血清miR-146a-3p、miR-155-5p表达水平在类风湿关节炎诊疗中的临床应用研究

目的探讨血清miR-146a-3p、miR-155-5p表达水平在类风湿关节炎(RA)诊疗中的应用价值。方法选用RA确诊病例46例(RA组,又分为高度活动组24例、低度活动组22例),健康对照20例作为对照组,采用qPCR SYBR GREENⅠ嵌合荧光染料法,以U6为内参,检测RA组和对照组血清miR-146a-3p、miR-125a-3p表达水平,分析其与RA诊断和疾病活动度的相关性。结果 RA组miR-146a-3p表达水平[0.015(0.005,0.055)]与对照组[0.001(0.001,0.002)]比较,差异具有统计学意义(P=0.001);RA组血清miR-155-5表达[0.039(0.020,0.079)]与对照组水平[0.008(0.005,0.016)]比较,差异具有统计学意义(P=0.001)。RA高度活动组血清miR-146a-3p表达[0.055(0.028,0.138)]与低度活动组水平[0.006(0.003,0.007)]比较,差异具有统计学意义(P=0.001);miR-155-5p表达[0.070(0.055,0.145)]与低度活动组水平[0.024(0.014,0.033)]比较,差异具有统计学意义(P=0.001)。结论 RA患者血清miR-146a-3p、miR-155-5p表达水平明显高于对照组,RA高度活动组血清miR-146a-3p、miR-155-5p表达水平高于低度活动组患者,可认为检测两种miRNA血清表达水平可作为RA诊断和活动度观察指标。

不同稀释及洗板方式对竞争法检测乙肝核心抗体结果的影响

目的采用仪器法和手工法进行人机结合及人机比对,探讨仪器稀释方法与手工稀释方法、仪器洗板与手工洗拍板对酶联免疫吸附实验竞争法检测乙型肝炎病毒核心抗体结果的影响。方法采用不同方式对同一批样本进行检测,分析样本稀释和洗拍板环节不同而其他实验条件一致的情况下,单一因素对实验结果的影响。结果仪器稀释与手工稀释方法检测结果差异有统计学意义(P<0.05);自动洗板与手工洗拍板,检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论洗板环节及不同手工稀释方法对检测结果无影响,仪器自动稀释与手工稀释检测结果存在明显差异。

类风湿关节炎实验室诊断的研究进展

类风湿关节炎（RA）是一个累积周围关节为主,以慢性破坏性多关节炎为主要表现的全身性自身免疫性疾病。该病起病隐匿,多数病例进展缓慢,少数呈急剧发病,病程反复,属于临床难治性疾病。早期的RA可无典型症状或仅呈现出单一临床症状,用现行的诊疗标准和技术手段,存在诊断困难、漏诊及误诊的问题[1]。流行病学调查显示,该病发病呈现出全球性趋势,欧美白人患病率约为1.0%,我国约为0.4%。

罗氏Cobas e602电化学发光分析仪分析性能验证

目的对罗氏Cobas e602电化学发光分析仪检测项目糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原15-3(CA15-3)、人绒毛膜促性腺激素(hCG)、促甲状腺激素(TSH))的精密度、正确度、线性范围及参考区间性能指标进行验证,确认电化学发光检测系统性能是否达到要求,以保证检测系统性能符合质量目标。方法根据美国临床实验室标准化研究所(NCCLS)文件(EP5-A2、EP15-A2、EP6-A2)及中华人民共和国卫生行业标准《WS/T 402-2012临床实验室检验项目参考区间的制定》的相关文件,对检测系统进行性能验证。结果罗氏Cobas e602电化学发光分析仪精密度、正确度、线性范围及参考区间性能指标均验证通过。结论罗氏Cobas e602电化学发光分析仪检测性能符合要求,能提供准确可靠的检测结果满足临床需求。

