反相高效液相色谱法测定人肌腱中的胶原蛋白

建立了测定人肌腱中胶原蛋白含量的高效液相色谱法。动物肌腱中的胶原蛋白经酸水解后生成包括羟脯氨酸在内的氨基酸混合物,用2,4-二硝基氯苯对水解产物衍生化,然后以0.01m o l/L乙酸钠-乙酸缓冲液(pH6.0)-乙腈(体积比为80∶20)为流动相,经反相C18柱分离,紫外检测器于360nm波长处检测来测定羟脯氨酸的含量。羟脯氨酸是胶原蛋白的特异性氨基酸且含量稳定,因而可通过样品中羟脯氨酸的含量来计算胶原蛋白的含量。该方法对羟脯氨酸的检出限为3μg/L,羟脯氨酸为3μg/L^100m g/L时与峰面积的线性关系良好;样品测定的相对标准偏差为1.95%,加标回收率为98.4%~110.8%。对60份人肌腱样品中胶原蛋白的含量进行了测定。所建立的方法灵敏、准确、干扰少,适用于肌腱中胶原蛋白含量的测定。

脉冲安培检测-高效阴离子色谱对药品和保健食品中牛磺酸的快速测定

建立了保健食品中牛磺酸的高效阴离子色谱快速分析方法。以0．25mol／LNaOH溶液作流动相，AminoPAC PA-10（2×250mm）离子色谱柱作分离柱，在Au工作电极，Ag／AgCl为参比电极的脉冲安培检测器上，分离测定了牛磺酸。牛磺酸的线性范围为1．0～50．0mg／L，检出限为0．088mg／L，标准溶液测定的保留时间和峰面积的日内相对标准偏差分别为0．36％和4．8％，日间相对标准偏差为0．89％和5．0％。用该法测定药品和保健食品中的牛磺酸，结果较为满意，测得值相对标准偏差为6．5％，加标回收率为96％～115％。该法无需衍生，具有较高的灵敏度和精密度，6min内可完成1次检测，适合于药品和保健食品中牛磺酸的快速检测。

高效阴离子色谱法分离测定蜂蜜和保健食品多糖水解产物中的单糖组成

目的建立分离测定8种单糖成分的高效阴离子色谱法。方法在AminoTMPAC PA-10（2×250mm）离子色谱分离柱上,用10.0mmol/L NaOH溶液作为流动相,在Au工作电极和pH参比电极的脉冲安培检测器上,分离测定八种单糖。结果各种单糖在0.1～5.0μg/mL浓度范围内线性良好,方法检出限2～26μg/L,标准溶液测定的保留时间和峰面积相对标准偏差分别为0.34%～7.42%和0.02%～2.16%。用本法测定了蜂蜜和保健食品多糖水解产物中的单糖组分,取得较为满意的结果,平均加标回收率为81.4%～122.0%。结论该方法无需衍生,具有较高的灵敏度和精密度,适合于蜂蜜和保健食品多糖水解产物中单糖的测定。

毛细管电泳-激光诱导荧光检测肌腱和肌腱细胞中的羟脯氨酸

建立毛细管电泳-激光诱导荧光检测(CE-LIF)分析羟脯氨酸的方法。肌腱和肌腱细胞中的胶原蛋白碱水解生成氨基酸,经异硫氰酸荧光素(FITC)衍生,采用LIF-CE分离测定胶原蛋白特异性氨基酸-羟脯氨酸。羟脯氨酸在0.5μg/L^8×103μg/L浓度范围内线性关系良好;检出限为0.5μg/L。相对迁移率和相对峰高的相对标准偏差(RSD)分别为5.0%和6.1%。测定了60份肌腱和9份细胞样品,加标回收率为95%~110%。将所建立的毛细管电泳方法与高效液相色谱法(HPLC)进行比较,两者测定结果相对误差为-1.9%~2.0%。本法仅需一次荧光标记,操作简单、快速灵敏,12min内完成一个分析周期,适于测定肌腱和细胞样品。

高效液相色谱法同时测定血清中VA、VD_3、VE和β-胡萝卜素

目的建立能同时测定人血清中维生素A(VA)、维生素D3(VD3)、维生素E(VE)和β-胡萝卜素的高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法。方法以无水乙醇沉淀蛋白质后,血清中的脂溶性维生素用乙醚/石油醚混合溶液提取,吹氮浓缩后用HPLC测定。结果VA、VD3、VE和β-胡萝卜素的线性范围分别为0.012μg/mL^500μg/mL、0.030μg/mL^500μg/mL、0.12μg/mL^500μg/mL和0.015μg/mL^500μg/mL;检出限分别为0.012μg/mL、0.030μg/mL、0.12μg/mL和0.015μg/mL;相对标准偏差分别为0.75%、0.54%、2.06%和2.74%。血清样品中VA、VD3、VE和β-胡萝卜素的回收率分别为:92%~116%,98%~112%,84.8%~106%和90%~105%。结论本法简便快速,适于血清样品中4种脂溶性维生素的同时测定。

