子宫血管周上皮样细胞恶性肿瘤1例报道

血管周上皮样细胞肿瘤(PEComa)是一种良恶性潜能未定的间叶源性肿瘤,病理分化标志物表达以黑色素细胞和平滑肌细胞为特征,好发于实质器官,国内外报道病例极其少见,尤其为恶性肿瘤者更为罕见,因此缺乏诊断标准,往往需要分子病理进行确诊。本文报道的1例60岁结肠癌术后的老年女性子宫PEComa,结合其发病过程、辅助检查、病理结果及既往史对PEComa的鉴别诊断有重要意义。

以核心胜任力为基石强化培养病理规培医师科研思维

病理住院医师规范化培训不仅需要培训学员的临床技能还须培养其科研素养,从而提高规培学员的综合能力。文章从六大核心胜任力出发,探讨科研思维培养的必要性、病理规培学员科研培训面临的问题以及如何对规培学员进行科研思维培养,旨在提高规培学员的综合能力和素质,为其未来职业的发展奠定良好基础。

他喹莫德对人胶质母细胞瘤细胞恶性表型的影响及相关机制

目的 探索他喹莫德(Tasquinimod,Tasq)对胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)细胞增殖、迁移、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、干细胞特性等恶性表型的影响及相关机制,为开发Tasq作为潜在治疗GBM的药物提供研究基础。方法 通过CCK-8法、细胞凋亡染色、Transwell实验、克隆形成实验评价Tasq对不同GBM细胞系(U87、U251)增殖、凋亡、迁移和集落形成的影响;Western blot检测凋亡、EMT等相关蛋白的表达情况。利用肿瘤干细胞成球实验检测Tasq对胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSC)球体形成能力的影响,免疫荧光染色和Western blot检测GSC中干细胞特性相关蛋白的表达情况。结果 Tasq呈浓度依赖性和时间依赖性抑制U87和U251的增殖;Tasq能抑制U87和U251迁移和集落形成,诱导其发生凋亡;Tasq促进凋亡蛋白Cleaved Caspase-3表达的同时下调抗凋亡蛋白BCL-2和EMT相关蛋白(Snail、Vimentin)的表达;Tasq能显著降低GSC的成球能力及干细胞特性相关蛋白(SOX2、Nestin)的表达,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 Tasq能在体外抑制GBM细胞增殖、迁移、集落形成,诱导其凋亡,Tasq可能通过抑制GBM细胞的EMT和干细胞特性抑制其恶性进展。

PTEN蛋白在肺癌中表达的定量分析及临床意义

目的:定量分析PTEN蛋白在肺癌、肺良性病变及正常肺组织中的表达特点及其临床意义。方法:用免疫组化SP法检测肺癌组织、肺良性病变和正常肺组织中PTEN蛋白的表达,用LeicaQ500MC图像分析系统对PTEN蛋白表达的阳性强度进行定量测试。结果:PTEN在正常肺组织和肺良性病变中表达的阳性单位(PU值)呈正态分布,在肺癌中呈正偏态分布,三者间的表达差异具有统计学意义(P=0.000);肺癌组织中PTEN的表达显著低于肺良性病变和正常肺组织;肺的鳞癌、腺癌、大细胞癌和小细胞癌中PTEN蛋白表达的PU值基本相同,差异无统计学意义(P=0.789);肺癌中PTEN的表达与肿瘤的大体类型有关(P=0.023),周围型肺癌PTEN蛋白表达的PU值明显低于中央型肺癌;有淋巴结转移的肺癌组织PTEN的PU值(M=8.68)大于无淋巴结转移的肺癌组织(M=5.47,Z=-0.894,P=0.058);肺癌中PTEN的表达强度与患者年龄、性别、吸烟史、癌组织分化程度及pTNM分期均无关(P>0.05),不同肺良性病变(肺大泡、支气管扩张和肺结核)PTEN的表达差异无统计学意义(P=0.889)。结论:肺癌组织PTEN蛋白的表达明显低于非肺癌组织,且呈正偏态分布;周围型肺癌中PTEN的表达低于中央型肺癌。PTEN蛋白的表达有助于肺癌与正常肺组织及不同大体类型肺癌的区别。

