草鱼呼肠孤病毒在CIK细胞中复制及形态发生的研究

以草鱼呼肠孤病毒 (GCRV)感染的草鱼肾细胞系 (CIK)为模型 ,进行了草鱼呼肠孤病毒在细胞内的形态发生的研究。当病毒以感染复数为 5～ 10PFU/CELL感染CIK细胞时 ,在病毒感染细胞 4h以内的切片中 ,可观察到脱去部分外层衣壳的不完整病毒颗粒。感染细胞 8h ,可观察到浆胞内病毒发生基质 ,其内含有大量的直径约 5 0nm的亚病毒颗粒 ,无外层蛋白结构。感染 12～ 16h后 ,这些亚病毒颗粒装配上外层蛋白结构 ,形成直径为 72nm左右的成熟的病毒粒子。病毒感染细胞 8h后 ,开始出现典型的病毒包含体 ,16～ 2 0h小时病毒包含体裂解 ,继而释放出有感染性的子代病毒颗粒。

小量快速浓缩病毒蛋白的研究

采用甘油透析浓缩及PEG - 60 0 0沉淀相结合的方法 ,对细胞病毒培养液进行处理 ,获得了较为纯化的病毒蛋白。该方法适用于病毒蛋白小量快速分析。纯化的病毒蛋白回收率约为 53μg/ml。

四株草鱼呼肠孤病毒毒株的细胞感染特性比较研究

本文首次对低温保存的三株草鱼呼肠孤病毒GCRV873 、GCRV875、GCRV876与新分离的GCRV991毒株进行了细胞培养与病毒感染特性等比较研究。结果表明 ,GCRV873 、GCRV875、GCRV876在 - 30℃保存 10年后仍然具有一定的感染性 ,其滴度均在 10 2 TCID50 /mL以上 ,略低于从病鱼组织分离的GCRV991毒株的滴价。经传代培养后 ,四株GCRV的毒力逐渐升高 ,并趋于稳定 ;当感染复数 (MOI)为 0 .0 5PFU/cell时 ,测定四株GCRV的滴度均高于 10 8TCID50 /mL ,但略有差异。GCRV873 的滴度最高 ,可达到 6 .4× 10 11TCID50 /mL。连续传代的GCRV毒株在不同温度 (2 8℃、31℃、34℃、37℃、41℃ )条件下 ,均可感染CIK细胞 ;在 2 8℃时 ,感染效价最高 ,随着温度的升高 。

鳜鱼病毒病原及细胞感染特性的研究

在患暴发流行性发病鳜鱼的脾、肾、肝、鳃组织细胞的超薄切片中观察到直径为 12 0 150nm的二十面体病毒粒子 ,其截面呈六角形 ,有囊膜。将病鱼内脏与 10倍体积的PBS缓冲液制成组织匀浆液 ,过滤除菌后感染对数生长期的草鱼肾细胞。结果表明 ,该感染液在 2 8℃条件下 ,培养 36 4 8h ,生长旺盛的草鱼肾细胞开始出现CPE ,5 7d感染的单层细胞逐渐脱落死亡。该细胞病毒悬液具有感染性 ,可持续稳定地进行传代培养。感染细胞的病毒培养液 ,经差异离心纯化 ,负染制片 ,电镜下观察到大量的病毒粒子 ,对照培养物中未发现任何病毒颗粒。

草鱼出血病病毒基因组的cDNA合成、克隆及部分序列分析

采用差速离心的方法纯化感染草鱼出血病病毒的细胞悬液。提纯的病毒粒子经蛋白酶Ｋ处理和酚氯仿抽提，在１％琼脂糖凝胶电泳条件下分离得到１１条ｄｓＲＮＡ，利用柱离心式胶回收试剂盒纯化各基因片段。纯化的ｄｓＲＮＡ溶于９０％的ＤＭＳＯ中，７０℃变性１５ｍｉｎ，然后采用随机引物法反转录合成各基因片段的ｃＤＮＡ，并平头连接于ｐＺＥｒＯ２．０载体的ＥｃｏＲＶ位点，电转化ＴＯＰ１０感受态细胞。重组质粒经酶切、ＰＣＲ扩增得到大小不等的插入片段，ｃＤＮＡＲＮＡ斑点杂交的结果进一步证实其插入为目的基因片段。采用循环ＰＣＲ测序的方法，对其插入片段进行了序列测定，对其中第１１片段的部分序列作了报道。

