ShRNA-AKT2对人脑胶质瘤U87细胞株增殖及凋亡的影响

目的研究通过慢病毒载体靶向抑制丝/苏氨酸蛋白激酶2(AKT2)基因表达对胶质瘤细胞株U87增殖、凋亡的影响。方法利用慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰载体感染U87细胞株,逆转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹技术(Western blot)分别检测转染后细胞株AKT2 mRNA和蛋白表达水平变化,四唑盐(MTT)法检测细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞周期改变。结果转染AKT2-shRNA可有效降低U87细胞株内的AKT2表达。干扰组细胞从第3 d开始增殖明显降低(P<0.05);AKT2-shRNA干扰组细胞的凋亡率为11.80%±1.83%,明显高于阴性对照组的2.01%±0.20%和未转染组的2.13%±0.32%(P<0.05);AKT2-shRNA干扰组细胞周期S期细胞百分比显著低于对照组,而G0/G1期细胞比分比显著高于对照组(P<0.05)。结论 AKT2-shRNA可抑制胶质瘤细胞株的增殖,并导致肿瘤细胞凋亡增加。

大豆黄酮玻璃体腔注射对大鼠视神经损伤的影响

目的:大豆黄酮(Daidzein)玻璃体腔内注射是否对视神经急性损伤有保护和修复作用。方法:SD雄性大鼠72只,建立大鼠急性视神经钳夹损伤模型,随机分为正常组、PBS阴性对照组、大豆黄酮治疗组(10μmol/L,100μmol/L,1 000μmol/L)、鼠神经生长因子(mNGF,100ng/mL)阳性对照组;玻璃体内注射3d后处死各组大鼠,用组织病理(HE)、免疫组化检测以及Western Blot分析来观察和评价视网膜形态变化及进行各组间视网膜Caspase-3蛋白和GAP-43蛋白表达的比较。结果:与正常组和阴性对照组相比,不同浓度的大豆黄酮各治疗组和阳性对照组的视网膜形态结构较完整,Caspase-3蛋白的表达相对降低,GAP-43蛋白的表达相对较高,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大豆黄酮玻璃体腔注射对大鼠急性视神经损伤具有修复和保护作用。