Jurkat细胞TCR基因重排对BV CDR3的影响

目的探讨Jurkat细胞TCRBD2-BJ2基因重排对TCRβ链可变区互补决定区3(BVCDR3)可能产生的影响,为深入研究TCR基因重排奠定实验基础。方法RT-PCR扩增TCRBV26个亚家族CDR3区,结合TCR基因扫描(GeneScan)和基因测序技术,监测Jurkat细胞在增殖传代过程中以及在T细胞激活剂和超抗原SEA等刺激诱导后TCRBVCDR3谱系漂移及长度和序列变化。结果表达TCRBV8家族的单克隆细胞株Jurkat,在增殖传代过程中,以及经刺激诱导48或72h后,未监测到有TCRBV8以外的新的BV亚家族出现,BV8CDR3长度和一级核苷酸序列也未发生变化。结论Jurkat细胞发生的TCR基因重排可能不引起TCRBVCDR3改变,因而对TCRBVCDR3区抗原识别特异性(即抗原特异性漂移)并未产生影响,但并不排除TCR发生改变的可能性。

食物特异性IgG抗体检测在变态反应性皮肤病中的应用

目的探讨食物特异性IgG抗体检测在变态反应性皮肤病中的临床意义,为变态反应性皮肤病的病因诊断及防治提供参考依据。方法采用ELISA方法检测74例荨麻疹、63例过敏性紫癜、23例湿疹以及77例变应性皮炎患者血清中14种食物特异性IgG抗体。结果 237例变态反应性皮肤病患者中,食物特异性IgG总阳性率为67.1%,各组IgG阳性检出率差异无显著性(P>0.05)。4组变态反应性皮肤病患者的主要食物致敏源谱系既有相同性也有一定差异性,其中鸡蛋和牛奶是所有疾病组中检出阳性率最高的两种食物。食物不耐受患者中,对1、2种食物不耐受者居多。结论变态反应性皮肤病患者食物不耐受发生率较高,食物不耐受与变态反应性皮肤病具有密切相关性。食物特异性IgG抗体检测对常见变态反应性皮肤病的病因诊断、治疗和预防具有重要意义。

多肿瘤标志物联合检测在肝癌诊断中应用价值的评价

目的评价不同肿瘤标志物组合对肝癌的诊断价值,为临床应用中选择优化合理、经济实用的肿瘤标志物组合提供参考依据。方法应用多肿瘤蛋白芯片检测系统检测63例肝癌患者血清中12项肿瘤标志物,包括CA19-9,NSE,CEA,CA242,Ferrtin,β-HCG,AFP,Free-PSA,PSA,CA125,HGH,CA15-3,分析和比较肿瘤标志物的不同组合在肝癌诊断中的应用价值。结果阳性率在10%以上的肿瘤标志物只有6种,阳性率由高至低的6种肿瘤标志物分别是AFP(63.49%),CA19-9(42.86%),CA125(42.86%),CEA(39.86%),Ferritin(39.86%),CA242(11.11%)。在与肝癌相关性较强的6种肿瘤标志物中,3,4,5,6种标志物的不同组合均较AFP单项指标显著提高检测阳性率,且随着标志物组合数量的增加,检测阳性率提高;与C12联合检测相比,3种以上标志物的任何组合方式均不能显著提高肝癌的诊断率。4,5或6项指标的联合检测可以替代C12联合检测。结论C12检测系统中的12项标志物联合检测对肝癌诊断而言,并非最为理想的检测系统,开发和制备经济适用、具有较强针对性的新型多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统是必要的。

食物特异性IgG检测在儿童常见慢性疾病中的应用分析

目的:探索引起本地区儿童食物不耐受的主要食物致敏源,为儿童常见慢性疾病的病因诊断、预防和治疗提供新的实验室参考依据.方法:以变态反应科、皮肤科、儿科和呼吸科门诊就诊的87例患儿为研究对象,采用食物不耐受体外检测试剂盒(ELISA方法)检测患儿血清中14种食物特异性IgG抗体,并对其结果进行统计分析.结果:87例门诊患儿中,食物特异性IgG阳性总阳性率为86.2%(75/87).牛奶、鸡蛋/蛋白/蛋黄、小麦3种食物的特异性IgG阳性率位居前3位,其次分别为大米、大豆、虾、螃蟹、西红柿、牛肉、玉米、鳕鱼、蘑菇、鸡肉、猪肉.IgG浓度分级结果表明,除鳕鱼外,各种食物均以引起轻度不耐受(IgG浓度+1级)为主.IgG阳性患儿中,对1～2种食物不耐受者居多,占IgG阳性升高患儿的69.33%(52/75).除男性患儿虾的IgG阳性百分比显著高于女性患儿(P<0.05)外,其余各种食物的IgG阳性百分比在不同性别间均无显著性差异.结论:牛奶、鸡蛋/蛋白/蛋黄和小麦是本地区患儿食物不耐受最常见的主要致敏源,儿童尤其是已有相应一些临床症状的患儿食物不耐受发生率较高,食物特异性IgG抗体检测对儿童一些常见慢性疾病的治疗和预防具有重要意义.