系统“晃电”整体解决方案的探讨

供电系统是企业电网的重要动力来源,是提高企业安全生产的重要保证。供电系统是否稳定直接关系到整个生产设备能否正常运行。通过分析供电系统及企业电网晃电产生的原因,区分晃电的基本类型,阐述晃电的主要危害,探索企业供电系统中晃电问题的解决对策,提出新型有效的治理方案。

浅析货物招标评标标准的设定与运用

在符合法律法规的情况下,让招标方选择到性价比最优的货物,评标标准在货物招标、评标过程中,无疑起到至关重要的作用,设定评标标准应注意及考虑的问题,评标标准的通用性及专用性的差异,所有货物的评标标准不能一概而定,应视货物性质属性选择合适的评标标准,通过评委打分,才能更真实、更贴合实际的反映投标方货物的性价比。

酶联免疫法检测PAF受体RNA的聚合酶链反应产物

目的 :建立PCR ELISA法检测PAF受体RNA。方法 :提取 2 0例银屑病病人和 2 0例正常对照组血液单个核细胞标本中的总RNA ,用双标记的PAF R(Biotion与Digoxin标记 )及 β actin(Biotin与Fluorescein标记 )引物进行PT PCR ,用ELISA检测PCR产物 ,用传统的琼脂糖凝胶电泳对照。结果 :ELISA法和琼脂糖凝胶电泳法对 β actin检测结果均为阳性 ;ELISA法检测PAF R ,2 0例病人标本均为阳性 ,2 0例对照组 16例阳性 ;琼脂糖凝胶电泳法检测PAF R ,2 0例病人标本 18例阳性 ,2 0例对照组 16例阳性。结论 :PCR ELISA引物双标记法检测PAF R操作简单 ,有较高的敏感性。

利用AI1134在线色谱仪测量15~#炉裂解气含量

介绍了美国ABB公司生产的ABB VISTA 2000型气相色谱仪以及在裂解15#炉上的应用情况。首先,介绍了裂解气测量系统,然后,详细介绍了在AI1134在线色谱仪上的程序改进,最后,介绍了色谱仪与DCS通讯问题。

浅谈混凝土技术发展中的问题

混凝土技术是建筑行业应用最多的一个技术,混凝土技术的快速发展也促进了我国建筑行业的发展。但是,在应用混凝土技术的过程中,受到多方面因素的影响,使建筑物的使用寿命也降低。混凝土技术的好坏与其自身的材料结构存在直接关系,该文仅分析胶凝材料与功能外加剂两种材料对混凝土技术的影响,探讨混凝土技术未来发展中值得注意的问题。

高低压成套开关柜电气设计及智能化发展分析

本文对高低压成套开关柜电气设计现状进行简单概述,着重对电气设计及智能化发展进行探析,并合理分析了高低压成套开关柜未来发展的重要趋势,旨在为相关专业人士提供理论支持。

异步电动机转差频率的矢量控制仿真

通过异步电动机在MT坐标系下的数学模型和异步电动机转差频率矢量控制原理和控制框图,来确立交-直-交电压源型转差矢量控制变频调速系统,利用Matlab对转差频率矢量控制系统进行仿真,从而证明转差矢量控制系统的合理性,为异步电动机的矢量控制提供了一个有益的参考。

以建筑应用为导向创新绿色建材发展

随着我国经济的快速发展和城镇化建设速度的不断加快,建筑资源的开发开始向绿色应用发展,而其中的绿色建筑作为一种全新的可持续发展建筑,势必将成为今后广泛应用的建筑产品。由于人们对绿色建材不够了解,本文主要阐述了以建筑应用为导向的创新绿色建材的发展情况以及技术应用实际现状。

裂解炉色谱指示波动原因探讨及对策

介绍了美国ABB公司生产的ABB VISTA 2000型气相色谱仪及整个色谱仪分析系统。对裂解炉色谱仪指示波动原因从色谱仪整个分析系统的各个环节进行了原因分析及探讨,并给出了可行性对策。因此对从事在线色谱仪的技术人员和操作人员在色谱仪维护方面具有一定的指导意义。