系统性红斑狼疮患者自身抗体与补体检测结果分析

目的分析自身抗体与补体联合检测结果,探讨各检测指标在系统性红斑狼疮(SLE)诊断及治疗中的临床应用价值。方法收集287例临床确诊SLE患者列为SLE组,另选取50例健康对照者为对照组,检测抗核抗体(ANA)和抗dsDNA抗体、抗核抗体谱(ANAS)及补体C3、C4并对结果进行统计分析。结果 SLE组ANA、抗dsDNA抗体、ANAS、补体C3、C4各项检测指标阳性率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);SLE组血清补体C3、C4检测结果低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);除抗Sm抗体外,各项指标联合检测灵敏度及特异度均高于单项检测指标。结论 ANA、抗dsDNA抗体、ANAS及补体C3、C4联合检测可提高SLE的检测阳性率,对SLE诊断、判断病情变化具有重要价值。

4项肾小球滤过功能检测指标在肾功能不全中的临床应用分析

目的通过对4项肾小球滤过功能生化检测指标进行统计分析,探讨其测定在肾功能不全中的临床应用。方法收集同时检测内生肌酐清除率(Ccr)、血清胱抑素C(CysC)、血肌酐(Scr)、尿素(BUN)4项肾小球滤过功能检测指标病例763人,选取同时期体检中心健康体检者43例作为对照组,根据肾功能不全分期标准进行分组统计分析。结果各项检测指标在肾功能不全代偿期组、肾功能不全失代偿期组、肾衰竭组、尿毒症期组随着肾功能损害程度增加浓度明显升高。肾功能不全代偿期组血清CysC与对照组相比较,差异有统计学意义(P<0.01),而Scr、BUN与对照组相比较则差异无统计学意义(P>0.05);其余组间各项检测指标相比较,检测结果差异均有统计学意义(P<0.01),且结果随着肾小球滤过功能的下降,浓度明显升高。结论血清CysC作为反映肾小球滤过功能的敏感指标,在肾小球损害早期优于Scr和BUN,CysC检测对肾小球损害程度评估具有重要临床价值。

消银合剂治疗血热证银屑病疗效及血清干扰素-γ、白介素-10检测

目的观察消银合剂对寻常性银屑病进行期血热证的临床疗效,并探讨其对银屑病Th1/Th2漂移的影响。方法选择寻常性银屑病进行期血热证患者60例,随机分为治疗组30例和对照组30例。治疗组给予消银合剂,对照组给予复方青黛胶囊,疗程8周。观察治疗前后PASI评分的变化,并测定30例治疗组患者治疗前后及20例正常对照者血清干扰素(INF)-γ、白介素(IL)-10水平。结果①治疗8周后,两组PASI积分均明显下降,治疗组PASI积分明显低于对照组(P<0.05)。②治疗组有效率96.66%,优于对照组86.67%(P<0.05)。③与正常对照相比,患者组INF-γ水平及INF-γ/IL-10比值明显升高,IL-10水平明显降低(P<0.001)。治疗前PASI评分与血清INF-γ、IL-10水平均呈正相关(r=0.7,P<0.001;r=0.43,P<0.02)。治疗8周后,患者组血清INF-γ、IL-10水平,INF-γ/IL-10与健康对照组相比,无明显差异(P>0.05)。结论消银合剂可能通过调节患者异常的INF-γ、IL-10水平而治疗银屑病。

