三物白散对胃癌细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达的影响

目的:探讨三物白散对胃癌细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达的影响,探究三物白散抗胃癌的作用机制。方法:将28只SPF级雄性大鼠随机分为4组,每组7只,分别予以0.03125、0.0625、0.1250 g/(kg·d)三物白散及相同体积生理盐水灌胃,经腹主动脉采血制备含药血清。体外培养AGS细胞,设置空白对照组(空白组)、三物白散低剂量含药血清组(低剂量组)、三物白散中剂量含药血清组(中剂量组)、三物白散高剂量含药血清组(高剂量组)。采用CCK-8法检测不同浓度(5%、10%、15%、20%)三物白散含药血清对AGS细胞活性的影响;倒置显微镜下观察三物白散含药血清对AGS细胞形态的影响;RT-qPCR法检测Beclin1 mRNA、LC3 mRNA、p62 mRNA表达;Western blotting法检测Beclin1、LC3、p62蛋白表达。结果:与空白组比较,5%、10%、15%、20%三物白散高剂量含药血清可呈浓度-时间依赖性抑制AGS细胞活性;随着含药血清浓度升高,细胞形态逐渐不规则,细胞数量逐渐减少;中、高剂量组Beclin1 mRNA、LC3-ⅠmRNA、LC3-ⅡmRNA相对表达量均高于空白组,p62 mRNA相对表达量低于空白组(P<0.01);低剂量组LC3-ⅠmRNA、LC3-ⅡmRNA相对表达量高于空白组,p62 mRNA相对表达量低于空白组(P<0.01)。高剂量组Beclin1蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ均高于空白组,p62蛋白相对表达量低于空白组(P<0.01);中剂量组Beclin1蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ高于空白组(P<0.05或P<0.01),p62蛋白相对表达量低于空白组(P<0.01)。结论:三物白散对胃癌细胞的增殖有抑制作用,上调Beclin1、LC3表达、下调p62的表达、诱导胃癌细胞自噬可能是其抗胃癌作用机制之一。

基于网络药理学和分子对接探讨膈下逐瘀汤治疗胃癌作用机制

目的基于网络药理学和分子对接探讨膈下逐瘀汤治疗胃癌的作用机制。方法利用TCMSP、化学专业数据库筛选膈下逐瘀汤所有药物的有效活性成分及相关靶点,采用GeneCards、OMIM数据库筛选胃癌的作用靶点,将其与药物的有效活性成分及相关靶点取交集,筛选疾病-药物的共同靶点。将筛选出的共同靶点在STRING数据库中构建蛋白相互作用网络,利用Cytoscape3.9.1软件绘制药物活性成分-靶点网络,运用R4.2.1软件对潜在作用靶点进行GO和KEGG富集分析,运用AutoDockTools-1.5.7软件将膈下逐瘀汤治疗胃癌的关键活性成分与核心靶点进行分子对接。结果获得药物活性成分173个(槲皮素、山柰酚、木犀草素、β-谷甾醇、黄芩素、柚皮素、柱头甾醇、异鼠李素等),胃癌作用靶点1463个,药物-疾病共同靶点139个(TP53、AKT1、ESR1、VEGFA、MYC、CTNNB1、TNF等)。根据GO、KEGG富集分析显示这些靶点主要富集在细胞凋亡、PI3K-Akt、TNF、IL-17、AGE-RAGE等信号通路上。分子对接结果显示膈下逐瘀汤的关键活性成分均能与胃癌的核心靶点产生稳定的结合。结论膈下逐瘀汤可能通过PI3K-Akt、TNF、IL-17及AGE-RAGE等信号通路诱导细胞凋亡发挥抗胃癌作用。