胶质瘤中MKK7与c-Jun磷酸化的表达及其相关性

目的探讨胶质瘤中MKK7和c-Jun磷酸化(p-c-Jun)的表达及意义,分析两者表达的相关性。方法选取弥漫型星形细胞瘤(15例)、少突胶质细胞瘤(5例)、间变性星形细胞瘤(11例)、间变性少突胶质细胞瘤(8例)、胶质母细胞瘤(53例)及其瘤旁正常脑组织(25例)共117例,采用免疫组织化学法检测MKK7、c-Jun及p-c-Jun的表达。体外培养神经胶质瘤细胞株U87,用脂质体转染MKK4-siRNA、MKK7-siRNA和对照siRNA,48h后Westernblot检测MKK7、c-Jun及p-c-Jun的表达水平。结果胶质母细胞瘤中p-c-Jun及MKK7的表达均明显高于其他组织学类型胶质瘤及胶质母细胞瘤瘤旁正常脑组织中的表达(P=0.000,P=0.000)。随着胶质瘤WHO分级的升高,p-c-Jun及MKK7的表达增高,且与WHO分级呈明显正相关(r=0.494,P=0.000;r=0.606,P=0.000)。胶质瘤及胶质母细胞瘤瘤旁正常脑组织中MKK7与p-c-Jun的表达存在正相关关系(r=0.387,P=0.000)。沉默神经胶质瘤细胞株U87MKK7表达抑制了c-Jun磷酸化水平。结论MKK7可以通过调控JNK/c-Jun活性进而促进胶质母细胞瘤的发生。

口腔鳞状细胞癌中Tip60(KAT5)的表达及其相关性分析

[目的]探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)分化程度与Tip60(KAT5)表达相关性。[方法]选取口腔鳞状细胞共49例及癌旁正常口腔组织36例,采用免疫组化方法检测Tip60(KAT5)的表达状态。体外培养口腔鳞状细胞癌Cal27及UM1细胞株,Tip60(KAT5)抑制剂Nu9056处理Cal27及UM1细胞株后,MTT比色法检测Nu9056对Cal27及UM1细胞株增殖的影响。[结果]口腔鳞状细胞癌中Tip60(KAT5)的表达均明显高于癌旁正常组织中的表达(P=0.000);随着组织学分化程度的降低,Tip60(KAT5)的表达增高,且其表达与组织学分化程度的降低呈明显正相关(r=0.461,P=0.001);随着浓度及时间的增加,Nu9056对Cal27及UM1细胞株的增殖抑制率逐渐增加,呈浓度及时间依赖关系(P<0.05)。[结论]T ip60(KAT5)蛋白在口腔鳞状细胞癌组织中表达上调,且与其的组织学分化程度相关,Tip60(KAT5)可作为预测口腔鳞状细胞癌进展和预后的生物学指标。

伴间变特征的多形性黄色瘤型星形细胞瘤

目的探讨伴间变特征的多形性黄色瘤型星形细胞瘤的临床病理学特征、免疫表型、诊断与鉴别诊断要点及预后。方法与结果男性患者,43岁,表现为反复发作性四肢抽搐伴意识障碍,头部MRI显示左侧颞顶枕叶、侧脑室后角旁多发异常信号,边界欠清晰,伴囊性变。手术全切除病灶。部分肿瘤细胞以梭形细胞为主,呈束状或流水样排列,其间可见怪异的多核瘤巨细胞,细胞内类脂空泡形成,核分裂象易见,局部可见"地图"样坏死;另一部分肿瘤细胞形态较一致,分布均匀、背景组织疏松。两种肿瘤成分均弥漫性表达胶质纤维酸性蛋白、波形蛋白、S-100蛋白、巢蛋白、CD34和P53,Ki-67抗原标记指数约为15%;网状纤维染色肿瘤组织中可见大量网状纤维。BRAF基因检测呈阴性。结论对于多形性黄色瘤型星形细胞瘤核分裂象>5/10个高倍视野并伴坏死者,应考虑发生间变,注意与多形性和巨细胞型胶质母细胞瘤相鉴别,以免造成过度治疗。