慢性鼻-鼻窦炎患者细胞免疫功能与规范化鼻内镜手术疗效分析

目的通过分析慢性鼻-鼻窦炎(CRS)患者术前外周血免疫细胞水平与术后临床疗效之间的关系,探讨细胞免疫功能对CRS患者术后疗效的影响。方法选取昆明市第一人民医院耳鼻喉科2016～2017年收治的50例CRS患者作为研究对象,分为慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)组和慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)组;以同期40例健康人群作为对照组,分析比较对照组和研究组术前外周血免疫细胞测定资料。将CRS患者根据术后临床疗效分为预后良好组和预后差组,比较2组间外周血免疫细胞水平。结果健康对照组、CRSw NP组和CRSs NP组的CD4^+T细胞分别为35.01±7.16、43.44±4.99和41.69±6.57,CD8^+T细胞分别为27.50±0.85、21.32±5.36和20.08±4.57,CD4^+/CD8^+比值分别为1.19(0.96,1.66)、2.07(1.63,2.34)和2.14(1.69,2.64),健康对照组与CRSw NP组、CRSs NP组间差异均有统计学意义(P值均<0.05),CRSw NP组与CRSs NP组的细胞免疫功能差异无统计学意义(P>0.05)。预后良好组与预后差组间CD3^+淋巴细胞分别为66.19±7.60和56.78±10.72,CD4^+T细胞分别为42.33±6.05和30.81±3.75,CD4^+/CD8^+比值分别为2.22±0.82和1.39±0.43,NK细胞分别为14.74±8.50和30.2±10.34,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论 CRS患者存在免疫失衡现象,即CD4^+T细胞、CD4^+/CD8^+比值高于健康人群,CD8^+T细胞低于健康人群。采用规范化鼻内镜手术治疗,不同细胞免疫功能状态CRS患者术后康复情况不同,CD3^+淋巴细胞、CD4^+T细胞、CD4^+/CD8^+比值上升者术后疗效优于下降者。

恶性肿瘤患者免疫功能与抗核抗体的关系研究

目的探讨恶性肿瘤患者免疫功能与抗核抗体的关系。方法采集2010―2016年云南省中医医院190例恶性肿瘤患者作为恶性肿瘤组,选择同期40例体检健康者作为对照组。收集2组研究对象的血清抗核抗体(ANA)水平;检测恶性肿瘤组患者外周血淋巴细胞亚群水平,并按ANA水平分为ANA阳性组和阴性组,比较2组患者淋巴细胞亚群水平。结果 ANA滴度≥1∶100作为阳性判断标准时,190例恶性肿瘤组患者ANA阳性率为34.2%,ANA滴度>1∶320时,阳性率为24.2%。对照组ANA阳性率为5.0%。2种情况下,2组研究对象的ANA阳性率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。恶性肿瘤组患者ANA阴性组CD4^+/CD8^+为1.79(1.16,2.11),阳性组CD4^+/CD8^+为1.25(1.02,1.56),差异有统计学意义(P<0.05)。结论恶性肿瘤患者体内存在以ANA升高为表现的自身免疫现象,ANA阳性患者免疫功能处于抑制状态,自身免疫反应导致阳性组和阴性组细胞免疫功能的差异。

肺胀阳虚水泛证水通道蛋白关联性研究

目的寻找肺胀阳虚水泛证的关联性因素,探讨肺胀阳虚水泛证的病理机制。方法对符合诊断标准的临床收治肺胀阳虚水泛证、肺肾气虚证、痰热郁肺证患者分别采用双抗体夹心酶联免疫法检测尿水通道蛋白-2(aquaporin-2,AQP2)、放射免疫法检测血浆精氨酸加压素(arginine vasopressin,AVP)、酶联免疫吸附法检测血浆脑钠素(brain natriuretic peptide,BNP)、钠钾三磷酸腺苷酶(Na+-K+-ATPase)水平,对阳虚水泛证、肺肾气虚证、痰热郁肺证三证之间相同项目指标分别采用秩和检验法比较相互之间的差异性,用相关分析法比较证型内指标之间的相关性。结果肺胀阳虚水泛证与痰热郁肺证的BNP水平有差异性(P<0.05),阳虚水泛证、肺肾气虚证、痰热郁肺证患者尿AQP2以及血浆钠钾ATP酶、AVP之间无统计学差异(P>0.05),三组钠钾ATP酶与BNP之间有正相关性(P<0.05),阳虚水泛证组及肺肾气虚证组的钠钾ATP酶与AVP之间有显著正相关性(P<0.01);BNP与AVP之间有显著正相关性(P<0.01),阳虚水泛证AQP2与AVP之间有显著正相关性(P<0.01)。结论 BNP可能是肺胀阳虚水泛证的关键因素之一,需住院的肺胀阳虚水泛证、肺肾气虚证、痰热郁肺证患者均有阳虚因素的存在,尿AQP2以及血浆钠钾ATP酶、AVP可能是肺胀阳虚水泛证的内在因素之一。