溃结宁膏穴位敷贴预处理对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜的保护作用及机制研究

目的:观察溃结宁膏穴位敷贴预处理对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)大鼠肠黏膜的保护作用及机制。方法:将SD大鼠随机分为4组,空白组、模型组、敷贴组、敷贴非穴组,每组10只,空白组及模型组给予无药物的巴布剂基质穴位敷贴(中脘、气海、足三里、天枢),敷贴组及敷贴非穴组(臀部肌肉丰厚处)予以溃结宁膏敷贴。预处理28 d后,模型组、敷贴组、敷贴非穴组采用番泻叶溶液灌胃、喷冰水刺激联合三硝基苯磺(TNBS)乙醇法制作脾肾阳虚型UC大鼠病证结合模型。24 h后处死大鼠,肉眼下观察结肠组织大体形态、HE染色光镜下观察结肠组织病理形态学,ELISA法检测大鼠血清及结肠组织中IFN-γ、IL^(-1)2、IL-4、IL^(-1)0表达水平。结果:与空白组比较,模型组UC大鼠结肠组织可见溃疡形成,有大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润,结肠组织及血清IL-4、IL^(-1)0水平明显降低(P<0.01),IFN-γ、IL^(-1)2水平明显升高(P<0.01),UC模型复制成功;与模型组比较,敷贴组UC大鼠结肠组织较为完好,无明显糜烂及溃疡,炎性细胞浸润减少;敷贴非穴组结肠组织可见溃疡形成,并有大量中性粒细胞和淋巴细胞浸润;与模型组比较,敷贴组血清及结肠组织IL-4、IL^(-1)0水平明显增高(P<0.01),IFN-γ、IL^(-1)2水平明显降低(P<0.01)。结论:溃结宁膏穴位敷贴预处理对UC大鼠肠黏膜具有一定的保护作用,可能机制为降低血清及结肠组织促炎因子IFN-γ、IL^(-1)2水平,升高抗炎因子IL-4、IL^(-1)0水平,部分恢复大鼠血清及结肠组织促炎因子与抗炎因子的平衡;溃结宁膏敷贴效应具有腧穴特异性。

三物白散对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响

目的通过体外实验观察三物白散大鼠含药血清对人胃癌SGC-7901细胞的增殖、凋亡抑制作用及其机制。方法选择雄性SPF级大鼠随机分成4组,分别予以0.035、0.07、0.14g/（kg.d）三物白散及生理盐水灌胃,按＂通法＂制备三物白散大鼠含药血清。体外实验选择SGC-7901细胞,以5-氟尿嘧啶为阳性对照,采用四甲基偶氮唑蓝比色及吖啶橙、EB染色法检测低、中、高3组三物白散大鼠含药血清对SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响。结果不同剂量组的三物白散含药血清处理细胞12~72h后,各组OD比值均有不同程度的下降。且随三物白散含药血清质量浓度的增大、作用时间的延长,OD比值及存活率逐渐下降,且抑制率以高剂量三物白散含药血清作用48h为最高,可达69.2%。三物白散含药血清处理48h后的细胞中,低、中、高剂量三物白散含药血清作用SGC-7901细胞48h后各组的凋亡率依次为25%、32%、54%,并随质量浓度的升高、时间的延长而增加。高质量浓度的三物白散作用后,细胞凋亡率随作用时间的延长而增加。结论三物白散在一定剂量、时间范围内,能够抑制SGC-7901细胞增殖,并呈一定的剂量、时间依赖性。三物白散可诱导细胞凋亡,该作用呈一定的剂量、时间依赖性。

中医内科学专业研究生培养的研究与实践

研究生教育是目前我国培养高层次人才的主要方式之一,分析了中医内科研究生教育的现状及存在的问题,针对中医内科学特点和研究生现状,科学规划各培养阶段内容及指标内容细化,严格考核每一阶段,并经过多年的研究实践,取得了比较好的培养效果,提出中医内科学研究生培养改革的方案、对策、建议,以期为中医内科研究生教育改革提供一定参考。

消癌平注射液联合化疗治疗晚期胃癌疗效与安全性的Meta分析

目的:系统评价消癌平注射液联合化疗治疗晚期胃癌的临床疗效和安全性。方法:通过计算机检索中国期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、万方数据库、维普数据库、Cochrance Library、PubMed、Embase关于消癌平注射液联合化疗治疗晚期胃癌的随机对照临床试验文献。通过Review Manager 5.2软件和stata 14软件对研究进行偏倚风险评估、Meta分析。结果:有14篇文献符合纳入标准,共计1035例患者,文献有一定的偏倚风险,Meta分析结果显示:联合治疗组的治疗有效率[OR=1.815,95%CI(1.409,2.335),Z=4.61,P<0.000,01]、生存质量状况(PFS)改善率[OR=2.79,95%CI(1.86,4.18),Z=4.94,P<0.000,01]和无疾病进展期时间[HR=0.74,95%CI(0.54,0.94),Z=7.19,P<0.000,01]均优于单用化疗对照组;在毒性反应比较中,联合治疗组的白细胞减少[RR=0.65,95%CI(0.56,0.74),P=0.0001]、血小板减少[RR=0.57,95%CI(0.45,0.72),P=0.0001]、恶心呕吐[RR=0.76,95%CI(0.65,0.89),P=0.001]、手足综合征[RR=0.63,95%CI(0.48,0.81),P=0.0001]和口腔炎[RR=0.75,95%CI(0.65,0.76),P=0.0001]的发生率明显低于单用化疗对照组,以上结果均有统计学意义。结论:对于晚期胃癌的治疗,在化疗治疗的基础上联合消癌平注射液疗效更好且毒副作用更小。但受纳入研究质量所限,仍需更多高质量研究予以验证。

