黑木耳富锶菌株的筛选及锶在胞内物质中的分布

为开发新的黑木耳[Auricularia auricula(L.)Underw]产品,发挥锶元素在医学和保健领域的潜在应用价值,本研究筛选耐锶、富锶的黑木耳菌株,初步研究富锶黑木耳中锶的分布规律。以5个不同品种的黑木耳菌株(新科、神农A8、秦单4#、LS-256、耳91)为试验材料,通过浓度梯度锶处理,筛选出耐锶、高锶富集的品种并采用不同的浸提液提取黑木耳菌丝和子实体中的多糖、蛋白质、核酸和无机物质,用电感耦合等离子体原子发射光谱仪(ICP-AES)测定各组分中的锶含量。通过研究不同黑木耳对锶的耐受力和锶富集能力,筛选出耐锶且富集锶的黑木耳品种,分析锶在木耳中的分布情况。结果表明,在原始培养基中,黑木耳菌丝洁白、浓密、分布均匀;在含锶培养基中,黑木耳菌株(新科、秦单4#、LS-256和耳91)的菌丝卷曲、外围菌丝稀疏,神农A8在锶处理下的菌丝形态变化不明显。5株黑木耳在最高锶浓度(2000 mg·L^(-1))处理下的菌丝生长速率排序为神农A8(0.62 cm·d^(-1))>LS-256(0.60 cm·d^(-1))>秦单4#(0.58 cm·d^(-1))>新科(0.56 cm·d^(-1))>耳91(0.38 cm·d^(-1))。神农A8、LS-256和秦单4#菌株在含400 mg·L^(-1)锶的液体摇瓶中培养10 d后的菌丝生物量分别为6.95、6.30、3.65 g·L^(-1),对锶的吸收率分别为85%、84%、88%。在400 mg·L^(-1)锶处理下,神农A8菌丝体对锶的总吸收量为572.70 mg·kg^(-1),其中与多糖、蛋白质、核酸、无机物和其他有机物结合的锶含量分别占总锶含量的50.6%、0.9%、3.9%、0.3%和44.3%;在400 mg·kg^(-1)锶处理下,栽培神农A8子实体,发现锶的添加使得神农A8的产量从33.975 g/袋提高到42.601 g/袋,并测得子实体对锶的吸收量为226.29 mg·kg^(-1),与多糖、蛋白质、核酸、无机物和其他有机物结合的锶含量分别占总锶含量的16.4%、43.1%、1.1%、5.2%和34.1%。本研究结果为后期富锶黑木耳的产业发展奠定了基础。

姬松茸原生质体制备及再生条件优化

以姬松茸JS01为试材,通过单因素试验和正交实验,利用SPSS 22.0软件进行分析,对姬松茸原生质体的制备及再生条件进行优化,以提高姬松茸原生质体产量和再生率。首次通过在再生培养基中添加细胞壁前体物质及营养因子,进一步提高姬松茸原生质体的再生率。结果表明:原生质体最佳制备条件为菌龄7d,以0.6mol·L^-1 KCl作渗透压稳定剂,溶壁酶浓度1.5%,酶解温度30℃,酶解时间4.0h,pH 6.0,在该条件下原生质体产量高达1.97×107个·mL^-1;菌龄6d,以0.6mol·L^-1 MgSO4作渗透压稳定剂,溶壁酶浓度2.0%,酶解温度30℃,酶解时间3.0h,pH 6.5,再生培养基为GM时,原生质体的再生率最高,为1.12%。再生培养基中添加纤维二糖和维生素B1后,再生率为1.17%,较优化结果提高了4.46%。该研究为姬松茸在菌种提纯复壮、原生质体诱变、原生质体融合育种、原生质体基因组重排等遗传学研究提供参考依据。