昆明儿童呼吸道感染9种病原体IgM抗体检测结果分析

目的分析2016年1—12月1 136例门诊及住院拟诊呼吸道感染的4月龄～12岁患者,了解昆明地区儿童呼吸道感染患者中9种常见病原体(嗜肺军团菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、Q热立克次体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒)的感染情况。方法采用间接免疫荧光法,检测患儿的血清中9种病原体。通过SPSS统计软件比较分析阳性检测率在不同年龄、季节、性别患儿阳性病例数及阳性率的差异。结果1 136例儿童呼吸道感染患者中,IgM抗体检测阳性534例,阳性率为47%。9种病原体IgM抗体阳性率,MP阳性率最高(40.8%),COX最低(0.0%)。单一病原体感染487例,阳性率为42.9%,混合病原体感染47例,阳性率为4.1%。统计分析结果显示,各年龄组(婴儿组、幼儿组、学龄前期组、学龄期组),学龄期组IgM阳性率最高(54.1%),幼儿组最低(39.8%),组间差异有统计学意义(X^2=18.729、P<0.05)。春、夏、秋、冬IgM阳性率分别是44.9%、53.5%、43.8%和45.5%,组间差异无统计学意义(X^2=6.657、P=0.084,P>0.05)。患者男女性别IgM阳性率分别是37.8%和58.8%,组间差异有统计学意义(X^2=49.562、P<0.05)。结论昆明地区儿童呼吸道感染以MP为主,学龄前期及学龄期儿童感染率较高,无季节差异,女性患儿多于男性。

类风湿性关节炎合并核抗体阳性的临床意义

目的了解类风湿性关节炎(RA)合并核抗体(抗-ANA)阳性的荧光模式和靶抗原分布情况,以及抗-ANA在RA中的影响。方法收集2014-2015年该院风湿科860例RA患者的类风湿因子(RF)、环瓜氨酸抗体(抗-CCP)及抗-ANA等资料,以抗-ANA情况分为抗-ANA阳性组与抗-ANA阴性组,分析2组RA患者RF、抗-CCP血清水平的差异;统计RA合并抗-ANA阳性的荧光模式和靶抗原、抗体分布情况。结果 860例RA合并抗-ANA阳性率37.6%,RA合并抗-ANA阳性的荧光模式以核颗粒型,抗-SSA阳性为主(21.7%);抗-ANA阳性组与抗-ANA阴性组RF和抗-CCP血清水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 RA合并抗-ANA阳性可表现出不同的荧光模式和靶抗原,以核颗粒型,抗-SSA阳性为主。抗-ANA阳性组与抗-ANA阴性组RA患者在关节炎性反应严重程度以及骨质破坏程度方面存在差异,抗-ANA阳性对RA疾病的进展具有一定的促进作用。

2580例O型孕妇IgG抗A抗B血型抗体效价检测分析

目的探讨孕妇血型抗体效价异常在孕妇中所占比例及与新生儿溶血病之间的关系,为预防ABO新生儿溶血病的发生提供依据.方法用微柱凝胶卡式法(MGT)进行IgG抗A或抗B的ABO血型抗体效价检测.结果 2 580例孕妇中,血清效价≥1:64者1 944例,异常检出率为75.35%.结论母亲孕期抗体效价与新生儿ABO溶血病的发病率呈正相关,且随着IgG效价的增高,ABO溶血病的发病率增加.因此孕期定期检测IgG抗体效价对诊断HDN有一定的预见性,通过孕期进行早期监测和治疗,有效控制抗体效价,对于降低HDN的发病率具有重要的意义.