溃结宁膏穴位敷贴对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠血清及结肠组织促炎因子与抗炎因子的影响

目的观察溃结宁膏穴位敷贴对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)大鼠血清及结肠组织促炎因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12与抗炎因子IL-4、IL-10的影响,探讨其治疗脾肾阳虚型UC的作用机制。方法采用番泻叶溶液灌胃、喷冰水刺激和三硝基苯磺酸(TNBS)乙醇法制作脾肾阳虚型UC大鼠病证结合模型。将SD大鼠随机分为空白组、模型组、敷贴组、柳氮磺胺吡啶(SASP)组,每组10只,空白组和模型组予无药物的巴布剂基质穴位敷贴加生理盐水灌胃,敷贴组予溃结宁膏穴位敷贴加生理盐水灌胃,SASP组予无药物的巴布剂基质穴位敷贴加SASP灌胃,疗程均为28 d。治疗期间观察各组大鼠一般状况,治疗后肉眼观察结肠组织大体形态,HE染色镜下观察病理形态并评分,ELISA检测各组大鼠血清及结肠组织IFN-γ、IL-12、IL-4、IL-10水平。结果敷贴组和SASP组UC大鼠一般状况、结肠组织肉眼大体形态、病理形态均较模型组好转且评分降低;与模型组比较,敷贴组、SASP组血清和结肠组织IL-4、IL-10水平明显升高,IFN-γ、IL-12水平明显降低(P<0.01);同时,敷贴组IL-4、IL-10下降水平低于SASP组,IFN-γ、IL-12上升水平高于SASP组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论溃结宁膏可能通过部分恢复大鼠血清及结肠组织促炎因子与抗炎因子的平衡来发挥其治疗脾肾阳虚型UC的作用。

中医大学内科学临床实习教改的思路与实践

目的探讨中医内科临床实习教改方法,提高实习医生临床诊断思维和临床操作综合能力。方法在本科医学专业学生临床实习工作中,采取和加强以下几个方面的措施:(1)加强对学生实习前的培训;(2)加强基地内涵建设,提高教师队伍的质量;(3)规范临床实习教学模式,结合多种教学方法;(4)改革出科考核制度,对学生所掌握的理论与实践知识严格把关。结果通过规范的培训、实践与考核,使得实习医生临床思维、动手操作、应对患者自信能力增强。结论通过教学改革,更有利于医学生临床能力的全面培养。

人参皂苷Rg_5对胃癌BGC-823细胞增殖、凋亡及凋亡相关因子的影响

目的观察人参皂苷Rg_5对胃癌BGC-823细胞增殖、凋亡及凋亡相关因子Bcl-2相关X蛋白(BAX)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达的影响,探讨人参皂苷Rg_5抑制胃癌生长转移的可能作用机制。方法采用CCK-8法检测人参皂苷Rg_5对BGC-823细胞24、48 h的细胞增殖抑制作用,流式细胞术检测高、低浓度人参皂苷Rg_5对BGC-823细胞凋亡的影响,Western blot法检测凋亡相关因子Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果与空白组比较,人参皂苷Rg_550、100、200μmol/L 24 h存活率降低(P<0.05),人参皂苷Rg_512.5、25、50、100、200μmol/L 48 h存活率降低(P<0.05);与空白组比较,低浓度人参皂苷Rg_5凋亡率升高(P>0.05),高浓度人参皂苷Rg_5凋亡率升高(P<0.05);与空白组比较,高低浓度人参皂苷Rg_5组Bax蛋白表达均升高(P<0.05),高浓度人参皂苷Rg_5组Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05)。结论人参皂苷Rg_5可有效抑制胃癌BGC-823细胞的增殖,促进BGC-823细胞凋亡,且其促进BGC-823细胞凋亡的机制可能与其降低线粒体途径相关的细胞凋亡因子Bcl-2蛋白的表达,升高Bax蛋白的表达相关。