α-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X染色体相关基因的表达及1p/19q遗传学改变在星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤及少突星形细胞瘤诊断中的意义

目的探讨a-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X染色体相关基因(ATRX)的表达及1p/19q遗传学改变在星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤及少突星形细胞瘤诊断中的意义。方法星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤及少突星形细胞瘤共53例,采用免疫组化及荧光原位杂交技术检测ATRX的表达及染色体1p/19q分子遗传学改变。结果星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤及少突星形细胞瘤中ATRX突变率(ATRX表达为阴性)分别为60.0%、44.4%及50.0%;星形细胞瘤染色体1p及19q单缺失和1p/19q共缺失率均为0%,少突胶质细胞瘤缺失率分别为54.5%、0%和45.5%,少突星形细胞瘤缺失率分别为12.5%、0%和0%,少突胶质细胞瘤染色体1p/19缺失率(包括共缺失及单缺失)与非少突胶质细胞肿瘤(包括星形细胞瘤及少突星形细胞瘤)比较差异有统计学意义(P=0.032)。联合检测ATRX表达及1p/19q缺失情况,少突星形细胞瘤与星形细胞瘤及少突胶质细胞瘤比较差异有统计学意义(P=0.046,P=0.003)。结论染色体1p/19q缺失主要发生在少突胶质细胞瘤中,对少突胶质细胞瘤的诊断具有重要价值;少突星形细胞瘤与星形细胞瘤的遗传学分子改变具有一定的差异性。

胶质瘤LDHA和突变型p53蛋白联合表达的临床病理学意义

目的探讨LDHA/p53联合表达在胶质瘤临床病理学中的意义。方法按照2016年WHO中枢神经系统肿瘤新分类,分析68例胶质瘤LDHA和突变型p53蛋白的表达特点及其与临床病理特征的关系。结果 68例胶质瘤中,LDHA单独高表达多为高级别胶质瘤,占48.5%;突变型p53高表达则多为胶质母细胞瘤,占26.5%。LDHA/p53联合表达在胶质母细胞瘤中显著增高,占22.1%(P=0.005)。高级别胶质瘤中LDHA/p53联合表达增多,占27.9%(P=0.002)。结论 LDHA/p53联合表达有助于高级别胶质瘤的诊断,对胶质母细胞瘤的诊断也具有提示作用。

白花蛇舌草提取物通过下调Hippo-YAP信号通路促进结肠癌细胞凋亡

目的探讨白花蛇舌草提取物熊果酸、齐墩果酸对结肠癌细胞增殖与凋亡的影响及其机制。方法不同浓度的熊果酸、齐墩果酸作用结肠癌(HCT-8)细胞24、48、72 h后,CCK-8法、平板克隆形成实验检测HCT-8细胞的存活情况。筛选最佳实验条件,将细胞分为对照组和实验组,各组细胞做成细胞爬片,细胞免疫荧光检测YAP1蛋白水平。各组细胞消化离心做成细胞蜡块,免疫组织化学方法检测YES相关蛋白(YAP1)、p53基因(p53)、尾型同源盒转录因子2(CDX-2)、白介素6(IL-6)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源等位基因(PTEN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的蛋白水平。结果白花蛇舌草提取物可不同程度抑制结肠癌HCT-8细胞的增殖。细胞免疫荧光结果显示,对照组YAP1蛋白表达较实验组强。免疫组化结果显示YAP1的表达与TNF-α的表达有一定相关性。结论白花蛇舌草提取物通过抑制Hippo-YAP信号通路的活性,抑制结肠癌HCT-8细胞的增殖,诱导其凋亡。白花蛇舌草提取物可能是一种潜在的肠癌治疗药物。