糖尿病患者糖化血红蛋白与血清CA199水平相关分析

目的探讨糖尿病患者糖化血红蛋白（HbAlc）与血清糖链抗原199（CA199）水平变化关系。方法选择100例健康体检者作对照,收集2010∽2013年653例糖尿病患者（糖尿病组）的HbAlc与CA199资料,以HbAlc水平将患者分为3组（良好组、尚可组、控制差组）。分析各组间CA199水平差异情况。选出部分CA199阳性的糖尿病患者：良好组9例、尚可组12例、控制差组15例,追踪观察2010∽2013年的CA199变化情况。结果对照组与糖尿病组CA199水平差异有统计学意义（P〈0.05）;HbAlc控制差组与良好组、尚可组CA199阳性率比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;HbAlc控制差组CA199水平2013年与2010年比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论糖尿病患者血清CA199水平高于健康人群;HbAlc控制差组血清CAl99水平明显高于血糖控制尚可组及良好组;控制差组患者的HbAlc水平随病程进展,血清CAl99水平明显上升。

CA125在女性健康体检中的临床应用

目的分析云南省中医院女职工健康体检中的CA125检测情况,探讨CA125在女性健康体检中的临床应用意义。方法 2011年第1次检测923例女职工血清CA125浓度,并对CA125阳性者进行追踪随访,2012年再次检测CA125,收集资料进行统计分析。结果绝经前妇女和绝经后妇女的CA125阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。导致CA125升高的原因除生理性因素外,以女性泌尿生殖系统良性疾病为主。病理性CA125升高者,经积极治疗后,大部分患者的CA125浓度明显下降。结论在女性健康体检中,导致CA125升高的疾病以女性泌尿生殖系统良性疾病为主,应正确对待CA125作为肿瘤标志物在健康体检中的应用。

检验科中医住院医师规范化培训的带教体会

住院医师规范化培训是培养合格临床医师的必由之路。文章根据中医住院医师规范化培训所需达到的目的和要求,从培训大纲及方案的制定、带教教师的选择和培训、规培内容的完善等方面总结三级甲等中医医院检验科进行中医住院医师规范化培训的经验,探讨检验科中医住院医师规范化培训的方法。合理的带教方法使得中医规范化培训学员在检验科轮训效果明显,能够更好地培养临床思维、理论联系实际、增强沟通能力,做到中西医融会贯通。通过分享在中医住院医师规范化培训中的几点体会,提出问题和改进措施,更好完成中医住院医师在检验科的规培带教工作。

检验科中医类学生的临床带教工作

文章首先阐述了临床带教工作中的主要问题,然后提出了临床带教工作的优化措施,包括认真做好岗前教育;规范操作,注重学生的实验操作技能培养;勤于为学生分析检验结果;选择合格带教教师,不断提高教师教学水平;避免机械性用工式带教。

傣药咪多领通过Wnt/β-catenin/c-myc信号通路对增生性瘢痕表皮干细胞干性的作用机制

目的探讨傣药咪多领(云南琵琶甲)通过Wnt/β-catenin/c-myc信号通路对增生性瘢痕表皮干细胞干性的影响。方法构建增生性瘢痕动物模型,分为NC组、Model组、PC组、LD组、MD组和HD组。分离并鉴定Model组中表皮干细胞,分为control组、LD-cell组、MD-cell组和HD-cell组。HE染色观察各组增生性瘢痕组织;Western blot、RT-qPCR及免疫荧光检测Integrinβ1、p63、Wnt、β-catenin和c-myc的表达水平;CCK-8检测各组表皮干细胞增殖活力;干细胞成球实验检测各组表皮干细胞成球效率。结果体内实验发现,傣药咪多领可显著下调增生性瘢痕的瘢痕增生指数(hypertrophic indx,HI)(P<0.05),且减少增生性瘢痕中成纤维细胞数量和胶原密度。体内和体外实验均发现,Integrinβ1、p63、Wnt、β-catenin和c-myc在增生性瘢痕组织和表皮干细胞中异常高表达,且傣药咪多领能恢复它们的表达水平(P<0.05)。进一步发现,傣药咪多领能够抑制Wnt/β-catenin/c-myc通路激活剂LiC1的作用,进而下调表皮干细胞增殖活力和成球效率(P<0.05)。结论傣药咪多领通过抑制Wnt/β-catenin/c-myc信号通路激活,从而抑制表皮干细胞干性,进而对增生性瘢痕具有良好的治疗效果。

