膀胱癌组的miR-3658表达水平显著高于癌旁组,而膀胱癌组LASS2的表达水平低于癌旁组(P<0.01)。不同病理分级、临床分期膀胱癌组织之间,miR-3658和LASS2基因均呈差异性表达。与高分化膀胱癌相比,低分化膀胱癌miR-3658呈高表达,LASS2呈低表达(P<0.01)。随着肿瘤浸润深度及临床分期的增加,miR-3658表达水平呈递增趋势,而LASS2则逐渐下降(P<0.01)。免疫组化结果显示,膀胱癌组LASS2蛋白阳性表达率低于癌旁组,且随着肿瘤病理分级、浸润深度、分期程度的增加,其阳性表达率逐渐降低(P<0.05)。结论 miR-3658的高表达及LASS2的低表达可能参与膀胱癌的发生发展过程,并与其恶性程度相关。

微小RNA-92a在相关疾病发病机制中的研究进展

miRNA-92a家族基因是由miRNA-25、miRNA-92a^1和miRNA-92a^2等序列相似、结构相仿、种子区序列相同的微小RNA组成,它们分别来自在进化过程中高度保守并互为旁系同源序列的miRNA-106b^25、miRNA-17~92和miRNA-106a^363基因簇。目前研究认为,miRNA-92a家族基因是一组与血管内皮细胞形成有关的miRNAs,其表达紊乱与肿瘤的发生发展密切相关。本文就miRNA-92a家族基因在相关疾病发病机制中的研究进展进行综述。

急诊胰十二指肠切除术在闭合性十二指肠胰头外伤中的应用

目的探讨急诊胰十二指肠切除术(emergency pancreaticodenetomy,EPD)在闭合性十二指肠胰头外伤中的应用价值。方法回顾性分析21例闭合性十二指肠胰头外伤的病例资料,收集昆明医科大学第二附属医院自2018年1月至2020年1月治疗的21例闭合性十二指肠胰头外伤的病例资料,其中急诊行胰十二指肠切除5例为EPD组:男4例,女1例,未行急诊胰十二指肠切除术组为非EPD组,共16例:男13例,女3例,比较两组患者在平均年龄、手术时间、术中出血量、术后并发症、死亡率、住院天数等指标中的统计学差异。结果EPD组:平均年龄(28.60±5.18)岁,平均手术时间(270.00±47.43)min,术中出血量(450.00±165.83)mL,平均住院天数(15.00±4.85)d,术后胰瘘1例,局限性积液1例,无术后死亡病例;非EPD组:平均年龄(40.81±12.48)岁,平均手术时间(266.88±96.73)min,术中出血量(695.63±399.02)mL,平均住院天数(53.19±27.58)d,术后胰瘘11例,胆瘘5例,肠瘘6例,术后出血6例,感染12例,局限性积液9例,术后死亡3例;两组对比,EPD组患者平均年龄明显小于非EPD组(P<0.05)且行急诊胰十二指肠手术组在平均住院日和术后感染并发症的发生上明显低于未行急诊胰十二指肠切除术组(P<0.05)。16例患者术后门诊随访,随访时间3~24月,平均随访时间(11.64±5.57)月,EPD组5例患者术后随访无特殊,非EPD组有3例患者出院后1~5月时间因十二指肠狭窄行胃空肠吻合术后痊愈出院,有1例患者出院7月后因胆道良性狭窄内镜下塑料支架植入后好转。结论对于闭合性十二指肠胰头外伤的患者,在受伤不超过24 h且腹腔感染未扩散之前,急诊胰十二指肠手术是安全可行的,此种情况之下,陈氏胰肠吻合是手术成功及预后良好的重要保证。

