采血时静脉穿刺两种持针方法的比较

目的探讨静脉穿刺的持针方法。方法将1 600人次无偿献血者随机分为观察组和对照组,各800人次,观察组采用改良持针法行静脉穿刺,对照组采用传统持针法行静脉穿刺。结果观察组较对照组行静脉穿刺时间短(u=30.51,P<0.01),疼痛反应减轻,一次性成功率无显著性(χ2=0.16,P>0.05)。结论改良持针法可缩短穿刺时间,能减轻献血员的痛苦,值得推广。

人脐血有核细胞在缺氧缺血新生大鼠脑内的生存及其抗原表达

目的:观察人脐血有核细胞在缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑内生存和抗原表达。方法:实验于2002-09/2004-03在深圳宝安血站干细胞研究实验室内完成。①实验中采用羟乙基淀粉沉淀法分离脐血有个核细胞。②5窝F344新生1d龄大鼠共64只,同窝随机分为3组:正常组:不干预。模型组:结扎左颈动脉,吸入体积分数为0.08的低氧3h制成缺氧缺血性脑病模型。人脐血有核细胞组:造模后24h定位注射人脐血有核细胞(1.0～2.0)×106。③Morris水迷宫试验评估移植后第42天大鼠学习和记忆能力;第10周麻醉状态下处死实验鼠,制作病理切片,苏木精-伊红染色和间接免疫荧光检测人脐血有核细胞在脑内存活和分化情况。结果:64只大鼠,实验过程中死亡20只,正常组、模型组、脐血有核细胞组分别存活17,11,16只,进入结果分析。①缺氧缺血性脑病模型制作结果:模型组出现行为障碍,病理切片可见细胞变性坏死、胶质细胞吞噬、血管套、胶质细胞结节形成等典型缺氧缺血所致脑组织病理损伤。②第42天水迷宫试验显示:人脐血有核细胞组大鼠的空间识别和记忆能力明显尤于模型组(P<0.01),与正常对照组差异无显著性。③病理切片、苏木精-伊红染色和间接免疫实验结果显示:人脐血细胞组,进针部位存在大量移植细胞,成团或散在分布,呈方向性向周围迁移;左侧大脑血管壁,可见大量细胞迁移环绕;所植入的细胞中胶质纤维酸性蛋白表达率约为4.59%,神经元特异烯醇化酶阳性表达率约为2.68%。结论:人脐血有核细胞在缺氧缺血脑损伤新生大鼠脑内可以部分存活,表达胶质纤维酸性蛋白、神经元特异烯醇化酶抗原,并有效改善缺氧缺血性新生大鼠的功能缺陷。

脐血有核细胞移植治疗脑卒中的动物实验

目的:脐血有核细胞中富含多系前体细胞,具备改善受损神经系统功能的潜能。为此建立阻塞性脑卒中动物模型,探讨脐血有核细胞移植对其治疗的可行性。方法:实验于2004-09/2005-05在深圳市宝安区人民医院动物实验室完成。①实验材料:脐带血取自足月新生儿,由深圳宝安血站研究室提供,产妇及其家属均签署知情同意书。SD清洁级成年大鼠80只,随机取20只作为正常对照组,另60只以电凝法建立阻塞性脑卒中模型。剔除运动功能障碍不典型鼠后,随机取5只作为模型观察,余鼠按1∶1随机分为细胞移植组和模型对照组,当出现单只为尾数时,将其分配在细胞移植组。②实验方法:无菌抽取脐血20mL,加入乙二胺四乙酸抗凝,Ficoll法分离脐血有核细胞。造模后第10天,细胞移植组大鼠将头部固定,按前囟尾侧3.0mm,中线旁1.5mm,深度1.2mm注入1011L-1脐血有核细胞悬液5μL,1μL/min。模型对照组注射等量无细胞脐血清,正常对照组不给予任何干预。③实验评估:造模后4周,5只模型观察大鼠制作脑切片,行苏木精-伊红染色镜检。各组分别于细胞移植前、细胞移植后2,6周进行横木行走实验和触觉刺激试验,检测其运动和触觉功能的恢复。处死各组大鼠制作病理切片,免疫荧光检测脐血有核细胞在脑内生存和分化情况。结果:正常对照组、细胞移植组、模型对照组各20只、24只、24只进入结果分析。①阻塞性脑卒中模型大鼠病理特征:造模大鼠出现行为障碍,缺血部位出现中风囊,病理切片可见缺血坏死区等阻塞性脑卒中所致脑组织病理损伤。②运动和触觉功能测试:细胞移植前,细胞移植组与模型对照组大鼠的横木行走能力、撕胶纸能力均基本相似(P=0.05),且明显低于正常对照组(P<0.01)。移植后第2周,细胞移植组大鼠两项能力均明显强于模型对照组(P<0.05),但仍低于正常对照组(P<0.01)。移植后第6周,细胞移植组大鼠的横木行走能力明显改善,与正常对照组基本相似(P>0.05);撕胶纸能力仍低于正常对照组(P<0.01)。③阳性细胞免疫荧光检测:细胞移植组进针注射部位存在大量抗人RNP/CD45双阳性完整细胞,并向大脑中线、皮层梗死部位迁移。所植入的细胞约2.95%表达胶质纤维酸性蛋白,3.41%表达神经特异性烯醇化酶。结论:移植人脐血有核细胞能有效改善阻塞性脑卒中大鼠的运动和触觉功能缺陷。