三种方法检测胃黏膜活检标本幽门螺杆菌感染的病理诊断价值

目的探讨不同检测方法对胃黏膜活检标本中幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)感染的诊断价值。方法收集胃黏膜活检标本200例,采用美蓝染色、荧光染色及免疫组化染色检测HP的感染情况,分析各方法HP检测结果的一致性。结果胃黏膜活检标本中HP的检出率:美蓝染色75%(150/200),荧光染色79%(158/200),免疫组化染色68.5%(137/200)。荧光染色的阳性率最高,κ系数检验结果显示,三种方法的检测结果高度一致,差异有统计学意义(P<0.05),免疫组化染色与美蓝染色的一致性最高(κ=0.840)。HP的感染率与炎症程度、活动度呈正相关,与肠化生呈负相关(P<0.05)。结论免疫组化染色可在蛋白水平检测HP的表达,并可预测疾病的发展,是检测胃黏膜活检标本中HP的最佳方法。

黄芪注射液对人子宫内膜癌细胞β-catenin和E-cadherin表达的影响

目的研究黄芪注射液对子人宫内膜癌HEC-1-B细胞β-catenin和E-cadherin基因和蛋白表达的影响。方法分别采用RT-PCR和免疫组化的方法检测β-catenin和E-cadherin基因和蛋白的表达。用含不同浓度的黄芪注射液的条件培养基分别培养人子宫内膜癌细胞株HEC-1-B 24、48、72 h后,应用RT-PCR检测各组细胞中β-catenin、E-cadherin基因表达,应用免疫细胞化学法检测HEC-1-B中β-catenin、E-cadherin蛋白表达。结果 RT-PCR结果显示,随着子宫内膜癌细胞在含有黄芪注射液的条件培养基中培养时间的延长,细胞中E-cadherin基因表达逐步增强(P<0.05),而β-catenin基因表达逐步减弱(P<0.05)。免疫组化染色结果显示,与对照组比较,黄芪注射液可明显降低子宫内膜癌HEC-1-B细胞中β-catenin蛋白的表达、增加E-cadherin蛋白的表达(P<0.05),而且黄芪注射液浓度越高处理时间越长β-catenin表达更低(P<0.05),黄芪注射液浓度越高E-cadherin表达更高(P<0.05)。结论黄芪注射液可呈剂量和时间依赖性促进E-cadherin基因和蛋白的表达、抑制β-catenin基因和蛋白的表达,从而使WNT信号通路受到抑制。这可能是其发挥抗肿瘤作用的机制之一。

个性化抗原修复方法在肾活检组织石蜡切片免疫荧光染色中的应用

肾脏活检的病理诊断在肾脏病学中起到重要作用,它的发展与病理学技术密切相关。肾脏活检的病理检查包括光学显微镜下HE、特殊染色、免疫组化,荧光显微镜下的免疫荧光(immunofluorescence,IF)染色,电镜等多种检查^([1-2])。其中免疫荧光在肾活检病理诊断中起相当重要的作用。日常工作中多采用冰冻切片免疫荧光染色(immunofluorescence of frozen tissue sections,IF-F)。

不同级别宫颈上皮内瘤变中p16、p53及Ki-67的表达及意义

目的探讨不同级别宫颈上皮内瘤变(CIN)患者宫颈上皮内p16、p53及Ki-67表达的差异。方法采用免疫组化方法检查CIN患者(其中CIN I级73例、CIN II级79例、CIN III级96例)和正常宫颈上皮(40例)内p16、p53及Ki-67的表达。结果 p16在正常宫颈上皮组织、CIN I、II、III级患者宫颈组织中表达的阳性率分别为17.5%、64.4%、94.9%和97.9%;而p53在各组相应的阳性率分别为20.0%、20.5%、40.5%和38.5%;Ki-67在各组相应的阳性率分别为30.5%、58.9%、94.9%和96.9%。与正常宫颈上皮组织相比,p16和Ki-67在CIN I级组织中表达的阳性率明显升高(P<0.05或0.01);p16、p53和Ki-67在CIN II级和III级组织中表达的阳性率亦高于正常宫颈组织(P<0.05或0.01);与CIN I级相比,CIN II级和III级的p16、p53及Ki-67表达阳性率明显升高(P<0.05或0.01)。结论 p16、p53及Ki-67水平的检测有助于CIN的早期诊断和分级。

