目的:探讨严重脓毒症血清损伤人肺血管内皮细胞(PMVECs)的机制。方法:随机将离体培养PMVECs分为3组:正常培养组(N组)加入10%胎牛血清、健康组(H组)加入10%健康人血清、患者血清组(S组)加入10%严重脓毒症患者血清,分别于刺激0、1、2、4、...目的:探讨严重脓毒症血清损伤人肺血管内皮细胞(PMVECs)的机制。方法:随机将离体培养PMVECs分为3组:正常培养组(N组)加入10%胎牛血清、健康组(H组)加入10%健康人血清、患者血清组(S组)加入10%严重脓毒症患者血清,分别于刺激0、1、2、4、6 h MTT比色法检测PMVECs增殖活性,测定吸光度(OD);免疫组化观察NF-κB表达,测定平均光密度(AOD);透射电镜观察细胞超微结构;比较不同时相3组PMVECs上述指标变化。结果:各组不同时间点PMVECs的OD值有差异(P<0.01),OD值的变化趋势有差异(P<0.01)。与N组及H组相比,S组1 h OD值明显降低(P<0.01),随患者血清刺激时间延长,S组OD值维持在较低水平。NF-κB免疫组化检测示S组1 hAOD值达高峰,后逐渐下降(0.523±0.012,0.498±0.009,0.444±0.030)。透射电镜示N组与H组电镜下未见明显亚显微结构变化,S组1 h可见PMVECs微绒毛减少,内质网扩张,WPBs小体减少,6 h可见PMVECs胞膜断裂,微绒毛消失,线粒体呈空泡性变,核周隙增宽,胞间可见囊泡状改变。结论:严重脓毒症患者血清可损伤离体PMVECs,NF-κB活化可能是严重脓毒症致急性肺损伤的一个重要环节。展开更多
文摘目的:探讨严重脓毒症血清损伤人肺血管内皮细胞(PMVECs)的机制。方法:随机将离体培养PMVECs分为3组:正常培养组(N组)加入10%胎牛血清、健康组(H组)加入10%健康人血清、患者血清组(S组)加入10%严重脓毒症患者血清,分别于刺激0、1、2、4、6 h MTT比色法检测PMVECs增殖活性,测定吸光度(OD);免疫组化观察NF-κB表达,测定平均光密度(AOD);透射电镜观察细胞超微结构;比较不同时相3组PMVECs上述指标变化。结果:各组不同时间点PMVECs的OD值有差异(P<0.01),OD值的变化趋势有差异(P<0.01)。与N组及H组相比,S组1 h OD值明显降低(P<0.01),随患者血清刺激时间延长,S组OD值维持在较低水平。NF-κB免疫组化检测示S组1 hAOD值达高峰,后逐渐下降(0.523±0.012,0.498±0.009,0.444±0.030)。透射电镜示N组与H组电镜下未见明显亚显微结构变化,S组1 h可见PMVECs微绒毛减少,内质网扩张,WPBs小体减少,6 h可见PMVECs胞膜断裂,微绒毛消失,线粒体呈空泡性变,核周隙增宽,胞间可见囊泡状改变。结论:严重脓毒症患者血清可损伤离体PMVECs,NF-κB活化可能是严重脓毒症致急性肺损伤的一个重要环节。