人脐血单核细胞诱导分化为神经样细胞的实验研究

目的探讨人脐血单核细胞向神经细胞分化的潜能,为其治疗神经系统疾病提供实验依据。方法采用HES法分离脐血单核细胞(UCBMNCs),L-DMEM培养液原代和传代培养UCBMNCs,碱性成纤维细胞生长因子诱导细胞向神经细胞分化,应用流式细胞仪和免疫组化方法分析细胞中nestin、NSE阳性表达情况。结果原代UCBMNCs中有少量细胞表达nestin,阳性率为3.85%±0.88%;经诱导分化后原代(P0)和第10代(P10)细胞形态向神经样细胞转变:NSE阳性表达率分别为25.8%±4.6%、89.3%±8.5%;nestin阳性表达率分别为27.8%±5.8%和86.7%±6.8%。结论UCBMNCs具备神经样细胞分化潜能。

HLA-B27 3种检测方法的比较

目的:比较3种HLA-B27检测方法的敏感度、特异性、适用性。方法:采用微量淋巴细胞毒试验、PCR-SSP和流式细胞仪方法同时检测128份待检标本HLA-B27。结果:淋巴细胞毒试验、PCR-SSP和流式细胞仪方法敏感度、特异性、阳性预测价值、阴性预测价值分别为0.468、0.975、0.917、0.759;1.000、0.988、0.979、1.000;0.978、1.000、1.000、0.988。PCR-SSP和流式细胞仪方法敏感度显著性高于淋巴细胞毒试验,两两比较P<0.01;阴性预测价值优于淋巴细胞毒试验,两两比较P<0.05。结论:PCR-SSP和流式细胞仪方法均优于淋巴细胞毒试验,具有较好的临床适用性。

脐血采分过程中微生物污染的探讨

目的:探讨不同脐血采分过程中微生物的污染率。方法:脐血采集按美国脐血库标准操作规程(SOP);100份脐血同时按密闭式和开放式两种操作方式进行脐血造血细胞分离处理;采用全新型BACTEC9050细菌培养系统对分离前、分离后脐血进行细菌(包括需氧菌和厌氧菌)和真菌培养。结果:脐血采集后细菌和真菌污染率分别为7.0%、0.0%;密闭式分离处理后细菌和真菌污染率分别增加到8.0%、2.0%;开放式分离处理后细菌和真菌污染率分别增加到12%和2.0%。结论:脐血采分过程是导致脐血细胞微生物污染的重要原因,尤其是厌氧菌,操作过程中必须严格执行消毒、隔离、灭菌技术和操作员管理制度以尽量降低污染率。

无偿献血工作中献血者满意度调查

目的了解无偿献血工作中献血者满意程度,及时改进献血服务质量。方法设计含有10项调查内容的满意度调查表,每年2次随机发放给献血者进行问卷调查。结果满意度调查表平均回收率为70.9%;2004和2005年共调查4次,献血者对血站综合满意度均在96.0%以上;对工作人员服务态度、技术水平、注射乙肝疫苗的满意度均稳定在98.5%以上;针对调查中发现的问题积极采取整改措施后,满意度明显上升。结论科学合理地开展献血者满意度调查能有效促进血站献血服务水平的提高。