全血中维生素E和辅酶Q10含量的高效液相色谱法测定

建立了一种同时测定全血中维生素E和辅酶Q10的高效液相色谱法。样品经乙醇沉淀蛋白，以正己烷萃取，氮气吹干后，流动相溶解，以甲醇-乙醇（体积比20：80）为流动相，在C18柱（5μm，250mm×4．6mm i．d．）上进行色谱测定。维生素E和辅酶Q10的线性范围皆为1．0～50．0mg／L，检出限分别为0．21、0．15mg／L，相对标准偏差分别为5．2％、5．9％；全血样品的维生素E和辅酶Q10加标回收率分别为97％～115％和90％～112％。

毛细管电泳法快速检测消毒剂中的醋酸氯己定

建立了消毒剂中活性成分醋酸氯己定(又名:醋酸洗必泰)的毛细管电泳快速检测法。采用15mmol/L磷酸盐乙腈(体积比为60∶40)缓冲体系,将醋酸氯己定在50cm×75μmi.d.的石英毛细管柱中进行电泳分离,电泳电压为15kV,检测波长为254nm。同时,对毛细管电泳分析醋酸氯己定的条件(如缓冲液的种类、pH值、浓度及电泳电压等)进行了优化。用该方法对消毒剂样品进行测定,在4min内可完成分析。醋酸氯己定在质量浓度为0.01～0.10g/L时线性良好,检测限为0.004mg/L,吸光度值的相对标准偏差为3.97%,迁移时间的相对标准偏差为2.99%,样品加标回收率为91.4%～116.6%。将该方法与高效液相色谱法进行比较,两种方法测定结果的相对误差≤4%。所建立的检测醋酸氯己定含量的毛细管区带电泳法简单、快速,适用于消毒剂样品的测定。

示波极谱法测定保健食品中维生素B_1

在pH5．0的柠檬酸盐缓冲溶液及0．15mol·L^-1KCl底液中，维生素B1在-1．40V处出现灵敏的极谱波，据此提出了测定保健食品中维生素Bl的快速而灵敏的示波极谱法。在pH4．7～5．2的范围内，可得到对称的二阶导数峰。峰电流（ip）与维生素B1浓度在0．1～8．0mol·L^-1间呈线性关系，其检出限为0．078mol·L^-1，连续测定6天，每天测定6次，对方法的精密度作了检验，所得结果的日内RSD值小于4．78％，日间RSD值为5．76％，回收率的测得值在92．0％及107．2%之间，对五种保健食品，用此法及国家标准法分别测定，所得分析结果用t-检验法进行检验，表明相互间无显著差异（t=1．76，P〉0．05）。

测定锗的二极管阵列检测-流动注射分光光度法

研究了在溴化十六烷基三甲铵（ＣＴＭＡＢ） 存在下， 锗与２，３ ，７ － 三羟基－ ９ － 水杨基荧光酮－ ６（ＳＡＦ） 的显色反应， 采用二极管阵列检测器， 建立了检测微量锗的流动注射分光光度法。 将该法应用于食品和中草药中锗的测定， 取得了满意的结果。 锗在０ ～３ ．０ ｍｇ／Ｌ 范围内线性良好， 检出限为０ ．０１２ ｍｇ／Ｌ， 样品加标回收率为８１ ．０ ％ ～９８ ．５ ％ ， 相对标准偏差小于８ ．４ ％ 。 实验表明， 该法灵敏、快速， 准确度高、精密度好， 操作简便， 易于推广使用。

高效阴离子色谱法快速分析保健食品中的腺苷

目的建立保健食品中腺苷的高效阴离子色谱测定方法。方法样品中的腺苷经乙腈-水提取后,以0.25mol/LNaOH为流动相,采用Amino PAC PA10氨基酸分离柱分离,Au为工作电极的脉冲安培检测器检测。结果腺苷在1.00μg/mL～20.00μg/mL浓度范围内线性关系良好,标准溶液测定的峰面积和保留时间的日内相对标准偏差(Related Standard Deviation,RSD)为4.97%和0.47%,日间RSD为6.08%和0.52%。将此法用于保健食品样品测定,取得较为满意的结果,样品平均加样回收率为93.3%～106.7%,样品测定结果的RSD为8.86%。结论本次建立的保健品中腺苷的高效阴离子色谱分析法,15min内可完成一次分析,方法简便准确,重现性好,适于保健品中腺苷的分析。