傣药咪多领(云南琵琶甲)对增生性瘢痕中表皮干细胞干性及Hedgehog信号通路的影响

目的探讨傣药咪多领(云南琵琶甲)对增生性瘢痕中表皮干细胞干性及Hedgehog信号通路的影响。方法构建新西兰大耳兔增生性瘢痕模型,并分离增生性瘢痕组织中表皮干细胞。将动物随机分为对照组、模型组、阳性对照组(PC组,用复方肝素钠尿囊素凝胶干预)及傣药咪多领0.667、1.334、2.668 g/kg组;表皮干细胞分为对照组,傣药咪多领0.025、0.05、0.1 g/mL组。RT-qPCR和Western blot测各组表皮干细胞标志物(Nanog和Oct4)及Hedgehog信号通路相关基因(SHH、Patch、Smo和Gli-1)mRNA和蛋白的表达水平,进一步通过免疫荧光检测SHH、Patch、Smo和Gli-1的表达水平。CCK-8法检测表皮干细胞增殖活力。流式细胞仪检测各组CD49F、CD29和CK19阳性细胞比率。结果傣药咪多领对增生性瘢痕具有良好的治疗效果,且显著抑制增生性瘢痕组织中Nanog和Oct4及SHH、Patch、Smo和Gli-1的表达水平,此外,2.668 g/kg剂量傣药咪多领与15 mg/kg剂量复方肝素钠尿囊素凝胶治疗效果相近。傣药咪多领限制抑制表皮干细胞中Nanog和Oct4及SHH、Patch、Smo和Gli-1的表达水平。结论增生性瘢痕中表皮干细胞干性增强,且Hedgehog信号通路相关蛋白表达上调,而傣药咪多领可逆转这一过程,并对增生性瘢痕具有良好的治疗效果。

傣药咪多领通过miR-27b-3p/GDF-6分子轴对增生性瘢痕成纤维细胞的作用机制

目的探讨傣药咪多领通过miR-27b-3p/GDF-6分子轴对增生性瘢痕成纤维细胞的影响。方法收集增生性瘢痕(hypertrophic scar,HS)组织及其配对正常皮肤组织,并分别分离两组织中的成纤维细胞HSFs和NSFs。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-27b-3p及GDF-6、COL1a2、COL3a1和α-SMA mRNA的表达水平;蛋白免疫印迹(Western blot)实验检测GDF-6、COL1a2、COL3a1和α-SMA蛋白的表达水平;CCK-8和EdU检测HSFs细胞的增殖活力;使用ANNEXIN V-FITC/PI试剂盒检测HSFs细胞的凋亡水平。结果傣药咪多领可以下调HSFs细胞中GDF-6、COL1a2、COL3a1和α-SMA的表达水平,并抑制HSFs细胞增殖(P<0.05)。miR-27b-3p在HS组织和HSFs细胞中异常低表达,且傣药咪多领能上调miR-27b-3p的表达(P<0.05)。miR-27b-3p靶向负调控GDF-6的表达水平(P<0.05)。敲降miR-27b-3p或过表达GDF-6上调HSFs细胞中GDF-6、COL1a2、COL3a1和α-SMA的表达水平,并促进HSFs细胞增殖(P<0.05)。结论傣药咪多领通过上调miR-27b-3p抑制GDF-6的表达水平,从而抑制增生性瘢痕成纤维细胞HSFs中GDF-6、COL1a2、COL3a1和α-SMA的表达水平并抑制HSFs细胞增殖。