三物白散含药血清对胃癌MGC-803细胞增殖、凋亡及survivin基因表达的影响

目的研究三物白散含药血清对人胃癌MGC-803细胞株的增殖、凋亡及survivin基因表达的影响。方法体外实验选择MGC-803细胞,以5-氟尿嘧啶为阳性对照,采用MTT比色及吖啶橙、EB染色法检测低、中、高3组三物白散大鼠含药血清对MGC-803细胞增殖、凋亡的影响,运用RT-PCR法检测survivinmRNA的表达。结果三物白散含药血清作用MGC-803细胞后,随着三物白散含药血清药物浓度的增加及作用时间的延长,细胞增殖率逐渐降低,细胞抑制率、凋亡率逐渐升高,survivin蛋白的表达相应的降低。结论三物白散含药血清能够抑制人胃癌MGC-803细胞增殖,对细胞有诱导凋亡作用,在凋亡过程中涉及sur-vivin基因表达下降。

三物白散对胃癌SGC-7901细胞凋亡及survivin基因表达的影响

目的观察三物白散药物血清对人胃癌SGC-7901细胞凋亡及survivin mRNA表达的影响。方法选择人胃癌细胞株SGC-7901,分为空白对照组、阳性对照组及三物白散低、中、高剂量组。三物白散药物血清干预SGC-7901细胞后,采用荧光染色法检测胃癌细胞的凋亡率,RT-PCR检测survivin mRNA的表达。结果不同剂量组的三物白散药物血清干预SGC-7901细胞后,与空白对照组比较,各组细胞的凋亡率升高,且细胞凋亡率随药物血清浓度的增大、干预时间的延长逐渐升高;三物白散各剂量组survivin mRNA的表达均有不同程度的下降,与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且survivin mRNA表达随三物白散含药血清浓度的增大、干预时间的延长逐渐下降。结论三物白散可诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡,抑制survivin mRNA的表达。

调心除颤方治疗心房颤动40例临床观察

心房颤动（以下简称“房颤”）是临床常见的心律失常，可导致心悸、胸闷、头晕等不适，甚至引发血栓栓塞，使患者脑卒中发生率和病死率明显增高，故积极有效地治疗房颤具有重要的临床意义。

四逆散合平胃散治疗溃疡性结肠炎60例

目的观察四逆散合平胃散对溃疡性结肠炎患者的临床疗效。方法将111例活动期溃疡性结肠炎（UC）患者，随机分为四逆散合平胃散治疗组（60例）和柳氮磺胺吡啶对照组（51例），治疗30天后观察临床疗效、结肠镜下黏膜改变以及不良反应的发生。结果治疗组优于对照组，总有效率分别为96．67％和82．35％（P〈O．05）；结肠镜下黏膜水肿、充血修复情况治疗组优于对照组（P〈O．05），对黏膜出血、颗粒增粗、糜烂及溃疡疗效显著，但两组间无显著性差异（P〉O．05）。用药期间治疗组未见明显毒副作用。结论四逆散合平胃散治疗uc具有较好疗效，无明显不良反应，

提高中医内科学临床教学的探索

目的:探讨中医内科学临床教学,提高教学效果。方法:在中医内科学教学中采取和加强以下几个方面的措施:(1)重视专业及入科教育;(2)加强师资队伍建设;(3)课程及教学进度的改革;(4)加强中医经典的教育;(5)加强中医内科学临床能力的培养;(6)多种教学方式相结合;(7)规范临床实习教学模式。结果:通过规范的教学和实践培养,使培养的临床医生理论知识、临床思维能力增强。结论:通过改进教学,更有利于医学生临床能力的综合培养。

基于p38MAPK/NF-κB信号通路的穴位埋线对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜上皮屏障的影响

目的 观察穴位埋线对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜上皮屏障的影响,基于p38MAPK/NF-κB信号通路探讨其治疗UC的作用机制。方法 将46只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组10只和造模组36只,采用腺嘌呤、番泻叶分阶段灌胃,再予2,4,6-三硝基苯磺酸与乙醇复合物灌肠制备UC大鼠模型。将成模大鼠随机分为模型组、柳氮磺吡啶(SASP)组和埋线组,埋线组于“足三里”“天枢”“肾俞”“脾俞”“大肠俞”“膈俞”埋线,14 d埋线1次,共3次;SASP组予SASP混悬液灌胃,空白组和模型组予等量生理盐水灌胃,连续42 d。观察大鼠一般情况,进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分,HE染色观察结肠组织病理变化,ELISA检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,PCR检测结肠组织p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、核因子(NF)-κB p65、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、咬合蛋白(Occludin)mRNA表达,Western blot检测结肠组织p38MAPK、NF-κB p65、Occludin、ZO-1蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠结肠长度明显减少,体质量明显减轻,CMDI评分明显升高(P<0.01),血清IL-1β、IL-6及TNF-α含量明显增加(P<0.01),结肠组织p38MAPK、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01),Occludin、ZO-1 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01);与模型组比较,SASP组和埋线组大鼠结肠长度、体质量明显增加(P<0.01),CMDI评分明显降低(P<0.01),血清IL-1β、IL-6及TNF-α含量明显减少(P<0.01),结肠组织p38MAPK、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01),Occludin、ZO-1 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论 穴位埋线可增加UC大鼠紧密连接蛋白Occludin、ZO-1表达,修复肠道黏膜屏障功能,其作用机制可能与抑制p38MAPK/NF-κB通路激活有关。

