芜湖地区初筛RhD阴性献血人群RHD基因分型特征

目的:了解芜湖地区献血者初筛RhD^(-)汉族人群的RHD基因分型的分子机制及分布特征。方法:收集2021年8月-2022年8月芜湖市中心血站无偿献血人群初筛RhD^(-)样本共210例,对样本的RHD基因第1、10号外显子进行PCR扩增,确定样本是否存在RHD基因。对含有D基因的82例样本RHD基因1-10号外显子进行PCR扩增及合子型分析,对55例含全部RHD外显子样本进行Sanger测序以确定基因型。结果:在210例RhD^(-)标本中,128例(60.38%)为RHD基因缺失;27例存在部分RHD外显子,包括2例RHD*DVI.3/RHD*01N.01,24例RHD*01N.04/RHD*01N.01和1例RHD-CE(2-10)/RHD*01N.01;55例含有全部RHD外显子,包括4例RHD*01/RHD*01N.01,6例RHD*15/RHD*01N.01,1例RHD*01 W.72/RHD*01N.01,1例RHD*15/RHD*01EL.01,39例RHD*01EL.01/RHD*01N.01,余下4例样本根据合子型分析确定不存在RHD基因缺失、测序显示存在1227G>A突变。结论:芜湖地区献血人群RhD^(-)D基因的分子机制存在多态性,其中RHD*01EL.01和RHD*15为本地区主要D变异型,本研究结果为本地区RhD血型鉴定和临床输血提供理论基础。

B(A)亚型2例的血清学及分子生物学鉴定

目的探讨B(A)亚型个体的血型血清学及分子生物学鉴定方法。方法选择2012年12月15日和2023年2月16日,因血型分型困难,送聊城市中心血站进行血型鉴定的2例受试者为研究对象。受试者1为女性、27岁;受试者2为男性,40岁。采用试管法对受试者的ABO血型进行血型血清学鉴定;采用PCR-序列特异性引物(SSP)法对受试者的ABO基因进行分型;采用Sanger测序法对受试者ABO基因的第6、7外显子进行测序。本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。结果①受试者1血清学表型符合AwB或B(A)亚型,受试者2血清学表型符合A2B或B(A)亚型。②受试者1的ABO基因为B(A)02和O杂合,第7外显子存在关键核苷酸杂合突变c.700C>G,其ABO基因分型为B(A).02/O.01.01。受试者2的ABO基因为B(A)04和O杂合,第7外显子存在关键核苷酸杂合突变c.640A>G,其ABO基因分型为B(A).04/O.01.01。结论仅采用血型血清学试验鉴定B(A)亚型困难,ABO基因测序可以为血清血清学试验结果提供分子生物学依据。