血清特异性IgE检测在变应性鼻炎病因诊断中的应用

目的：探讨引起本地区变应性鼻炎（AR）的主要吸人性变应原，为AR的防治提供客观依据．方法：以艾蒿花粉、禾本科花粉、屋尘螨、黑麦花粉、车前草花粉、交链孢霉、猫上皮、白桦花粉、狗上皮作为变应原，将样本中87例4～18岁患者设为儿童组，174例19岁以上患者设为成人组．采用阿罗格AD体外诊断盒检测261例AR患者血清中变应原特异性IgE抗体，并对结果进行相应性分析．结果：261例AR患者中，艾蒿花粉检测阳性率位于首位（占37．55％），其次为禾本科花粉（占36．02％），屋尘螨（占34．48％），黑麦花粉（占24．52％），车前草花粉（占16．48％），交链孢霉（占8．05％），猫上皮（占8．05％），白桦花粉（占6．51％），狗上皮（占3．45％）．儿童组中对艾蒿花粉的敏感性明显高于成人组（P〈0．05）．结论：艾蒿、禾本科、黑麦花粉和屋尘螨是乌鲁木齐市主要的吸人性变应原．

某地区维吾尔族强直性脊柱炎患者HLA-B27亚型频率分布

目的探讨新疆维吾尔族强直性脊柱炎(AS)患者HLA-B27亚型的分布特点。方法采用PCR-SBT法对维吾尔族AS患者进行HLA-B27亚型检测,并与当地汉族及国内其他地区已报道的AS患者HLA-B27亚型分布特点进行对比分析。结果维吾尔族AS患者中B*2705表现型频率(55.56%)最高,显著高于本地区汉族AS患者B*2705频率(P<0.05),也高于国内其他地区报道的汉族AS患者B*2705频率(山东地区63.89%除外)。维吾尔族AS患者中B*2704表现型频率(25%)是迄今国内报道中的最低频率,明显低于本地区汉族(P<0.05)和国内其他地区报道的B*2704表现型频率。维吾尔族AS患者中还检测到B*2702、B*2707、B*2710 3种亚型,其中B*2710亚型系国内首次报道;本地区汉族AS患者以B*2704(65.22%)表现型为主,其次为B*2705(26.09%)的特点与国内其他大部分地区汉族AS患者B27亚型频率分布特点一致。汉族AS患者中检测到2例B*2715亚型,系国内第2次报道;另检测到B*2702/B*2704及B*2704/B*2705存在2个位点的纯合子各1例,其中B*2702/B*2704在国内首次报道。结论新疆地区的维吾尔族AS患者HLA-B27等位基因的表达和频率有着与本地区及国内其他地区汉族人群显著不同的特征。在新疆开展不同民族HLA-B27等位基因亚型分布规律的调查研究对于人类遗传学研究和分析各类人群遗传背景对AS疾病易感性的影响将具有重要意义。

食物特异性IgG抗体检测在过敏性紫癜中的应用分析

目的 探讨食物不耐受与过敏性紫癜的相关性.方法 采用ELISA方法检测63例过敏性紫癜患者血清中14种食物特异性IgG抗体.结果 63例过敏性紫癜患者中有44例检测到1～12种食物特异性IgG阳性升高,总阳性率为69.8%（44/63）;特异性IgG阳性率在10%以上的主要致敏食物有5种,阳性率由高至低分别为牛奶（34.9%）,鸡蛋（30.2%）,小麦（23.8%）,螃蟹（11.1%）,大豆（11.1%）;食物特异性IgG浓度分级结果表明,多数食物以引起轻度不耐受（即IgG浓度为＋1级）的病例为主;患者食物不耐受检出阳性率以及14种食物IgG阳性率在不同性别间差异均无统计学显著性意义（P〉0.05）;食物不耐受阳性患者中,对1～2种食物不耐受者所占比例较多（分别为45.4%和36.4%）.结论 过敏性紫癜患者食物不耐受发生率较高,食物不耐受与过敏性紫癜具有密切相关性.食物特异性IgG抗体检测对过敏性紫癜防治将具有重要意义.

