单宁酸对低剂量T-2毒素诱导小鼠结肠黏膜损伤与菌群失调的保护效应

旨在探究单宁酸(tannic acid,TA)对低剂量T-2毒素诱导小鼠结肠黏膜损伤与其菌群失调的保护机制。试验选取36只6周龄雄性C57BL/6J小鼠,随机分为3组,每组12只小鼠,分别为Ctrl组(空白对照)、T2组(1 mg·kg^(-1) T-2毒素攻毒)和T2TA组(1 mg·kg^(-1)攻毒+100 mg·kg^(-1) TA干预),T-2毒素灌胃每周3次,TA灌胃每天1次,试验期10周。试验期结束后,取小鼠的结肠组织和结肠内容物。苏木精-伊红染色和阿利新蓝-过碘酸雪夫氏染色观察结肠形态结构的改变;免疫组化染色观察结肠组织中Occludin、Claudin1、ZO-1蛋白含量的变化;RT-qPCR检测结肠组织中Occludin、Claudin1、Muc1、Muc2、Zo-1基因的表达量变化;Western blot检测结肠组织中Occludin、Claudin1蛋白的表达量变化;16S rRNA测序分析小鼠结肠菌群组成的差异。结果表明:1)低剂量T-2毒素不会引起小鼠结肠组织显著的形态学损伤和炎症反应。2)与Ctrl组相比,T2组小鼠结肠中杯状细胞的数量极显著减少(P<0.01),而T2TA组显著增加了小鼠杯状细胞的数量(P<0.05)。3)与Ctrl组相比,T2组极显著降低了黏蛋白Muc1、紧密连接蛋白Occludin、Claudin1和Zo-1 mRNA的表达水平(P<0.01),而T2TA组极显著增加了三者的表达水平(P<0.01)。4)与Ctrl组相比,T2组显著降低了小鼠Occludin蛋白的表达水平(P<0.05),极显著降低了Claudin1蛋白的表达水平(P<0.01),而T2TA组极显著增加了两者的表达水平。5)T-2毒素导致小鼠结肠菌群的多样性发生变化,TA的干预,可使T2组小鼠结肠中的有害菌Patescibacteria门、Saccharimonadales目、Candidatus-Saccharimonas属、unclassified_f__Ruminoccaceae属、臭气杆菌属以及嗜胆菌属丰度显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)降低,有益微生物颤杆菌属和norank_f__Oscillospiraceae属丰度分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)升高。综上所述,低剂量T-2毒素暴露会导致小鼠结肠黏膜屏障受损和结肠菌群失调,TA干预可以缓解T-2毒素引起的小鼠结肠黏膜损伤,调节结肠菌群结构,改善小鼠肠道健康。