双重PCR检测沙门氏菌和变形杆菌方法的建立

目的:建立快速鉴定腹泻患者粪便标本中沙门氏菌和变形杆菌的双重聚合酶链式反应(PCR)方法。方法:针对沙门氏菌属特异基因inv A和变形杆菌属特异基因tuf分别设计特异性引物,将天津某医院肠道门诊腹泻患者粪便标本经SS培养基分离培养后,对可疑菌株同时进行inv A-tuf基因双重PCR鉴定和生化鉴定,比较两种方法结果的一致性;对沙门氏菌进一步行血清学分型。结果:双重PCR和生化反应都各自鉴定得到沙门氏菌31株和变形杆菌62株,而且二者鉴定结果完全一致;31株沙门氏菌包括鼠伤寒、肠炎等常见血清型和格兰扁、菲尔摩雷等罕见血清型,均能扩增出283 bp长度片段,62株变形杆菌包括48株奇异变形杆菌、8株普通变形杆菌、2株潘氏变形杆菌、4株产黏液变形杆菌,均能扩增出541bp长度片段。结论:inv A-tuf基因双重PCR方法能够快速可靠地鉴定SS培养基上生长的沙门氏菌和变形杆菌。

降钙素原和C反应蛋白诊断尿脓毒症的价值

目的：探讨降钙素原（PCT）和C反应蛋白（CRP）对尿脓毒症的诊断价值。方法：将102例符合纳入标准的泌尿系感染患者分为尿脓毒症组和非尿脓毒症组,比较尿脓毒症和非尿脓毒症患者血清PCT和CRP之间的差异,并绘制PCT和CRP诊断尿脓毒症的受试者工作曲线（ROC）。结果：102例泌尿系感染患者中,尿脓毒症患者43例,非尿脓毒症患者59例;尿脓毒症组PCT、CRP显著高于非尿脓毒症组（P均〈0.001）;PCT、CRP在尿脓毒症的ROC曲线下面积分别是0.759、0.710（95%置信区间0.608~0.811、0.666~0.851）,在各自最佳工作位点,PCT和CRP诊断尿脓毒症的敏感性分别是0.907和0.419,特异性分别是0.610和0.932,阳性预测值分别是0.629和0.818,阴性预测值分别是0.900和0.688。结论：PCT和CRP是诊断尿脓毒症的良好指标。

当飞利肝宁胶囊联合干扰素对慢性乙型肝炎肝纤维化血清SII、NLR、PLR、MLR水平的影响

目的探讨当飞利肝宁胶囊联合干扰素对慢性乙型肝炎肝纤维化患者血清系统免疫指数(SII)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、血小板/淋巴细胞比值(PLR)、混合淋巴细胞培养反应(MLR)水平的影响。方法选取2018年7月—2020年7月在医院消化内科收治的慢性乙型肝炎肝纤维化患者126例,根据随机数字法,将126例患者分为两组各63例。对照组患者给予干扰素,观察组患者在对照组的基础上给予当飞利肝宁胶囊,两组患者均持治疗6个月。对比两组患者的临床疗效、全身乏力、食欲减退、腹胀、肝区疼痛等症状好转时间,对比两组患者的血清SII、NLR、PLR、MLR水平及血清炎性因子白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素1β(IL-1β)水平。结果观察组临床疗效有效率高于对照组(P<0.05);观察组患者治疗后的全身乏力、食欲减退、腹胀、肝区疼痛好转时间均低于对照组(P<0.05);观察组治疗后肝功能谷丙转氨酶(ALT)、谷氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)水平低于对照组(P<0.05);观察组肝纤维化透明质酸酶(HA)、层粘连蛋白(LN)、IV型胶原(IV-C)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)水平低于对照组(P<0.05);观察组患者治疗后的血清SII、NLR、PLR、MLR水平均高于对照组(P<0.05);观察组患者血清炎性因子IL-4、IL-12、IL-1β水平低于对照组(P<0.05),观察组不良反应总发生率低于对照组(P<0.05)。结论当飞利肝宁胶囊与干扰素联合治疗慢性乙型肝炎肝纤维化,能改善患者肝功能及肝纤维化的程度,并能使血清SII、NLR、PLR、MLR水平及炎性因子水平达到有效降低,对机体肝脏恢复起到较好作用。