食物不耐受在慢性荨麻疹病因诊断中的临床意义

探讨慢性荨麻疹与食物不耐受的相关性,为其病因诊断及防治提供参考依据。采用美国B IOMER ICA公司生产的食物不耐受体外检测试剂盒(ELISA方法)检测慢性荨麻疹患者血清中14种食物特异性IgG抗体,并对结果进行统计分析。结果表明,74例患者中,食物特异性IgG总阳性率为63.5%(47/74)。IgG阳性率在10%以上的食物有六种,阳性率由高至低分别为鸡蛋(24.3%)、牛奶(24.3%),螃蟹(18.9%)、大豆(18.3%)、小麦(17.6%)、虾(13.5%)。IgG浓度分级结果表明,仅对1种食物不耐受者居多,占全部IgG阳性病例的46.8%(22/47);男、女患者食物特异性IgG阳性率以及各种食物的IgG阳性率在不同性别间均无显著性差异(P>0.05)。结论:慢性荨麻疹与食物不耐受密切相关,鸡蛋、牛奶、螃蟹、大豆、小麦、虾是本地区慢性荨麻疹患者食物不耐受最常见的主要致敏源,食物不耐受检测对慢性荨麻疹患者的病因诊断和防治具有重要意义。

T细胞激活剂对Jurkat细胞重组激活基因表达的影响

目的:研究T细胞激活剂PHA,抗CD3mAb,PMA+A23187对人T细胞白血病细胞株Jurkat重组激活基因(RAGs)mRNA表达水平的影响.方法:采用RTPCR法检测不同T细胞激活剂作用不同时间后Jurkat细胞中RAG1,RAG2mRNA,以β肌动蛋白(βactin)的表达作为内参照进行灰度分析,比较不同组Jurkat细胞RAGsmRNA的表达水平.结果:三种T细胞激活剂刺激诱导的Jurkat细胞RAG1mRNA表达量明显低于对照组(P<0.05),且RAG1mRNA表达量的下降与刺激诱导作用时间有关;PHA刺激诱导后RAG2表达量显著低于对照组(P<0.05);PMA+A23187刺激诱导6,12h均未检测出RAG2mRNA的表达;而抗CD3mAb作用12h组RAG2mRNA表达量显著高于对照组(P<0.05).结论:Jurkat细胞同时表达RAG1,RAG2mRNA,并在一定诱导下RAGs表达量发生改变,因此有可能成为研究外周T细胞RAGs表达调节的一个潜在的细胞模型.

12项肿瘤标志物联合检测在卵巢癌诊断中的应用分析

探讨多肿瘤标志物联合检测在卵巢癌的诊断和鉴别诊断中的应用价值。应用多肿瘤标志物蛋白芯片检测33例卵巢癌患者血清12项肿瘤标志物(CA19-9、NSE、CEA、CA242、Ferritin、β-HCG、AFP、PSA、PSA、CA125、HGH及CA15-3),以24例其他妇科恶性肿瘤患者和25例妇科良性病变患者作为对照,分析和比较肿瘤标志物在不同组患者血清中的水平以及各组单项指标及联合检测的阳性率。结果表明:①卵巢癌组的血清CA125、CA19-9、CEA、Ferritin、HGH和CA15-3水平显著高于良性病变组(P<0.05);其它妇科恶性肿瘤组的血清CA19-9、CEA、Ferritin和CA15-3水平显著高于良性病变组(P<0.05);②卵巢癌组CA19-9、CEA、Ferritin和CA125的单项检测阳性率显著高于良性病变组,其中以Ferritin(51.52%)和CA125(45.45%)的阳性率最高,单项指标中阳性率在10%以上的6项标志物(CA19-9、CEA、CA242、Ferritin、CA125及CA15-3)的组合检测阳性率(81.82%)和12项标志物联合检测阳性率(84.85%)均较单项检测有显著提高;其它妇科恶性肿瘤组的CEA和Ferritin的单项检测阳性率显著高于良性病变组(P<0.05),6项标志物组合检测阳性率(83.33%)及12项标志物联合检测阳性率(87.5%)均显著高于良性病变组(P<0.05);③卵巢癌组与其它恶性肿瘤组相比,血清12项标志物水平、各单项指标检测阳性率、6项标志物组合检测阳性率以及12项标志物联合检测阳性率均无显著性差异(P>0.05)。结论:多肿瘤标志物联合检测有助于提高卵巢癌的检出率和诊断性能,有助于卵巢癌和妇科良性病变的鉴别诊断,但对于卵巢癌与其他妇科恶性肿瘤的鉴别诊断意义不大。