阳性淋巴结对数比对Ⅲ期结直肠癌预后的预测价值

目的探讨阳性淋巴结对数比(log odds of positive lymph nodes,LODDS)对Ⅲ期结直肠癌预后的预测价值。方法收集177例结直肠癌患者相关临床病理资料,记录患者的阳性淋巴结数、阴性淋巴结数,计算LODDS,按LODDS四分位数将患者分为四组,所有患者均完成5年的随访。结果四组患者在5年随访中,生存率分别为75.0%、57.1%、46.9%、43.2%。随着LODDS的增长,生存率也呈降低趋势。相对于LODDS最低四分位的患者,LODDS最高四分位患者的5年生存率明显下降(75.0%比43.2%,P<0.001)。多因素Cox回归分析表明LODDS、组织分化程度是Ⅲ期结直肠癌患者5年生存的独立预后因子。结论LODDS为Ⅲ结直肠癌的5年生存率的独立预后指标。

甲状腺内胸腺癌1例报告及文献复习

目的:探讨甲状腺内胸腺癌(ITTC)的临床病理学特征、治疗方法和预后,加强临床医生对该病的认识。方法:观察1例ITTC患者的临床表现。肉眼观察肿瘤大体形态表现,行实验室检查和影像学检查,观察甲状腺肿物细针穿刺细胞学表现,光镜下观察肿瘤组织形态表现,对肿瘤组织行免疫组织化学染色和原位杂交检测,术后3和11个月对患者进行随访,并结合文献进行复习。结果:ITTC患者临床主要表现为甲状腺内质稍硬肿物。细胞学检查显示肿瘤细胞呈三维立体结构,部分细胞可见核仁。组织学检查显示癌细胞呈巢状或岛状分布,并向鳞状细胞分化;其周围纤维组织增生,伴淋巴细胞浸润;伴右颈部淋巴结转移。免疫表型检测,癌细胞表达CD117、CD5和P63等,不表达TdT和TTF-1,EBER-ISH (-)。病理诊断为ITTC伴颈部淋巴结转移。患者在术后3和11个月复查CT均未见复发及转移。结论:ITTC恶性程度低,可复发及转移,联合手术及放疗,患者预后良好。

上调miR-34c-5p对鼻咽癌细胞HONE-1增殖和侵袭的影响

目的探讨上调mi R-34c-5p对鼻咽癌细胞HONE-1增殖和转移能力的影响。方法利用定量PCR分析mi R-34c-5p在鼻咽癌细胞株HONE-1和正常鼻咽细胞株NP69中的表达情况;利用克隆形成实验和Transwell实验分析上调mi R-34c-5p表达对mi R-34c-5p mimic转染组、mi R-34c-5p对照序列组和未处理组增殖和侵袭能力的影响。结果 mi R-34c-5p在鼻咽癌细胞株HONE-1的表达水平低于正常鼻咽细胞株NP69;mi R-34c-5p mimic转染组鼻咽癌细胞HONE-1的克隆形成和侵袭能力明显低于mi R-34c-5p对照序列组和未处理组(均P<0.05)。结论 mi R-34c-5p的下调与鼻咽癌的生物学功能增殖和侵袭能力相关,是鼻咽癌治疗的潜在靶点。

