基于网络药理学探讨右美托咪定治疗新型冠状病毒肺炎的作用机制

目的:探究右美托咪定治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的相关靶点及作用机制。方法:采用CNKI、PUBMED等数据库检索右美托咪定的作用靶点,采用GeneCards等数据库,检索COVID-19相关靶点,取交集靶点作为共同靶点;采用Cytoscape3.9.1对共同靶点绘制药物一靶点网络图。采用STRING11.5数据库绘制共同靶点相互作用网络图,并导入Cytoscape3.9.1分析获得关键靶点;采用DAVID数据库对关键靶点进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路和基因本体论(Gene Ontology,GO)富集分析。结果:获得右美托咪定主相关靶点192个,与COVID-19相关靶点7080个,取疾病靶点和药物靶点交集,获得31个右美托咪定治疗COVID-19靶点,分析获得19个关键靶点,包括Janus激酶2(JAK2)丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)CC型修饰趋化因子配体2(CCL2)等。KEGG和GO富集分析表明右美托咪定治疗COVID-19涉及的信号通路主要为癌症途径、TNF、IL-17等,涉及的生物过程主要包括信号传导、基因表达的正向调节、对RNA聚合酶Ⅱ启动子的转录正向调节等,主要涉及的细胞成分为细胞质、细胞液、浆膜等;主要涉及的分子功能包括相同的蛋白质结合、蛋白激酶活性、蛋白结合等。结论:右美托咪定治疗COVID-19主要通过与多靶点结合,作用于多条关键通路,发挥抑制细胞炎症因子、调节免疫功能、增强抗病毒能力等作用。

血必净注射液通过PTEN/PI3K/Akt/mTOR信号通路对大鼠肺缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨血必净注射液对肺缺血再灌注损伤的保护作用及其相关机制。方法:选择18只健康成年雄性大鼠,随机分为正常对照组(Sham组)、肺缺血再灌注组(LIR组)、血必净注射液组(XBJ组),采用开胸夹闭左肺门构建肺缺血再灌注损伤大鼠模型,苏木素—伊红染色观察各组大鼠肺组织病理学改变,检测各组大鼠肺组织湿/干重比(W/D)及肺组织炎症因子IL-1β、TNF-α水平,Western Blot检测各组肺组织PTEN、PI3K、Akt、mTOR、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、p62蛋白表达,qRT-PCR检测各组肺组织PTEN、PI3K、Akt、mTOR mRNA表达。结果:血必净注射液可显著减轻肺缺血再灌注大鼠肺组织损伤,降低缺血再灌注大鼠肺组织W/D及IL-1β、TNF-α含量(P<0.05)。与Sham组相比,LIR组、XBJ组PTEN、PI3K、Akt、mTOR、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、p62表达均升高(P<0.05);与LIR组相比,XBJ组PTEN、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、p62表达降低(P<0.05),PI3K、Akt、mTOR表达升高(P<0.05)。与Sham组相比,LIR组、XBJ组PTEN、PI3K、Akt、mTOR mRNA表达升高(P<0.05);与LIR组相比,XBJ组PTEN mRNA表达降低(P<0.05),PI3K、Akt、mTOR mRNA表达升高(P<0.05)。结论:血必净注射液可能通过抑制PTEN,激活PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制肺缺血再灌注损伤自噬水平,从而改善肺缺血再灌注损伤,达到保护肺组织的作用。

右美托咪定预处理对脓毒症相关性脑病大鼠中枢及外周炎性反应的保护作用

目的观察右美托咪啶预处理对脓毒症相关性脑病大鼠中枢及外周炎性反应的保护作用。方法SPF级雌性SD大鼠40只,体质量250-300 g,按随机数字法分4组(n=10):对照组(NC组)、LPS组、DEX干预组(DEX组)以及二甲基亚砜组(DMSO组)。NC组腹腔注射生理盐水1 ml,LPS组腹腔注射10 mg/kg LPS(稀释到1 ml);DEX组在LPS组基础上,注射LPS前30 min腹腔注射100μg/kg右美托咪啶(2%DMSO稀释到1 ml);DMSO组单纯腹腔注射2%DMSO 1 ml,腹腔注射给药6 h后,10%水合氯醛0.4 ml/100 g麻醉成功后抽腹主动脉血和取海马组织。Western blot检测海马组织核转录因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、IκB、IL-1、TNF-α、iNOS、COX-2表达;ELISA检测外周血TNF-α、IL-1、IL-6、IL-10的浓度;RT-qPCR检测海马组织NF-κB mRNA表达。结果与NC组比较,LPS组外周血清TNF-α、IL-1、IL-6和IL-10表达显著上升(P<0.05);与LPS组比较,DEX组TNF-α、IL-1、IL-6和IL-10表达显著下降(P<0.05)。与NC组比较,LPS组海马组织的TNF-α、IL-1、iNOS、COX-2及NF-κB mRNA表达显著上升(P<0.05),IκB表达显著下降(P<0.05);与LPS组比较,DEX组TNF-α、IL-1、iNOS、COX-2及NF-κB mRNA表达显著下降(P<0.05),IκB表达显著上升(P<0.05)。结论右美托咪啶预处理可改善LPS注射大鼠中枢及外周炎性改变,可能是通过NF-κB/IκB通路调节。