聚合酶链反应和改良抗酸染色诊断L型结核杆菌感染

目的 探讨 L 型抗酸菌的 IK染色和 PCR检测的临床应用价值 .方法 采用 IK染色和 PCR技术 ,对结核病患者(35例 )、非特异性淋巴结炎患者 (30例 )和正常胎儿 (1 0例 )的石蜡切片进行对比研究 .结果 两种方法 (PCR和 IK染色 )对上述 3组 75例的检测阳性率分别为 80 % ,83% ;6 7% ,6 0 %及 0 % .结论 PCR技术及 IK染色 ,检测抗酸菌 L

PCR检测儿童胃液中的幽门螺杆菌DNA

幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,HP)是一种微需氧G-螺旋棒状杆菌,多隐伏在消化性溃疡和慢性活动性胃炎病变局部,是近年来发现的人类胃炎和消化性溃疡的重要致病因子。在此,我们采用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测了50例儿童胃液中HP-DNA,以探讨儿童胃液中HP感染与浅表性胃炎(简称胃炎)的关系及临床诊断的价值。 1 对象和方法 1.1 研究对象 50例检测对象,胃炎组24例,年龄2个月～12岁,平均8.5岁;非胃炎组26例,年龄4个月～13岁,平均8.6岁。均系小儿科1993年12月～1994年7月门诊和住院患者。以OLYMPUS100型电子胃镜及病理活检确诊为表浅性胃炎和非胃炎为金标准。以胃镜取胃底部胃液标本用于PCR检测。

PCR检测结核性胸水31例分析

31例结核性胸水经PCR、ELISA、培养、涂片法检测,阳性者分别为21例、20例、4例、3例;17例非结核性胸水经上述4种方法检测,PCR法阳性1例,ELISA法阳性5例,培养和涂片法均为阴性。x^2检验,PCR法与培养和涂片法分别比较,均有显著性差异(P<0.01),ELISA法与PCR法虽无显著性差异,但假阳性为5/17。提示:PCR法不愧为病原菌诊断新技术。该检测技术具有敏感、特异、快速等优点,是检测结核性胸水的优选方法。

PCR检测慢性胃炎患儿胃液中幽门螺杆菌DNA

目的检测慢性胃炎儿童胃液中幽门螺杆菌DNA，探讨其在临床诊断中的实用价值。方法应用PCR检测胃液中幽门螺旋菌DNA，应用Warthin-Starry银染色检测胃粘膜组织中的幽门螺旋菌。结果胃炎组与非胃炎组比较，敏感性为75.0％，特异性为96．2％，两组有显著性差异（P＜0．01）。PCR与Warthin－Starry银染色比较，PCR优于Warthin—Starry银染色法。结论PCR检测患儿胃液中的幽门螺旋菌DNA，具有敏感、快速、特异、高效等优点，是基因水平上检测幽门螺旋菌一项新技术，用于慢性胃炎的早期诊断，具有较好的实用价值，值得推广应用。

石蜡包埋组织中结核杆菌DNA的检测

石蜡包埋组织中结核杆菌ＤＮＡ的检测邹菊贤１刘茂贤１郭天程２齐为民１郭力１（１第四军医大学唐都医院检验科西安７１００３８２西安空军医院呼吸科）关键词石蜡包埋结核杆菌ＤＮＡ检测中图号Ｒ３６５０引言分子生物学技术把结核病的诊断提高到了分子和基因水平，从而提...

L型抗酸菌感染的病理和PCR检测

目的为了探讨抗酸菌Ｌ型感染的病理和分子生物学检测意义。方法我们采用改良抗酸染色法（ＩＫ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）法对 ３０例病理学诊断为非特异性淋巴结炎和 １５例正常胎儿石蜡包埋组织重新切片进行检测分析。结果对 ３０例非特异性淋巴结炎的ＩＫ检测，其中 ２０例显示抗酸菌 Ｌ型感染阳性，ＰＣＲ法检测 １８／３０例抗酸菌Ｌ型感染阳性，两种方法间无显著差异（Ｐ＞０．０５）；正常胎儿组织均为阴性，两组间（淋巴结炎组和正常胎儿组）Ｐ＜０．０１，有显著性差异。结论研究已证明，抗酸菌Ｌ型常发生病理学和形态学的改变，而导致临床误诊和漏诊。但因该菌的遗传物质相对稳定，故使用ＩＫ染色法和ＰＣＲ检测抗酸菌Ｌ型对结核性淋巴结炎的诊断具有重要意义，可减少临床误诊和漏诊。