荜茇酰胺通过诱导口腔鳞癌细胞自噬抑制增殖

【目的】探讨荜茇酰胺(PPLGM)对口腔癌存活的影响及机制。【方法】体外培养口腔鳞状细胞癌Cal27及UM1细胞株,经不同浓度的荜茇酰胺处理后,MTT比色法检测荜茇酰胺对增殖的影响,蛋白质印迹法检测胞内微管相关蛋白轻链3-I、3-Ⅱ(LC3-I、LC3-Ⅱ)、Beclin1、p62、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及ribosomal S6(S6)的表达或活性变化;用自噬抑制剂3-Methyladenine(3-MA)或者Bafilomycin A1(BAFA1)和荜茇酰胺共处理细胞后,检测LC3-Ⅱ、p62表达和细胞活力。【结果】与对照组比较,荜茇酰胺显著抑制Cal27及UM1细胞株增殖能力,呈浓度及时间依赖性(P<0.05);Western blot结果显示,不同浓度(1.0、3.0和5.0μmol/L)荜茇酰胺处理细胞均使LC-I、LC3-Ⅱ表达水平显著高于对照组(P<0.05),而Beclin1和p62表达低于对照组(P<0.05);荜茇酰胺处理组中p-mTOR和p-S6磷酸化水平显著低于对照组(P<0.05);与单独荜茇酰胺处理比较,3-MA和荜茇酰胺共处理使胞内LC3-I和LC3-Ⅱ表达水平明显下降,p62表达升高(P<0.05),但BAFA1和荜茇酰胺共处理使细胞内p62表达升高(P<0.05),LC3-Ⅱ表达水平无明显改变;3-MA和B AFA1处理都能拮抗荜茇酰胺对细胞活力的抑制效应。【结论】荜茇酰胺通过抑制mTOR/S6通路活性诱导口腔鳞癌细胞发生自噬,进而抑制增殖。

通过抑制ATM上调Bim促进小脑颗粒神经元凋亡

【目的】研究抑制共济失调毛细血管扩张突变(ATM)蛋白对SD大鼠小脑颗粒神经元(CGN)凋亡的影响及机制。【方法】将原代培养7～8 d的CGN分为25 K组、5 K组和ATM抑制组。分别应用含有25和5 mmol/L KCl的培养基处理25 K组和5 K组,建立体外神经元存活和凋亡模型。在25 K神经元存活模型中,应用ATM抑制剂KU-55933(10μmol/L,ATM抑制组)、KU-55933联合Mithramycin A(1μmol/L,MMA组)或Chromomycin A3(0.3μmol/L,CMA3组)处理,用Western Blot方法检测p-ATM、ATM、Bim、Caspase 3的表达水平,用Hoechst染色法观察并统计核固缩情况。【结果】Western Blot结果显示,与25 K组比较,5 K组和ATM抑制组的Bim、Caspase 3蛋白表达均上调(P <0.05)。核染色结果显示,与25 K组比较,5 K组和ATM抑制组核固缩率均明显增多(P <0.05)。与ATM抑制组比较,MMA组和CMA3组中Bim表达、Caspase3活性及核固缩率均明显减少。【结论】抑制ATM上调Bim活性,促进小脑颗粒神经元凋亡。

18~30岁女性乳腺癌的4种分子亚型与影像学特征的相关性

目的探讨18~30岁女性乳腺癌的分子亚型与影像学特征的相关性。方法回顾性分析195例经术后病理确诊的原发年轻乳腺癌的影像及病理资料,用免疫组织化学检测ER、PR、HER2及Ki-67,HER2(++)者再行荧光原位杂交检测,分为Luminal A型(n=55)、Luminal B型(n=79)、HER2过表达型(n=41)和三阴性乳腺癌(n=20)。比较各亚型的临床病理特征、X线以及超声特点。结果195例年轻乳腺癌的分子分型比例依次为Luminal B型>LuminalA型>HER2过表达型>三阴性,LuminalA型乳腺癌患者更多为临床T1期和组织学Ⅰ级(P<0.05),Luminal B型更多为临床T2期和组织学Ⅱ级(P<0.05),三阴性乳腺癌更多为临床T3期和组织学Ⅲ级(P<0.05)。X线结果显示:LuminalA型以肿块伴钙化,细小多形性,边缘毛刺为多(P<0.05)。Luminal B型以肿块,细小多形性和线样,边缘模糊为多(P<0.05),HER2过表达型以钙化,线样或线样分枝状,边缘模糊为多(P<0.05),三阴性乳腺癌以肿块,细小多形性,边缘模糊为多(P<0.05)。超声结果显示:三阴性乳腺癌内部回声以均匀为多,其它三种类型以不均匀为多(P<0.05)。结论18~30岁青年女性乳腺癌的免疫组织化学分子亚型与部分影像学特征密切相关。术前可根据X线及超声综合表现预测乳腺癌分子分型。