CCD-二极管阵列检测流动注射分光光度法分析食品中的钼

应用本室组装的流动注射-二极管阵列检测装置,并利用钼与2,3,7-三羟基-9-水杨基荧光酮-6(salicylflurone,SAF)-溴化十六烷基三甲胺(CTMAB)的显色反应,建立了测定钼的流动注射-CCD二极管阵列分光光度法.优化了显色反应条件和流动注射分析参数,本法在0.08～3μg/mL范围内线性良好,检出限为0.08μg/mL.样品加标回收率为84%～93%,相对标准偏差为4.1%.用该法对牛肝标准参考物质进行测定,测得值与保证值比较,两者差值在给出的不确定值范围内(t=1.687,P＞0.05).与ICP-AES比较,两法的测定结果之间无显著性差异(t=0.682,P＞0.5).采样速率为60次/h.本法简便快速,灵敏准确,食品样品硝化后,即可直接测定食品中钼的含量.

牙菌斑中有机酸的高效液相色谱分析

目的建立一种同时分析牙菌斑中甲酸、乙酸、琥珀酸和乳酸的高效液相色谱法。方法选取正常儿童和唇腭裂儿童各20名,取其全口牙菌斑,离心,取2μL上清液溶于一定体积重蒸水中,于Phenomenex C18柱上用磷酸盐缓冲液-甲醇(97∶3)为流动相,在最大吸收波长处测定4种有机酸的质量浓度。结果甲酸、乙酸、乳酸和琥珀酸线性范围分别为0.110～500、0.049～500、0.047～500、0.084～500μg/mL;检出限分别为0.110、0.049、0.047、0.084μg/mL;相对标准偏差分别为9.5%、7.9%、4.3%、4.2%。对正常和唇腭裂儿童口腔中牙菌斑样品进行检测,甲酸、乙酸、乳酸和琥珀酸样品加标回收率分别为82%～112%、82%～102.5%、90%～115%、80%～110%。结论高效液相色谱法灵敏快速,适合人体口腔牙菌斑中有机酸的检测。

示波极谱法测定罐头食品中的锡

目的 建立测定罐头食品中锡的示波极谱测定法。方法 利用锡在硫酸 ( H2 SO4) -碘化钾 ( KI) -抗坏血酸 ( Vit C) -偏钒酸铵 ( NH4VO3)体系中有一灵敏的极谱波 ,对几种罐头食品中的锡进行测定。结果 锡浓度在0～ 2 .0μg/ m l时线性良好 ,方法检出限为 0 .12μg/ L ,相对标准偏差 ( RSD)在 4.2 2 %～ 8.3 3 %之间 ;样品平均回收率为 94.7%～ 112 .0 %。将本法与食品国家卫生标准方法比较 ,结果令人满意。结论 本法简便、快速、灵敏 ,测定干扰少 。

修炼养生气功老年人血中活性氧自由基的ESR研究

应用磁共振自旋谱仪的ＥＳＲ方法，对修炼养生气功的３１例老年人血中氧自由基（Ｏ·－２）超氧化物岐化酶（ＳＯＤ）和过氧化脂质（ＬＰＯ）进行了测定分析。

人参皂苷Rg1对局灶性脑缺血大鼠iNOS和eNOS表达的影响

目的探讨人参皂苷Rg1对脑缺血大鼠诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮细胞型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响及其作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、单纯缺血组、人参皂苷Rg1 10、20、40 mg.kg-1处理组(Rg1低、中、高剂量组)、尼莫地平1 mg.kg-1阳性药物处理组(control组),每组10只。采用右侧大脑中动脉阻断法制备局灶性脑缺血模型,于动物清醒后进行神经功能评分;采用免疫组化技术检测大脑皮层缺血2 h后iNOS、eNOS的表达。结果假手术组大脑皮层区偶见iNOS及少量eNOS阳性细胞;单纯缺血组可见大量iNOS阳性细胞及少量eNOS阳性细胞;与单纯缺血组比较,人参皂苷Rg1各组iNOS阳性细胞数显著降低,eNOS阳性细胞数显著增多。结论人参皂苷Rg1对大鼠局灶性脑缺血具有保护作用,其可能通过下调脑组织iN-OS、上调eNOS的表达发挥作用。

