肾上腺皮质癌组织蛋白的筛选及意义

目的比较肾上腺皮质癌(ACC)与其癌旁组织的蛋白表达谱的差异,筛选新的诊断ACC的肿瘤标志物。方法分别提取12例ACC组织蛋白及其癌旁组织蛋白。蛋白定量后,采用双向凝胶电泳(2-DE)对组织蛋白表达谱进行分离,采用飞行时间质谱对差异位点进行蛋白鉴定。结果共鉴定出29个ACC相关蛋白,其中表达上调20个,下调9个。上调蛋白的分子功能主要为蛋白质结合和氧化还原酶活性功能。结论成功筛选出一组在ACC组织中表达差异的蛋白,可能为ACC的候选肿瘤标志物。

液相色谱-串联质谱法测定大鼠体内凤仙萜四醇苷B血药浓度及其药动学研究

目的建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定大鼠血浆样品中凤仙萜四醇苷B浓度的方法,并进行药动学研究。方法取6只大鼠,尾静脉单剂量注射凤仙萜四醇苷B 1.0 mg/kg,分别于给药前和给药后2,5,20,40,60,90,120,180 min眼眶隐静脉丛采血,采用LC-MS/MS测定其血药浓度,并采用DAS计算药动学参数。结果凤仙萜四醇苷B在大鼠体内的主要药动学参数t_(1/2z)为0.518±0.114 h,C_(2min)为159.11±9.17 ng/m L,AUC0-t为142.86±23.53 ng·h/m L。结论本方法选择性好、灵敏度好、准确度高,可为下一步该化合物临床前药动学研究提供方法学依据。

尿核基质蛋白22对膀胱癌的诊断价值

目的研究尿核基质蛋白22(NMP22)在膀胱癌诊断中的临床价值。方法收集107例疑似膀胱癌患者的尿液标本,分别用NMP22试剂盒和尿脱落细胞学法对尿样进行检测,后经膀胱镜活检或手术病理证实65例膀胱癌。65例膀胱癌患者中,病理分期p Ta^T1期37例,p T2~T4期28例;病理分级G1~G2级34例,G3级31例;分析尿NMP22和尿脱落细胞学诊断膀胱癌的敏感度和特异度。结果 107例尿脱落细胞学检测膀胱癌的敏感度和特异度分别为24.62%(16/65)和100%(42/42),尿NMP22检测膀胱癌的敏感度和特异度分别为72.31%(47/65)和88.09%(37/42),P均<0.05。病理分级G3级和G1~G2级患者尿NMP22阳性率分别为83.87%(26/31)和61.76%(21/34),P<0.05;病理分期p T2~T4期和p Ta^T1期的患者尿NMP22检测阳性率分别为85.71%(24/28)和62.16%(23/37),P<0.05。结论尿NMP22检测膀胱癌具有较高的敏感性和特异性,可用于膀胱癌的早期和快速诊断。

肾透明细胞癌与癌旁组织差异蛋白表达谱分析

目的:通过比较肾透明细胞癌和癌旁组织的蛋白表达谱差异,筛选新的肾癌肿瘤标志,为提高肾癌诊断的敏感性和特异性提供基础。方法:分别提取10例肾透明细胞癌及其癌旁肾组织蛋白,蛋白定量后,采用双向凝胶电泳(2-DE)对组织蛋白表达谱进行分离,采用飞行时间质谱对差异位点进行蛋白鉴定。结果:鉴定出20个肾癌上调蛋白,10个下调蛋白,上调蛋白集中于缺氧反应和抗凋亡,以及Glycolysis、Regulation of actin cytoskeleton和PPAR信号通路。结论:本研究筛选出一组在肾癌组织中高表达的蛋白,是肾透明细胞癌的候选肿瘤标志,为进一步的验证和功能研究提供了基础。

CTC-Biopsy系统检测肿瘤患者外周血CTC临床应用可行性研究

目的循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)在判断临床分期、评估预后、监测疗效、辅助诊断和指导个体化治疗等方面表现出巨大潜力。本研究在完善和优化CTC-Biopsy检测系统的基础上,通过临床试验验证其检测肿瘤患者外周血中CTC的效果,探讨其临床推广应用的价值。方法使用CTC-Biopsy检测系统,按照中国国家食品药品监督局(China Food and Drug Administration,CFDA)的药物临床试验管理规范(Good Clinical Practice,GCP),对山东大学附属山东省肿瘤医院2014-09-01-2014-12-31收治的150例肿瘤患者及2014-12-12-2014-12-15 22名健康志愿者进行了临床试验。结果 CTC-Biopsy检测系统检测的染色标本背景干净,细胞形态清晰,细胞核质分界清楚;除异常细胞外,样片中仅残留少量的单核细胞。CTC-Biopsy检测系统检测不分病种恶性肿瘤灵敏度为51.33%(77/150),特异性为100.00%(77/77),约登指数为0.513。由CTC-Biopsy检测系统的CTC检出率的95%CI下限为43.33%,大于国际ISET法报道的43.06%。胃癌Ⅳ期患者检出率高于Ⅰ～Ⅲ期患者,差异有统计学意义,P=0.002。结论通过GCP临床试验证实,CTC-Biopsy系统检测肿瘤患者外周血中CTC的灵敏度、特异性等指标均达到国际同类检测系统水平。该系统检测操作简便易行,且高效、稳定和经济,具有良好的临床推广价值。

CellSearch和CTC-Biopsy系统检测肾细胞癌患者外周血CTCs价值探讨

目的探讨CellSearch和CTC-Biopsy系统检测肾细胞癌(又称肾癌)患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs)的价值及临床意义。方法应用CellSearch和CTC-Biopsy系统同时检测山东省肿瘤医院收治的37例肾癌患者外周血CTCs,分析CTCs检测结果与患者临床病理特征和预后之间的关联性。2种检测方法结果比较采用χ^(2)检验及一致性检验。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,Log-rank检验对生存数据进行分析,Cox比例风险回归模型分析评估影响预后的因素。结果CellSearch系统在7例患者中检测到外周血CTCs,总检出率为18.92%(7/37),无循环肿瘤细胞团(CTM)检出;CTC-Biopsy系统在13例患者外周血中检测到CTCs/CTM,CTCs/CTM总检出率为35.14%(13/37)。CellSearch检测结果与肾癌患者的各项病理因素均无关联性(均P>0.05);CTC-Biopsy检测结果与患者的TNM分期(χ^(2)=8.877,P=0.005)、肿瘤大小(χ^(2)=7.758,P=0.019)和肾癌危险度(χ^(2)=5.106,P=0.042)评分有关联。2种检测方法CTCs检测结果与肾癌患者5年无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)无相关性(均P>0.05)。结论在肾癌患者中,CTC-Biopsy系统CTCs检出率高于CellSearch系统;CTC-Biopsy系统CTCs检测结果可以作为肾癌临床病理分期的有益补充。