急性腹泻患者奇异变形杆菌对抗菌药物的耐药研究

目的了解分离自急性腹泻患者奇异变形杆菌的耐药状况,为防治其感染与合理使用抗菌药物提供依据。方法收集2013—2014年天津医科大学第二医院和天津医科大学总医院肠道门诊急性腹泻患者粪便标本进行分离培养和生化鉴定,对鉴定得到的奇异变形杆菌进行抗菌药物敏感性试验和1类整合子聚合酶链式反应(PCR)扩增,对部分可疑菌株进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型确证试验和PCR扩增ESBLs基因(TEM、OXA和CTX-M)并测序,对ESBLs阳性菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型。结果共非重复分离到奇异变形杆菌277株,对其中268株进行了药敏试验(其余9株未能复苏成功)。耐药率较高的为甲氧苄啶/磺胺甲噁唑(30.2%)、氨苄西林(25.4%)、萘啶酸(25.7%)、链霉素(21.6%)和氯霉素(21.3%),多重耐药率为24.6%(66/268)。对三代头孢、环丙沙星和亚胺培南等的耐药率小于10%,但有4株菌对亚胺培南、三代头孢、氟喹诺酮、复方磺胺和氯霉素均不敏感。1类整合子阳性率为22.8%(61/268)。在头孢噻肟耐药株中随机选取的3株菌(1062、1505和1650)ESBLs表型均阳性,均携带CTX-M型超广谱β-内酰胺酶基因,其中2株还同时携带TEM和(或)OXA非超广谱β-内酰胺酶基因。PFGE聚类分析显示,1505和1650相似度为85.7%,前两者与1062相似度为58.1%。结论本地区急性腹泻患者分离的奇异变形杆菌呈现明显多重耐药,1类整合子携带率较高,出现ESBLs阳性且同时对碳青霉烯和氟喹诺酮均耐药的菌株,对公众健康构成威胁,临床和非临床领域均需要合理使用抗菌药物。

失代偿期肝硬化患者并发医院内感染病原菌类别及其耐药特点分析

目的探讨失代偿期肝硬化患者并发医院内感染病原菌类别及耐药特点,为失代偿期肝硬化患者医院内感染的防治提供参考依据。方法2018年1月~2020年1月我科诊治的失代偿期肝硬化患者67例,分析67例患者并发医院内感染发生情况,采用VITEK-2Compact全自动微生物分析系统鉴定感染病原菌种类,采用K-B纸片琼脂扩散法对病原菌进行药敏试验。结果在本组67例失代偿期肝硬化患者中,发生医院内感染者24例(35.8%),其中腹腔感染占比为45.8%、肺部感染占比为33.3%和泌尿道感染占比为20.8%;感染组年龄≥60岁、消化道出血、住院时间长和Child C级占比显著高于未感染组(P<0.05),而血清白蛋白水平和预防性应用抗生素占比显著低于未感染组(P<0.05);Logistic回归分析发现年龄(OR=1.16,95%CI:1.09~1.24)、住院时间(OR=1.13,95%CI:1.05~1.93)、消化道出血(OR=1.50,95%CI:1.09~2.09)、血清白蛋白(OR=1.11,95%CI:1.02~1.20)、是否预防性应用抗生素(OR=1.48,95%CI:1.21~1.81)为失代偿期肝硬化患者并发医院内感染的影响因素(P<0.05);在24例感染患者标本中培养出37株病原菌,其中革兰阴性菌21株(56.8%),革兰阳性菌11株(29.7%),真菌5株(13.5%);大肠埃希菌对氨苄西林和哌拉西林耐药率高,肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药率均低于16.7%,金黄色葡萄球菌对庆大霉素的耐药率为60.0%。结论失代偿期肝硬化患者并发医院内感染风险高,其影响因素多且复杂,病原菌分布以革兰阴性菌为主,但病原菌耐药现象明显,临床上需加强对高危感染人群的重视,必要时预防性应用敏感性抗菌药物,对减少并发医院内感染的发生尤为重要。

血浆髓样细胞触发受体2联合终末期肝病模型评分对乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者近期预后的预测价值

目的探讨血浆髓样细胞触发受体2(TREM-2)联合终末期肝病模型(MELD)评分对乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者近期预后的预测价值。方法选取2019年1月-2021年1月我院收治的142例HBV-ACLF患者为HBV-ACLF组,随访90 d根据患者结局分为死亡组(n=52)和存活组(n=90),另选取同期58名体检健康者为对照组。ELISA法检测血浆白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、髓样细胞触发受体2(TREM-2)水平,计算HBV-ACLF患者MELD评分。分析HBV-ACLF患者血浆TREM-2与IL-6、IL-8水平的相关性。多因素logistic回归分析HBV-ACLF患者近期预后不良影响因素。ROC曲线分析血浆TREM-2水平联合MELD评分对HBV-ACLF患者近期预后的预测价值。结果与对照组比较,HBVACLF组血浆IL-6,IL-8,TREM-2水平升高(P<0.05)。HBV-ACLF患者血浆TREM-2与IL-6,IL-8水平呈正相关(r/rs=0.762、0.857,均P<0.001)。中性粒细胞比值、总胆红素、血肌酐、国际标准化比值、MELD评分、IL-6、IL-8、TREM-2为HBV-ACLF患者近期预后不良的独立危险因素(P<0.05)。TREM-2、MELD评分、TREM-2+MELD评分预测HBV-ACLF患者近期预后的曲线下面积分别为0.771、0.795、0.858,TREM-2+MELD评分预测HBV-ACLF患者近期预后的曲线下面积大于TREM-2,MELD评分单独预测(P<0.05)。结论血浆TREM-2水平和MELD评分升高为HBV-ACLF患者近期预后不良的独立危险因素,血浆TREM-2联合MELD评分能提升HBV-ACLF患者近期预后不良的预测价值。