黑升麻提取物对人肝癌细胞系HepG2增殖和凋亡的影响

目的研究黑升麻提取物对人肝癌细胞系HepG2增殖和凋亡的影响。方法将肝癌HepG2细胞依据随机数字法分为黑升麻药物0、10、20、30、40、50μg/mL组,采用细胞计数试剂盒8检测实验组不同浓度(10、20、30、40、50μg/mL)黑升麻处理后HepG2细胞的增殖抑制率。流式细胞仪、Annexin V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染检测对照组(黑升麻药物浓度0μg/mL)及不同浓度(10、20、32μg/mL)黑升麻处理后实验组的HepG2凋亡细胞比率; Western blot检测凋亡相关胱天蛋白酶(caspase)-3、caspase-8、caspase-9蛋白的表达。结果 0、10、20、30、40、50μg/mL组抑制率分别为0%、(12. 51±9. 31)%、(27. 85±1. 51)%、(53. 20±5. 55)%、(67. 42±3. 54)%、(81. 43±0. 73)%,各组比较差异有统计学意义(P <0. 05),随着各组给药浓度的增加抑制率逐渐升高(P <0. 05)。黑升麻IC50为32. 010μg/mL。与0μg/mL组比较,10、20、32μg/mL组凋亡逐渐增加(P <0. 05),Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-8蛋白表达上调(P <0. 05)。结论黑升麻提取物可有效抑制肝癌HepG2细胞系增殖,促进细胞凋亡,该作用至少部分依赖于外源性死亡受体途径。

自噬在肿瘤免疫及耐药中的研究现状与展望

自噬是一个分解的过程,在应激和营养缺乏条件下被激活,通过分解过多或不必要的蛋白质、受损或老化的细胞器来维持代谢平衡。自噬受多种信号通路的调节,且在癌症中起着双重作用,即肿瘤抑制和致癌活性。自噬可以影响肿瘤细胞的耐药性以及抗肿瘤免疫,自噬作为一个潜在的抗癌药物和靶向性的目标,提供了一种很有前途的治疗策略,以规避抗肿瘤的耐药性和增加抗肿瘤免疫。

经尿道前列腺钬激光剜除术治疗BPH220例疗效观察

目的：研究经尿道前列腺钬激光剜除术（HoLEP）治疗BPH的疗效及安全性。方法：应用100W钬激光和组织粉碎器对220例BPH患者行HoLEP及组织粉碎术，并分别记录患者术前、术中及术后随访的临床资料，分析及评估HoLEP的疗效及安全性。结果：220例手术均获成功，手术时间51117（78．13±21．24）min，切除腺体58144（82．47±19．25）g。术后留置导尿时间1896（32．7±24．8）h，术后膀胱持续冲洗时间048（23．4±12．2）h，术后住院时间26（3．13±1．01）d，术后国际前列腺症状评分（IPSS）、生活质量（QOL）评分、最大尿流率（Qmax）、剩余尿量（RUV）较术前明显改善（P〈0．01）。术后并发症发生率低。结论：HoI．EP治疗BPH疗效安全可靠，并发症少，剜除彻底，并且适应范围广，有可能成为治疗BPH新的金标准。

肝细胞癌患者术前血浆纤维蛋白原和D-二聚体水平的临床分析

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者术前血浆纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(DD)与临床病理特征的相关性。方法收集2015年9月至2017年10月在昆明医科大学第二附属医院接受手术治疗的178例HCC患者的临床病例资料,对其术前血浆FIB、DD水平与临床病理特征进行单因素和Logistic回归多因素分析。结果单因素分析结果显示血浆高FIB水平(>4.00g/L)与男性、高白细胞、高血小板、高血清清蛋白、最大肿瘤直径、肝硬化、脾大、Ki-67高表达均相关(P<0.05),血浆高DD水平(>0.55μg/mL)与男性、高白细胞、高血小板、最大肿瘤直径、淋巴转移、高级别病理分级、CK19(+)、Ki-67高表达均相关(P<0.05)。Logistic回归多因素分析结果显示:高白细胞(OR=1.618,95%CI:1.03~2.54,P=0.037)、最大肿瘤直径(OR=1.421,95%CI:1.10~1.84,P=0.008)与血浆高FIB水平(>4.00g/L)相关,最大肿瘤直径(OR=1.324,95%CI:1.05~1.67,P=0.019)与血浆高DD水平(>0.55μg/mL)相关。结论高FIB及高DD水平可影响HCC患者预后,可采用抗凝疗法可改善患者预后。