PCR对352例泌尿生殖道淋病奈瑟菌感染的检测

对泌尿生殖道感染患者352例,以聚合酶链反应(PCR)检测了其分泌物中NG-DNA,并进行了分析。发现男性和女性四个年龄组NG-DNA的检出率之间均无统计学差异(P>0.05)。而男性与女性分泌物中的NG-DNA感染统计学x^2检验却显示出明显的差异(P<0.001),女性以21～30岁年龄组感染率最高。还发现,在女性人群中感染NG19.6%(29/148)同时合并有另一种性传播性疾病。

PCR快速检测泌尿生殖道人乳头瘤病毒

以PCR检测251例泌尿生殖道感染者分泌物中HPV-DNA,男性和女性4个年龄组间的感染率均无统计学差异(P>0.05)。而男性与女性间的总感染率却显示有统计学差异(P<0.05)。研究发现:绝大部分为女性,并以年龄组2、3两组较为明显(62.7%)。同时发现,女性患者合并另一种性传播性疾病者达22.3%(35/157),这可能与其免疫功能下降有关。PCR技术检测HPV实验周期短、简便快速,有利于大量标本的筛检、大范围内的流行病学调查。

聚合酶链反应对眼分泌物中沙眼衣原体的检测价值

目的:探讨聚合酶链反应在沙眼诊断中的临床应用价值。方法:应用聚合酶链反应,引物选用具有衣原体属性的16S rRNA基因,扩增检测沙眼衣原体。结果:在93例诊断为沙眼的患者中,沙眼衣原体阳性率74.2％;在178例诊断非沙眼患者中,沙眼衣原体阳性率3.4％,其检测灵敏度和特异性分别为74.2％和96.7％,两组间(沙眼组和非沙眼组)比较有显著性差异(P<0.001)。结论:聚合酶链反应对沙眼分泌物中沙眼衣原体的检测具有灵敏、特异、早期、快速的特点,对于沙眼的早期确诊有着良好的临床价值。眼科学报2000;16:124-126。

实时荧光定量PCR检测肺炎支原体DNA在小儿肺炎诊断中的应用价值

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测肺炎支原体（MP）DNA在小儿肺炎诊断中的应用价值。方法采用FQ-PCR对该院742例儿科住院患儿的血清、痰液、胸腔积液、支气管灌洗液、肺泡灌洗液临床标本进行MPDNA的定量检测。结果742例患儿中MPDNA检测总阳性率为40．3％（299／742）；男、女性患儿MPDNA阳性率的差异无统计学意义（P〉0．05）；4～〈7岁、7～〈10岁、10～〈13岁、13～16岁组，MPDNA阳性率均高于0～〈4岁组（P〈O．05）；不同种类标本的阳性率不同，由高到低依次为支气管灌洗液（96．5％）、肺泡灌洗液（83．7％）、痰液（71．7％）、胸腔积液（38．9％）、血清（6．1％）。结论4岁及4岁以上儿童易感染肺炎支原体，且随着年龄增长感染率逐渐增高；支气管灌洗液标本的MPDNA阳性率较高；FQ-PCR法检测MP DNA用于肺炎支原体感染的诊断有一定价值。

生殖道感染与不孕不育的关系

目的探讨生殖道淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(UU)感染与不孕不育的关系。方法以1 038例不孕不育症患者作为实验组,1 012例正常孕前检查者或健康体检者作为对照组,采用实时荧光定量PCR法检测各组NG-DNA,CT-DNA及UU-DNA水平。结果实验组UU-DNA核酸扩增平均拷贝数最高(1.11E+08),阳性率为63.2%(317/502),CT感染阳性率为38.1%(177/464),同时感染CT和UU的阳性率为34.9%(109/312)。NG-DNA核酸扩增平均拷贝数为9.81E+05,阳性率为33.3(24/72)。实验组NG、CT、UU和UU+CT的阳性率均明显高于对照组(P<0.05),实验组夫妇间UU和CT感染阳性率均存在相关性(P<0.01)。结论生殖道NG、CT、UU感染是导致不孕的重要因素,对不孕不育夫妇同时进行常规NG、UU、CT检测非常必要。

