栽培与野生粗毛纤孔菌子实体成分分析及水提物急性毒理

对粗毛纤孔菌(Inonotus hispidus)成熟期和菌蕾期的栽培子实体及成熟期的野生子实体成分进行分析,同时对成熟期的栽培子实体水提物进行急性毒理实验。结果表明:菌株相同时,与菌蕾期的栽培子实体相比,成熟期的栽培子实体中多糖、黄酮、多酚、三萜及甾醇、粗蛋白、Na、Mg、K、Ca、Mn、Zn、必需氨基酸和总氨基酸含量均较高;与成熟期的野生子实体相比,成熟期的栽培子实体中黄酮、三萜及甾醇、多酚、粗蛋白、必需氨基酸、总氨基酸、Na、Mg、K、Ga、Mn、Zn、Se含量显著上升;所有样品的重金属含量均未超标。以粗毛纤孔菌成熟期的栽培子实体水提物(26 g·kg^(-1),为临床用量的462倍)连续灌胃14 d,小鼠饮食、饮水和行为活动均正常,且各脏器均未见异常或病变,表明粗毛纤孔菌栽培子实体水提物对小鼠无明显的急性毒性。

不同发育时期粗毛纤孔菌子实体水提物安神作用研究

本研究对不同发育时期粗毛纤孔菌子实体水提物的安神作用进行探究。采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)(300 mg/kg)3 d建立小鼠失眠模型,随机分为空白组、模型组、阳性组(地西泮1.5 mg/kg)、菌蕾组(69.36、138.71、277.42 mg/kg)、成熟组(256.04、512.07、1024.14 mg/kg)、老化组(143.20、286.39、572.78 mg/kg),连续给药7 d后,记录小鼠睡眠潜伏期、睡眠时长,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠海马组织中五羟色胺(5-HT)、谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)、多巴胺(DA)和去甲肾上腺素(NE)的含量,苏木精-伊红染色法(HE)观察小鼠海马组织的病理变化,并采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测小鼠海马组织中5-HT1AR、cAMP蛋白激酶催化亚单位和PKA的相对表达量。结果显示:与模型组相比,成熟和老化的粗毛纤孔菌子实体水提物能明显增加小鼠入睡率、缩短睡眠潜伏期、延长睡眠时长(P<0.01);HE染色法观察小鼠海马组织发现,不同发育时期的粗毛纤孔菌子实体水提物对对氯苯丙氨酸(PCPA)致失眠小鼠的海马组织神经元有一定的修复作用;酶联免疫吸附测定法检测小鼠海马组织发现,老化组能显著提高单胺类神经递质五羟色胺(5-HT)水平、降低去甲肾上腺素(NE)水平;提高氨基酸类神经递质谷氨酸(Glu)水平,对γ-氨基丁酸(GABA)水平无影响;蛋白质印迹法(Western blotting)结果表明,与模型组相比,成熟和老化各剂量组均能极显著提升对氯苯丙氨酸(PCPA)致失眠小鼠海马组织中5-HT_(1A)R、cAMP蛋白激酶催化亚单位、PKA的相对表达量(P<0.01),并呈现一定的量效关系,其中老化组的效果最为显著。其作用机制是通过提高五羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)和谷氨酸(Glu)的水平和降低去甲肾上腺素(NE)水平以及增加5-HT1AR蛋白表达量,上调cAMP-PKA信号通路起到安神作用。