新疆引进湖羊繁育指标调查报告

为掌握新疆引进湖羊的适应情况和养殖现状,本次在新疆生产建设兵团第三师44团的万头湖羊繁育养殖示范基地和第六师102团鑫宝牧业抽样跟踪调查了466只与配母羊的一系列情况,包括引进、发情配种、湖羊产羔等繁育情况。结果显示,本地湖羊的难产率为23.37%、繁殖率为182.66%,单羔、双羔、多羔的存活率分别为85.71%、69.77%、44.77%。通过本次调查表明,本地除了与内地环境的差异以外,主要在饲养管理技术方面有待提高,此外希望本次调查数据为新疆引进内地湖羊的养殖繁育提供了一定的依据和建议。

驴Zfx基因CDS序列克隆及序列分析

本研究旨在克隆驴Zfx基因CDS序列,并对其进行生物信息学分析。根据GenBank中公布的牛Zfx基因mRNA序列(登录号:D84097.1)设计特异性引物,利用RT-PCR技术获取驴Zfx基因CDS序列,并对驴Zfx基因CDS区核苷酸序列和蛋白质结构进行生物信息学分析。结果表明,驴Zfx基因CDS区序列长度为2 403 bp,编码800个氨基酸;驴与马、牛、家犬、白犀牛、马鹿、猫、人、绵羊、黑猩猩的Zfx基因CDS区核苷酸序列同源性分别为99.6%、95.0%、95.3%、97.9%、93.5%、94.9%、95.0%、95.7%和94.9%。对驴及其他9种哺乳动物Zfx基因CDS区的核苷酸序列构建系统进化树,结果显示,驴与马亲缘关系很近,与白犀牛的亲缘关系次之;同时又与聚在一类的家犬、猫亲缘关系较近,而与绵羊、牛的亲缘关系稍远。Zfx蛋白理论等电点(pI)为5.19,不稳定系数为42.94,消光系数为35 810,属于不稳定的亲水性蛋白,含有60个磷酸化位点,无信号肽及跨膜结构,属于非分泌蛋白。Zfx蛋白α-螺旋、延伸链和无规则卷曲分别为23.12%、20.25%和56.63%,三级结构主要为α-螺旋和无规则卷曲。本试验成功克隆获得驴Zfx基因CDS序列,为后期深入研究该基因及其编码蛋白的结构功能提供依据。

犊牛腹泻大肠杆菌的分离及鉴定

本实验从犊牛腹泻粪便中分离出来的疑似菌株经过分离培养、染色、镜检、多重PCR和小鼠致病性试验等方法分离出致病大肠杆菌,以确定牛群的发病原因,为减少疫病的发生提出恰当的防治措施,并给予牛场合理的用药建议。

家兔Zfx基因shRNA干扰载体构建及验证

研究主要是为了构建出针对家兔Zfx基因的shRNA重组载体及效果验证。根据家兔Zfx基因mRNA序列特征,设计出3条shRNA片段,再与线性化的pLL 3.7载体进行连接重组,最后经过qRT-PCR检测Zfx基因mRNA表达量筛选出有效重组表达载体并通过体内试验进行效果验证。结果表明:试验组shRNA-c和shRNA-f干扰效率分别为74%和67%,与空白对照组相比差异极显著(P<0.01);试验组shRNA-e干扰效果为17%,与空白对照组相比差异不显著(P>0.05)。用shRNA-c和shRNA-f进行体内试验,结果显示,两试验组雄性率分别为44.92%(P>0.05)和33.16%(P<0.01)。本试验成功构建针对家兔Zfx基因的重组载体,体内试验显示子一代出现性别偏移,说明Zfx基因对动物的性别决定有一定作用,关于导致体内验证出现反转的原因仍需进一步验证。

外泌体介导对湖羊性别控制的影响

目的为了探索外泌体作为载体进行性别控制的可行性。方法选取3只湖羊公羊作为试验动物,1只公羊作为对照组,另外2只用外泌体作为siRNA的载体,通过自然交配的方式,观察母羊后代性别比例是否发生改变。结果试验组的后代性别比例均发生明显改变(P<0.05),雌羔率分别为66.67%、66.10%,且后代初生重没有明显变化(P>0.05)。结论外泌体作为干扰载体可行有效,在实际生产中有一定的应用前景,为后续进一步研究提供了思路。