百蕊草体细胞胚的分化及其内源生长调节物质的变化特性

【目的】探明百蕊草体细胞胚发生过程中的组织细胞特征及内源生长调节物质的变化规律,为建立百蕊草体细胞胚组培苗快繁技术体系提供理论参考,并为丰富百蕊草细胞分化和器官形态建成等基础理论提供基础信息。【方法】采用显微观察方法对叶片外植体诱导的百蕊草愈伤组织及不同分化培养时期的体细胞胚进行组织细胞学观察,并检测不同分化时期的体细胞胚内源激素和类似物含量、抗氧化酶活性及可溶性蛋白质含量。【结果】胚性和非胚性愈伤组织的形态和细胞结构差异明显。体细胞胚分化经历的时期有多细胞原胚(PM)、球形胚(GE)、心形胚(HE)、鱼雷形胚(TE)和子叶胚(CE)等。内源激素及类似物中反式玉米素(tZT)含量与玉米素核苷(ZR)和吲哚-3-乙酸(IAA)含量呈显著正相关(r=0.421^(*),r=0.536^(*)),与脱落酸(ABA)含量呈极显著负相关(r=-0.688^(**)),tZT与IAA、ZR对百蕊草体细胞胚发生的作用相同。ABA含量与IAA和ZR含量呈显著负相关(r=-0.401^(*),r=-0.430^(*))。赤霉素3(GA_(3))含量与IAA含量呈弱正相关性(r=0.313),作用类似,均可促进细胞和器官的伸长。水杨酸(SA)含量变化呈波浪形变化,且最高值4.56 ng/g和最低值3.29 ng/g分别出现在PM和GE时期,说明与体细胞胚发生有关。抗氧化酶中过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性持续升高,并且保持在较高水平,尤其是在胚分化后期。超氧化物歧化酶(SOD)活性从PM至GE时期迅速上升并于GE出现峰值29.19 U/(g·min)之后下降,但其活性较POD和CAT低。可溶性蛋白(SP)含量由PM至GE时期稍有下降,于HE时期升高达最大值2.24 ng/g,之后缓慢降低。SP含量呈波动性变化。【结论】百蕊草体细胞胚的发育过程与合子胚的发育过程相似,并且内源激素及类似物异戊烯腺嘌呤(IP)、tZT、ZR、IAA、GA 3、ABA、SA及抗氧化酶(POD、CAT、SOD)和SP具有不同程度的影响和调控作用。

软枣猕猴桃种苗离体快繁

为优化软枣猕猴桃种苗快繁技术体系,以其茎段、芽作为外植体,开展不同激素配比组合的MS培养基对愈伤组织诱导及增殖、不定芽分化增殖、无菌苗生根和驯化移栽等实验研究。结果表明,茎段外植体表面消毒时长6~7 min,在MS + 0.2 mg/L 2,4-D + 0.4 mg/L 6-BA + 蔗糖30 g/L + 琼脂粉7.8 g/L培养基上愈伤组织诱导率最高,达93.75%,且愈伤组织生长旺盛,呈白绿色湿润疏松状;在MS + 1.3 mg/L 6-BA + 0.25 mg/L NAA软枣猕猴桃初代培养芽苗诱导率、增殖率最高,达到93.75%,在MS + 2.0 mg/L 6-BA + 1.2 mg/L NAA培养基上增殖效率最高,达到86.6%,增殖系数达到5左右;最佳生根培养基为1/2MS + 1.5 mg/L NAA,生根率93.75%,并且每株有4~10条根,根粗苗壮;根长3.0~5.0 cm的再生植株移栽到草炭: 园土: 珍珠岩 = 2:2:1的混合基质中,成活率达86%以上。