过表达过氧化物酶体增殖物激活受体γ基因对小鼠缺氧性肾损伤的影响

目的探讨过表达过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因对小鼠缺氧性肾损伤的干预作用及可能机制。方法将15只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、缺氧组和过表达组,每组5只。给予过表达组小鼠注射过表达PPARγ基因的腺相关病毒,对照组和缺氧组小鼠则注射等量生理盐水。3周后将缺氧组和过表达组小鼠放入低压低氧动物实验舱进行缺氧干预7 d。干预结束后取各组小鼠肾组织,光镜下观察肾组织病理学变化,并采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测各组小鼠肾组织中PPARγ、混合谱系蛋白激酶结构域样蛋白(MLKL)、转化生长因子β(TGF-β)的mRNA和蛋白相对表达量。结果与对照组比较,缺氧组肾组织中部分肾小管细胞肿胀,管腔狭窄堵塞,PPARγ的mRNA和蛋白相对表达量均明显降低,MLKL和TGF-β的mRNA和蛋白相对表达量均明显增高(均P<0.05)。与缺氧组比较,过表达组肾组织中肾小管病变相对轻微,PPARγ的mRNA和蛋白相对表达量均明显增高,MLKL和TGF-β的mRNA和蛋白相对表达量均明显降低(均P<0.05)。结论过表达PPARγ基因可减轻小鼠缺氧性肾损伤,其机制可能与减少肾脏细胞坏死性凋亡有关。

PPARγ基因过表达/沉默对缺氧诱导的肾小管上皮细胞坏死性凋亡标志物表达调控作用

目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因过表达/沉默对缺氧诱导肾小管上皮细胞(RTEC)坏死性凋亡标志物表达的调控作用。方法将RTEC细胞随机分为对照组、缺氧损伤组、过表达组和沉默组,过表达组细胞转染过表达PPAYγ基因的外源性LV-Pparg病毒,沉默组细胞转染沉默PPAYγ基因的内源性LVPPARg-RNAi病毒。待细胞再次生长融合至70%左右时,正常对照组不做任何处理,放置于培养箱中培养;缺氧损伤组、过表达组以及沉默组放置于含95%N_(2)和5%CO_(2)混合气体缺氧小室中,密封缺氧培养48 h。采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中PPARγ、受体交互作用蛋白1(RIP1)、RIP3、转化生长因子-β(TGF-β)mRNA,采用Westernblotting法检测各组细胞中PPARγ、RIP1、RIP3、TGF-β蛋白。结果与对照组相比,缺氧损伤组、过表达组、沉默组细胞中PPARγ的mRNA及蛋白相对表达量均显著降低(P均<0.05),RIP1、RIP3、TGF-β的mRNA及蛋白相对表达量均显著升高(P均<0.05)。与缺氧损伤组相比,过表达组细胞中PPARγ的mRNA及蛋白相对表达量均显著升高(P均<0.05),RIP1、RIP3、TGF-β的mRNA及蛋白相对表达量均显著降低(P均<0.05);沉默组细胞中PPARγ的mRNA及蛋白相对表达量均显著降低(P均<0.05),RIP1、RIP3、TGF-β的mRNA及蛋白相对表达量均显著升高(P均<0.05)。结论在缺氧诱导的RTEC坏死性凋亡中,PPARγ基因表达降低;过表达PPARγ基因对缺氧诱导的RTEC坏死性凋亡有抑制作用,而沉默PPARγ基因则有促进作用。

白藜芦醇治疗肾脏疾病的分子机制研究进展

肾脏疾病是一类影响人体健康的常见病。白藜芦醇(Res)是从植物中提取的天然多酚类化合物,具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、抗细胞凋亡等多种药理学活性,具有治疗诸多疾病的潜力和靶点。目前已发现Res在糖尿病肾病、肾结石、急性肾损伤等肾脏疾病中均起到缓解作用,其机制为抑制氧化应激反应、细胞凋亡,调节Shh、Nrf2/ARE、NF-κB、mTOR、PI3K/Akt信号通路,激活细胞焦亡等,从而对肾脏起到保护作用。

过氧化物酶体增殖物激活受体γ在急性缺氧肾损伤大鼠肾脏组织中的表达及其意义

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在急性缺氧肾损伤大鼠肾脏组织中的表达及其意义。方法:将24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、PPARγ激动剂组、PPARγ抑制剂组和缺氧损伤组,每组6只。通过腹腔内注射给予PPARγ激动剂组罗格列酮(10 mg/kg·d^(-1)),PPARγ抑制剂组GW9662(1 mg/kg·d^(-1)),每天1次,共3 d。正常对照组不做任何处理,其余3组放入模拟高度7500 m低压低氧舱内,7 h后处死大鼠,取左肾组织进行病理学检查,分别采用实时荧光定量PCR(RTqPCR)和Western blotting检测大鼠肾组织PPARγ、超氧化物歧化酶(SOD)、白介素-1β(IL-1β)、内皮素(ET-1)的mRNA及其蛋白表达。结果:与正常对照组相比,PPARγ激动剂组、PPARγ抑制剂组和缺氧损伤组的大鼠均出现肾小管上皮细胞(RTEC)肿胀、脱落,线粒体肿胀;与缺氧损伤组相比,PPARγ激动剂组大鼠RTEC肿胀减轻,PPARγ抑制剂组大鼠RTEC线粒体嵴减少。与正常对照组相比,缺氧损伤组大鼠肾组织PPARγ和SOD的mRNA及其蛋白表达量均降低(均P<0.05);IL-1β和ET-1的mRNA及其蛋白表达量均升高(均P<0.05)。与缺氧损伤组相比,PPARγ激动剂组大鼠肾组织PPARγ和SOD的mRNA及其蛋白表达量均升高(均P<0.05),IL-1β和ET-1的mRNA及其蛋白表达量均降低(均P<0.05);PPARγ抑制剂组大鼠肾组织PPARγ和SOD的mRNA及其蛋白表达量均降低(均P<0.05),IL-1β和ET-1的mRNA及其蛋白表达量均升高(均P<0.05)。结论:在急性缺氧肾损伤大鼠中,肾脏组织PPARγ的表达降低并参与了肾损伤,PPARγ激动剂罗格列酮可减轻大鼠缺氧性肾损伤,而PPARγ抑制剂GW9662则加重大鼠缺氧性肾损伤。