实时荧光定量聚合酶链反应技术在结核性脑膜炎中的诊断价值

目的用涂片、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测结核分枝杆菌,探讨其临床应用价值。方法对临床确诊的结核性脑膜炎(n=110)、可疑结核性脑膜炎(n=205)和非结核性脑膜炎(n=100)患者的脑脊液标本分别采用涂片、RT-PCR两种方法进行检测,对结果进行对比分析。结果 415例脑脊液标本中,脑脊液涂片检查阳性率为2.4%(10/415),PCR检测阳性率为12.5%(52/415);脑脊液涂片、PCR法检测110例临床确诊的结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为6.4%(7/110)、26.4%(29/110);检测205例临床可疑结核性脑膜炎患者脑脊液标本阳性率分别为1.5%(3/205)、11.2%(23/205)。比较两种方法的阳性检测率,差异有统计学意义(P<0.05),检测100例非结核患者脑脊液标本,涂片及PCR检测均为阴性。结论 RT-PCR法检测脑脊液中TB-DNA对结核性脑膜炎的诊断有决定意义,具有较高临床应用价值。

PCR检测HBV DNA与HBV血清标志物常见模式和Pre-S2相互关系研究

目的 探讨乙型肝炎病毒 (HBV)DNA与六种常见HBV血清免疫学标志物模式、前S2 蛋白抗原 (Pre -S2 )之间的相互关系及其临床检测意义。方法 采用PCR法对HBVDNA、ELISA法对HBV血清免疫学标志物、Pre -S2 同时进行检测。结果 1484例六种常见模式HBVDNA阳性率依次为 89 8% >5 5 6 % >2 1 8% >7 5 % >7 1% >6 8% ,即模式 (1) >(3) >(2 ) >(5 ) >(6 )>(4) ;而HBV血清免疫学标志阳性例数依次为 (2 ) >(1) >(3) >(5 ) >(4) >(6 )。 (2 )、(3)种模式HBVDNA与Pre S2阳性率比较P <0 0 1,其余 (1)、(4)～ (6 )种模式HBVDNA与Pre-S2 阳性检出率无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 HBV血清免疫学标志物、Pre -S2、HBVDNA的检测 ,三者缺一不可 ,ELISA法检测HBV血清免疫学标志物、Pre -S2 ,只是HBV的表型指标 ,提供HBV感染的间接证据。而PCR -HBVDNA的检测是HBV感染与否的直接证据。因此它们各自有其独特的临床检测意义。

T-SPOT.TB联合ADA和TB-DNA在诊断结核性胸膜炎中的应用价值

目的探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)技术联合胸水腺苷脱氨酶(ADA)和痰液结核杆菌(TB-DNA)测定对结核性胸膜炎的定性诊断,以达到早期诊断的目的。方法选取唐都医院2014年7月-2015年12月收治的86例结核性胸膜炎患者作为试验组,80例非结核性胸膜炎患者作为对照组,均行T-SPOT.TB检测,同时联合检查患者胸水ADA和痰液TB-DNA,比较T-SPOT.TB、ADA和TB-DNA检测与三者联合检测的应用价值。结果 86例结核性胸膜炎患者,T-SPOT.TB阳性率为84.88%(73/86),ADA阳性率为53.48%(46/86),痰液TB-DNA阳性率为31.40%(27/86),三者联合检测阳性率为93.02%(80/86)。结论 T-SPOT.TB检测联合ADA和痰液TB-DNA检测对结核性胸膜炎的诊断有较高的敏感性,对疑似结核性胸膜炎患者的快速、准确诊断具有重要的辅助诊断价值。

新型H7N9禽流感病毒的研究进展

关于新型甲型重组禽流感病毒H7N9的最新研究结果于2013-04-11在《新英格兰医学杂志》（The New England Journal of Medicine）上在线出版.研究人员从3例患者的呼吸道标本中分离到一种起源于鸟类的新型甲型重组流感病毒,并分析了相关临床、流行病学及病毒学数据,经实时逆转录聚合酶链反应检验、病毒培养及序列分析,对上述呼吸道标本中的流感病毒及其他呼吸系统病毒进行了检测,最终认为,