ALOX15对BGC823细胞铁死亡的作用研究

目的探讨ALOX15对BGC823细胞铁死亡的作用。方法建立过表达ALOX15或干扰ALOX15表达的BGC823细胞株,采用实时荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹(Western Blot)法验证其转染效率。CCK-8法检测过表达ALOX15或干扰ALOX15表达的BGC823细胞的增殖情况,使用试剂盒测定各组细胞中亚铁离子(Fe^(2+))、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)水平,Western Blot法检测各组细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白水平。结果成功构建过表达ALOX15或干扰ALOX15表达的BGC823细胞株。pcDNA3.1-ALOX15组24、48 h细胞增殖率及GSH水平、GPX4表达水平低于pcDNA3.1组、Control组,ROS水平、MDA水平、Fe^(2+)水平、ALOX15 mRNA及蛋白水平高于pcDNA3.1组、Control组,差异有统计学意义(P<0.05);而转染si-ALOX15后,si-ALOX15组BGC823细胞24、48 h细胞增殖率及GSH、GPX4表达水平高于si-NC组,ROS水平、MDA水平、Fe^(2+)水平、ALOX15 mRNA及蛋白水平低于si-NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论上调ALOX15的蛋白表达水平可促进胃癌细胞铁死亡。

小学数学“让学引思”理念的渗透方式

让学引思是由著名哲学家海德格尔提出的一种教学理念,数学是一门研究数字、构造、空间,以及逻辑等概念的学科,教学难度较高,在其中引入让学引思的理念,可以大大提高教学质量.

高阶思维培养目的下的小学数学课堂教学优化

高阶思维是在较高认知水平基础上的认知能力和心智活动,是学生完成复杂任务、解决劣构问题的综合思维能力。这一思维的培养是小学数学教学的重点目标。文章分析了高阶思维的概念和培育现状,探讨了高阶思维培养目的下的小学数学课堂教学优化策略,以供借鉴。

基于Wnt/β-catenin通路研究三物白散对胃癌AGS细胞凋亡的影响

目的研究三物白散对胃癌AGS细胞增殖和凋亡的影响并基于Wnt/β-catenin通路探讨其机制。方法SPF级雄性SD大鼠28只,随机分为对照组及三物白散高、中、低剂量组,每组7只。三物白散高、中、低剂量组分别按0.125、0.0625、0.03125g·kg^(-1)·d^(-1)剂量灌胃,对照组以等剂量生理盐水灌胃。每日灌胃1次,连续7d。末次给药后45min经腹主动脉取含药血清。CCK-8法检测三物白散含药血清对胃癌AGS细胞活性的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测细胞Wnt1、β-catenin、Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3 mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测细胞Wnt1、β-catenin、Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3蛋白的表达。结果与对照组相比,5%、10%、15%、20%高浓度组含药血清可呈浓度—时间依赖性抑制AGS细胞活性。细胞凋亡检测结果显示高浓度组AGS细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01);与对照组相比,三物白散高剂量组Wnt1、β-catenin mRNA的表达水平减少(P<0.01);三物白散高、中、低剂量组Bax、cleaved caspase-3 mRNA表达水平增加(P<0.05),Bcl-2 mR⁃NA表达水平降低(P<0.05)。三物白散高、中、低剂量组Wnt1、β-catenin蛋白的表达水平减少(P<0.01);高、中剂量组Bcl-2蛋白表达水平减少(P<0.01),Bax蛋白表达水平增加(P<0.01);高剂量组cleaved caspase-3蛋白表达水平增加(P<0.01);对照组和低剂量组Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3及中剂量组cleaved caspase-3蛋白表达水平无差异(P>0.05)。结论三物白散含药血清具有抑制胃癌细胞增殖,诱导其凋亡的作用,该作用可能与调控Wnt/β-catenin信号通路有关。