系统性红斑狼疮患者抗核抗体的表达及临床表现分析

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者抗核抗体(ANA)表达及首发临床表现在不同性别、年龄的分布特点。方法选取2015年1月至2018年12月在新疆军区总医院住院并确诊的263例SLE患者为研究对象,对患者年龄、性别、起病时首发临床表现、ANA及荧光核型实验结果等进行比较。结果SLE患者ANA阳性率为94.29%,在不同性别、年龄组间ANA阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ANA免疫荧光核型以核颗粒型最为多见(64.64%),两种核型(核颗粒和着丝点)阳性率在不同年龄组间差异有统计学意义(P<0.05)。女性患者Ro-52和NUC抗体阳性率均明显高于男性(P<0.05)。抗组蛋白抗体(HI)阳性率在不同年龄组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。SLE患者首发临床表现中肾损害发生率最高,其次为皮肤损害和关节炎。男性患者皮肤损害和神经系统症状的发生率明显高于女性,但关节炎发生率明显低于女性(P<0.05)。结论SLE患者ANA核型、ANA谱和首发临床表现分布具有性别和年龄差异,其ANA表达和临床表现分布特点可为SLE的早期诊断和治疗提供重要参考依据。

人T细胞白血病细胞株Jurkat的TCR基因重排

背景与目的:近年的一些体外实验研究发现,重组激活基因(recombi-nationactivatinggene)编码的RAG1与RAG2(recombinationactivatinggenes,RAGs)蛋白能够介导DNA链的转位(transposition)作用,因而,可能与淋巴系统肿瘤性疾病的发生有关,但迄今尚未有明确定论。我们在实验中发现,代表T细胞发育成熟阶段的人白血病细胞株Jurkat同时表达重组激活基因RAG1和RAG2,并且经适当诱导后有RAGs表达的变化。本研究旨在确证Jurkat细胞是否发生RAGs介导的T细胞受体(T-cellreceptor,TCR)基因重排。方法:采用巢式和半巢式PCR检测T细胞受体D!-J!之间的信号结合T细胞受体删除DNA环(signaljointT-cellreceptorexcisionDNAcircles,sjTRECs);连接介导的PCR(LM-PCR)法检测TCRβ链位点重排中间物-重组信号序列(recombinationsignalsequence,RSS)断点;RT-PCR法检测V(D)J重排第二阶段非同源末端连接(non-homologousendjoining,NHEJ)途径中的核心蛋白Ku70/Ku80及末端脱氧核苷酸转移酶(terminaldeoxynucleotidyltransferase,TdT)。结果:在Jurkat细胞DNA中检测到结合区具有多样性特征的TCRDβ2-Jβ2sjTRECs和RSS5′端和3′端断裂点,并检测到TdT、Ku70/Ku80的表达。结论:Jurkat细胞有TCR基因重排的发生。Jurkat细胞可能成为研究RAGs和TCR基因重排与T细胞淋巴瘤的一个潜在的细胞模型。

电子化——人事档案信息的未来

随着我国经济的高速发展,社会的转型趋势愈加复杂,人事档案的管理出现了许多问题,为了适应时代的发展和社会的进步,人事档案改革要求的呼声逐年强烈,作者认为:人事档案的电子化势在必行。