电子式互感器的应用

基于40多个变电站的实际运行经验,分析了电子式互感器的性能、结构和适用标准,并将其与传统互感器进行了对比。在此基础上,阐述了电子式互感器在数字化变电站中应用的原则以及需要比传统互感器增加的试验项目和试验方法,并提出了数字化变电站的一种配置方案。电子式互感器所具有的优良绝缘性能和暂态特性,使得其对于数字化变电站,尤其对于超高压及特高压的数字化变电站具有十分重要的实用价值。

溶剂去乳化-悬浮固化分散液液微萃取-气相色谱-质谱联用测定水中的有机氯农药

建立了溶剂去乳化-悬浮固化分散液液微萃取技术结合气相色谱-质谱联用技术同时测定水样中8种有机氯农药的方法.以正十六烷作为萃取剂,将其与分散剂丙酮混合后,快速注入水样,获得乳化体系并完成萃取;然后加入丙酮作为去乳化剂破坏乳化体系,不需要经过离心即能使两相分层;经冰浴冷冻使其固化后,取出上层凝固的有机相（正十六烷）在室温下融化,取上清液进行GC-MS分析.考察了萃取剂、分散剂、去乳化剂的种类和体积,水样盐浓度和pH值对萃取效率的影响.结果表明,8种有机氯农药在0.025～2.00μg/L范围内有良好的线性关系（r=0.999 5～0.999 9）,8种有机氯农药的检出限为0.012 ～0.024 μg/L,精密度为3.15％ ～4.53％,富集倍数为96～101.将该方法应用于农田池塘水的测定,加标回收率为96.77％～102.93％,精密度为2.68％ ～4.86％.方法快速灵敏,有机溶剂消耗少,对环境友好,操作简便,适用于水中有机氯农药的批量分析,并为实现其样品前处理的自动化提供了技术和方法学的支持.

HPLC同时测定保健食品中维生素A、D_3、E和β-胡萝卜素

建立了一种同时测定保健食品中维生素A、D3、E、β-胡萝卜素的高效液相色谱法。样品皂化后乙醚提取，旋转蒸干，流动相溶解，HPLC紫外检测。实验结果显示，VA、VD3、VE和β-胡萝卜素的线性范围分别为0．012～500、0．030～500、0．12～500和0．015～500μg／mL，且浓度范围内线性良好；检出限分别为0．24、0．60、2．40和0．30μg/g；相对标准偏差分别为1．9％、3．4％、4．6％和2．9％；VA、VD、VE和β-胡萝卜素的加标回收率为84．8％-119．0％。分析周期在20min以内，方法适合保健食品样品的分析。

浊点萃取-高效液相色谱法同时测定人尿中的4种抗凝血鼠药

建立了基于浊点萃取同时测定人尿中杀鼠灵、杀鼠醚、溴敌隆和溴鼠灵的反相高效液相色谱法。以非离子表面活性剂TritonX-114为萃取剂,考察了色谱测定条件,优化了浊点萃取参数。5mL尿样中加入0.030gNaCl,30μL甲酸和5%(w/v)TritonX-114400μL,50℃萃取15min,4种目标物的萃取效率能达到85%以上。在选择的色谱条件下,以V(甲醇)∶V(1%甲酸)=90∶10为流动相,待测组分经反相C18色谱柱分离,于306nm波长处用二极管阵列检测器检测,10min可完成分析。4种鼠药中杀鼠醚在0.01～5.0mg/L,其余3种在0.02～5.0mg/L范围内呈良好的线性关系(r≥0.997);尿样的标准加入回收率为71.2%～114.5%;相对标准偏差小于7.0%。对于5mL尿液,富集相用50μL甲醇稀释,萃取浓缩因子可达到28倍。定量检出浓度分别为:杀鼠灵0.016mg/L,杀鼠醚0.001mg/L,溴敌隆0.005mg/L,溴鼠灵0.003mg/L。本法简便快速、灵敏可靠、绿色环保,能满足鼠药中毒应急检测的要求。

高效阴离子色谱法测定保健食品中的盐酸氨基葡萄糖

建立了保健食品中盐酸氨基葡萄糖的高效阴离子色谱测定方法。在AminoPae PA10离子色谱分离柱（2mm×250mm）上，以250mmoL／L NaOH溶液作为流动相，利用Au工作电极、pH参比电极的脉冲安培检测器测定了盐酸氨基葡萄糖。方法的线性范围为0．05～10．0mg／L，检出限为0．012mg／L，标准品和样品测定的相对标准偏差分别为0．69％和1．38％。用该法测定了保健食品中盐酸氨基葡萄糖，取得了较为满意的结果，加标回收率为96．6％～105．2％，与国家标准方法的测定结果对照，相对偏差为-1．4％～1．0％，表明所建立的方法具有高的灵敏度和精密度，适合于保健食品中盐酸氨基葡萄糖的分析。