深圳市无偿献血者不规则抗体筛查及鉴定结果分析

目的了解深圳市无偿献血者不规则抗体的阳性率、分布特点及规律,提高输血安全水平。方法对深圳市29915例无偿献血者进行不规则抗体筛查,阳性者再进行特异性不规则抗体鉴定。结果29915例无偿献血者共检出111例不规则抗体阳性,总阳性率为0.37%。女性献血者阳性率为0.91%,明显高于男性献血者阳性率(0.17%)。按ABO血型分类,其不规则抗体阳性率由高至低依次为AB型(0.67%)、B型(0.51%)、A型(0.39%)、O型(0.21%)。对111例不规则抗体阳性者进行特异性不规则抗体鉴定,共106例检出特异性不规则抗体,Rh系统、Lewis系统、MN系统、P系统分别占29.25%、29.24%、25.47%、16.04%。结论在深圳市无偿献血人群中普遍开展不规则抗体筛查十分必要。

两种空气消毒方法在采供血环境中的消毒效果比较

目的比较两种空气消毒方法在采供血环境中的消毒效果。方法将对采供血环境空气消毒效果监测的2007年抽检样本作为对照组,2008年的抽检样本作为观察组。观察组采用AH2000消毒液和三氧消毒杀菌机进行空气消毒,对照组采用含有效氯2000mg/L的消毒液和紫外线进行消毒,比较两组的消毒效果。结果观察组的采供血环境空气消毒效果优于对照组,有显著性差异(P<0.01)。结论AH2000消毒液和臭氧对空气消毒效果好于含有效氯2000mg/L的消毒液和紫外线,能减少空气污染,有效降低血液的细菌污染,提高临床用血的安全。

无偿献血静脉采血拔针按压方法比较

目的探讨无偿献血静脉采血拔针按压的最佳方法。方法将1000位初次无偿献血者随机分为观察组和对照组，各500人，观察组采用献血者大拇指按压法，对照组采用四指按压法，进行对比。结果观察组献血者的疼痛感、皮下瘀血均少于对照组（P〈0．01），有显著差异、结论无偿献血者静脉采血拔针时直接由献血者的大拇指按压可明显减轻献血者的疼痛，减少皮下瘀血的发生，保护献血者血管。

红细胞谱细胞的建立和保存的初步研究

由于人类红细胞血型的个体差异,通过输血或妊娠,可能产生免疫性抗体,当含有免疫性抗体的患者输入不相合的血液,就会发生溶血性输血反应,而含有免疫性抗体的母亲妊娠血型不合的胎儿可致流产、死胎及新生儿溶血病.

脐血有核细胞分离、冻存方法的研究

目的探讨脐血有核细胞的分离、冻存方法,减少脐血的贮存空间。方法脐血采集按美国脐血库标准操作规程(SOP);68份脐血采用6%羟乙基淀粉(HES)、三联袋两次离心分离法将脐血分离成WBC层、RBC层和血浆层,脐血终体积为18～22ml。结果分离前后有核细胞计数、各系祖细胞数、CD34+细胞获得率分别为92.4%、96.5%、89.7%、80.2%、90.4%。结论证实HES分离脐血未造成有核细胞及各系祖细胞的明显损失。脐血可用简单的方法减少体积,节省液氮消耗量,降低了贮存空间,是一种用以建立脐血库的尝试。

脐血采分过程中微生物污染的调查

目的 探讨不同脐血采分过程中微生物污染率。方法 脐血采集按美国脐血库标准操作规程(SOP) ;6 6份脐血同时按密闭式和开放式两种操作方式进行脐血造血细胞分离处理 ;采用全新型BACTEC90 5 0细菌培养系统对分离前、后脐血进行细菌和真菌培养。结果 脐血采集后细菌和真菌污染率分别为 3 .0 %、1 .5 % ;密闭式分离处理后细菌和真菌污染率分别增加到 6 .0 %、3 .0 % ;开放式分离处理后细菌和真菌污染率分别增加到 7.5 %和 3 .0 %。结论 脐血采分过程是导致脐血细胞微生物污染的重要原因 ,操作过程中必须严格执行消毒、隔离、灭菌技术和操作员管理制度以尽量降低污染率。