试论干部人事档案现代化管理

干部人事档案实现现代化管理是一种必然趋势。它能减少一些不必要的劳动强度 ,大大提高工作的准确性及效率 。

葡萄膜炎患者外周血TCR Vα谱系多态性分析

目的探讨葡萄膜炎患者外周血T细胞受体α链可变区互补决定区3(TCR VαCDR3)谱系特点及多态性。方法采用RT-PCR扩增葡萄膜炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中TCR Vα34个亚家族,经免疫扫描谱型技术分析34个亚家族谱型。结果 5例正常健康人PBMC TCR VαCDR3谱型多数呈高斯分布,4例葡萄膜炎患者外周血T细胞均出现多个TCR Vα亚家族谱型的异常改变,异常峰型包括单峰、寡峰/寡峰趋势,偏峰和不规则异常峰型。34个TCR Vα亚家族中,不同亚家族异常峰型出现的频率不同,非正态异常峰型出现频率较高的亚家族有Vα13和Vα17(均为3/4),而Vα1.1、Vα10、Vα20、Vα28和Vα28亚家族均未出现异常峰型。TCR Vα7在HLA-B27阴性的患者(U2)中出现异常峰型,在HLA-B27阳性的3个患者(U1、U3、U4)中并未出现这个亚家族的异常;TCR Vα13则相反,即在HLA-B27阳性的3个患者中均出现异常峰型,而在HLA-B27阴性的患者中正常。结论葡萄膜炎患者PBMC TCR VαCDR3谱系具有显著多态性特点,单/寡克隆增生的T细胞有可能是葡萄膜炎发病中的自身反应性T细胞。

变应性鼻炎与哮喘的研究近况及发展趋势

近十年以来 ,哮喘与变应性鼻炎的患病率有明显增加趋势。此外因哮喘所致死亡率亦有上升趋势。变态反应性炎症过程在此类疾病的发展中起着重要作用。例如 ,机体接触致敏原后 ,体内有炎症反应的发生。在机体的损害部位 ,有液体及血细胞聚积。对哮喘病人的病理检查结果表明 ,在气道炎性渗出物中含有多种细胞 ,主要是嗜酸性粒细胞 ,也包括嗜中性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞。

人白血病细胞株重组激活基因表达及T细胞受体基因重排的检测(英文)

背景:淋巴细胞特异性重组激活基因编码的重组激活基因1与重组激活基因2蛋白是参与V(D)J重排机制的重要的重组酶。除参与V(D)J重排以外,近年的研究结果表明重组激活基因介导的转位作用可能与染色体易位及淋巴性恶性肿瘤的发生有关,但迄今尚未有明确定论。目的:检测重组激活基因、DNA修复因子Ku70/Ku80和末端脱氧核苷转移酶mRNA表达以及T细胞受体基因重排在人白血病和淋巴瘤细胞株的发生情况。设计:重复测量实验。单位:南方医科大学生物技术学院分子免疫研究所。材料:T淋巴白血病细胞株Jurkat和6T-CEM购自上海细胞生物研究所;T淋巴白血病细胞株Molt-4,皮肤T细胞淋巴瘤细胞株HuT102,Burkitt’s淋巴瘤细胞株Raji和Daudi以及原髓细胞白血病细胞株HL-60和慢性髓原白血病细胞株K562均由本实验室保存。细胞用含有体积分数0.1胎牛血清的RPMI1640培养基于37℃,体积分数0.05CO2条件下培养。方法:实验于2005-10/2006-01在南方医科大学生物技术学院分子免疫研究所完成。采用反转录聚合酶链反应检测重组激活基因1,重组激活基因2,非同源末端连接装置途径中的DNA修复因子Ku70/Ku80,以及末端脱氧核苷转移酶mRNA表达;采用巢式、半巢式聚合酶链反应、连接介导的聚合酶链反应等方法检测T细胞受体重排删除DNA环和T细胞受体β链重组信号序列两端的断裂点。了解参与V(D)J重排过程的基因表达和T细胞受体基因重排中间体的产生情况。主要观察指标:重组激活基因、DNA修复因子Ku70/Ku80和末端脱氧核苷转移酶mRNA表达以及T细胞受体基因重排在人白血病和淋巴瘤细胞株的发生情况。结果:反转录聚合酶链反应检测结果显示:重组激活基因1mRNA在4种T细胞株中均被检测到,在两种B细胞株和两种髓性白血病细胞株中未检测到;重组激活基因2和末端脱氧核苷转移酶mRNA表达仅在Jurkat,Molt-4和6T-CEM3种T细胞株中检测到,但在6T-CEM表达较弱;除HL-60细胞未检测到Ku80表达外,所有细胞株均检测到Ku70和Ku80表达。对4种T细胞株T细胞受体重排中间体检测结果表明:仅在Jurkat细胞中检测到Dβ2-Jβ2sjTRECs与Dβ25’端和3’RSS断点,表明Jurkat细胞发生T细胞受体基因重排。同时发现JurkatTCRDβ2-Jβ2重排删除环结合区具有明显的多样性特征。结论:重组激活基因可能与T细胞白血病具有更为密切的关系。Jurkat细胞有可能成为研究重组激活基因与T细胞淋巴性肿瘤的一个潜在的细胞模型。