961例呼吸道感染患儿MP-DNA检测结果分析

目的分析肺炎支原体DNA（MP-DNA）阳性患儿的临床和实验室资料,为诊断和治疗MP感染提供依据。方法采用实时荧光定量PCR法对具有呼吸道症状的患儿进行MP-DNA检测,对其中171例MP-DNA阳性患儿的临床资料进行分析。结果 961例患儿的总阳性率为17.79%;2010~2012各年份阳性率比较差异有统计学意义（P〈0.01）;学龄前组感染率最高（P〈0.01）;第3季感染率明显高于其他3个季度（P〈0.05）;痰液和灌洗液有很高的阳性率;171例MP-DNA阳性患儿临床诊断为肺炎支原体肺炎90例,占52.93%。结论本地区MP感染率较高,且呈逐年上升趋势,学龄前儿童为高危人群,实时荧光定量MP-DNA具有快速、简便、敏感性高、特异性强的特点,适宜多种标本类型的检测,是临床上早期诊断肺炎支原体感染的有效方法。

233例患者多项实验室检测指标分析

目的分析丙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血清丙型肝炎病毒(HCV)-RNA载量、抗-HCV及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甲胎蛋白(AFP)相关实验室指标变化情况,探讨HCV感染后不同疾病阶段患者检测指标间的相关性及其在疾病进展过程中的变化,为疾病的诊治提供依据。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测患者血清HCV-RNA载量,时间分辨荧光定量法检测抗-HCV水平,全自动生化分析仪检测ALT、AST水平,化学发光法检测AFP水平。结果丙型肝炎、肝硬化及肝癌3组患者HCV-RNA载量对数值分别为5.96±1.61、5.54±1.26、5.19±1.38,丙型肝炎组明显高于肝硬化组及肝癌组,差异均有统计学意义(t=2.677、1.771,P<0.05),肝硬化组与肝癌组差异无统计学意义(t=1.612,P>0.05)。随着HCV-RNA载量升高,抗-HCV阳性率在丙型肝炎(r=0.729)、肝硬化(r=0.900)和肝癌(r=0.737)阶段均升高,呈正相关,但与抗体水平无明显相关性。肝硬化和肝癌阶段抗体水平均较丙型肝炎组低,抗体阳性率均较丙型肝炎组高,但差异均无统计学意义(P>0.05)。丙型肝炎、肝硬化及肝癌3个阶段病毒载量与AST、ALT、AFP异常率均呈正相关,但与检测水平无明显相关性。结论 HCV-RNA载量在疾病进展中有逐渐下降的趋势,提示在疾病的诊治过程中监测HCV-RNA对判断疾病的转归有重要作用;病毒载量与抗体、AST、ALT、AFP异常率均呈正相关,但与其水平无明显相关性,将抗-HCV和HCV-RNA结果有机结合是临床诊断HCV感染的最佳选择,联合检测各项生化免疫指标在正确诊断和预测疾病进展及疗效观察中具有重要临床意义。

PCR方法检测淋巴结组织中结核菌L型的研究

用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ），改良抗酸染色（ＩＫＳ）和结核菌抗体免疫组化染色（ＩＨＣ）三种方法检测６０例淋巴结组织中结核菌Ｌ型感染情况，以病理检查结果分为结核组（１３例），淋巴结非特异性炎症组（３０例）和淋巴结对照组（１７例）。各组三种方法检测阳性率分别为：ＰＣＲ８４．６％（１１／１３），６０％（１８／３０）．２３．５％（４／１７）．ｌＫＳ７６．３％（１０／１３），６６．７％（２０／３０）；１７．６％（３／１７）；ＩＨＣ８４．６％（１１／１３），６３．３％（１９／３０），１１．８％（２／１７）。三者均为阳性者为８０％。结果表明淋巴结非特异性炎症组感染率与结核组相似，与对照组间有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。提示：结核菌Ｌ型可能是引起淋巴结非特异性炎症的致病因子之一，ＰＣＲ技术在淋巴结非特异性炎症的病原学诊断上具有重要价值。