血清降钙素原在尿路感染诊断中的应用价值

目的分析尿路感染患者中合并尿路梗阻者或合并菌血症者血清中降钙素原（PCT）的水平，探讨PCT在尿路感染诊断中的应用价值。方法将2013年1至12月天津医科大学第二医院感染内科住院治疗的尿路感染患者102例，分为尿路梗阻组（60例）和无尿路梗阻组（42例），比较组间血清PCT的差异，绘制PCT诊断尿路梗阻的受试者工作特征（ROC）曲线。102例患者中做过血培养的44例，根据培养结果分成血培养阳性组（13例）和血培养阴性组（31例），比较组间血清PCT的差异，绘制PCT诊断菌血症的ROC曲线。结果尿路梗阻组中位PCT为1．71（0．10—53．20）mg／L，高于无尿路梗阻组的0．21（0．10～10．00）mg／L（P〈0．001）；血培养阳性组PCT为2．73（0．10—41．60）mg／L，高于血培养阴性组的0．42（0．10～53．20）mg／L（P=0．030）。PCT诊断尿路梗阻的ROC曲线下面积是0．80（95％置信区间0．71—0．89），诊断菌血症的ROC曲线下面积是0．71（95％置信区间0．53～0．88）；PCT诊断菌血症和尿路梗阻的阴性预测值（NPV）最大时分别是0．90和0．87，对应的PCT值分别是0．51mg／L和0．35mg／L。结论PCT对判断尿路感染患者合并尿路梗阻或菌血症具有一定的参考价值。

肠炎沙门菌感染暴发的病原学检测及基因分型研究

目的分析6例聚集性急性腹泻患者的临床特征,检测病原菌并研究其同源性。方法收集患者临床特点及常规化验资料,采集粪便标本分离培养病原菌,进行生化鉴定、invA基因PCR鉴定、抗菌药物敏感性检测(K-B法和微量肉汤稀释法)、血清学分型、多位点序列(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型。结果 6例患者临床诊断急性细菌性痢疾5例、急性胃肠炎1例,6份粪标本均检出沙门菌属,invA基因阳性率100.0%;全部菌株均为肠炎血清型,MLST分型均为ST11型,PFGE分型全部菌株带型一致;沙门菌属对环丙沙星、头孢曲松、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶等抗菌药物敏感率达100.0%。结论 invA基因可作为沙门菌属快速诊断的靶基因,该次聚集性急性腹泻为ST11型肠炎沙门菌相同克隆株所致感染暴发,应加强对急性腹泻病原学和基因分型监测。

临床分离胥伐成格隆沙门菌的抗菌药物敏感性和毒力基因研究

目的：研究临床分离胥伐成格隆沙门菌的抗菌药物敏感性和毒力基因特征,为防治感染和了解其流行趋势提供依据。方法收集2014年5月至10月我院肠道门诊急性腹泻患者的临床资料,采集患者粪便标本进行沙门菌分离培养、生化鉴定、血清型分型,对鉴定得到的胥伐成格隆沙门菌进行抗菌药物敏感性检测、脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型和多位点序列分型（MLST）,PCR扩增沙门菌毒力岛SPI1-5代表性基因和调节基因、毒力质粒基因和细胞致死膨胀毒素（ CDT ）基因,对cdtB、pltA和pltB的扩增产物进行序列分析。结果共检测到108株非重复非伤寒沙门菌,其中16株（14.8%）为胥伐成格隆沙门菌。16株胥伐成格隆沙门菌对氟喹诺酮、氨苄西林、头孢曲松、复方新诺明等11种常用抗菌药物敏感率为100%,PFGE分型结果为A克隆14株、B克隆1株和C克隆1株, A克隆中有8例患者有明确的共同饮食来源,提示为感染暴发；16株胥伐成格隆沙门菌MLST分型均为ST241型,SPI1-5代表性基因invA、sitC、hilA、sseL、sifA、mgtC、siiE、sopB和调节基因phoP以及CDT基因cdtB、pltA和pltB均阳性,毒力质粒基因pefA、prot6E、spvB均为阴性；本研究中的胥伐成格隆沙门菌CDT基因与伤寒沙门菌相应基因的DNA和氨基酸序列相似均大于97%。结论本研究分离到多克隆ST241型胥伐成格隆沙门菌临床株,虽对常用抗菌药物尚保持敏感,但携带SPI1-5毒力基因和伤寒毒素CDT基因,应关注胥伐成格隆沙门菌临床感染在我国的变化趋势和危害,开展持续监测和研究。

重症肝病合并真菌感染尿RNA氧化产物8-氧化鸟苷水平及临床意义

目的探究重症肝病合并医院真菌感染患者尿RNA氧化产物8-氧化鸟苷(8-oxoGsn)水平变化及意义。方法选择山东第一医科大学附属济南人民医院67例重症肝病患者,根据医院感染情况分为真菌感染组(n=7)、细菌感染组(n=24)、无感染组(n=36),检测血清感染相关指标[白细胞介素-6(IL-6)、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)]和尿8-oxoGsn水平。结果67例重症肝病患者发生医院感染31例,共分离出62株病原菌,革兰阳性菌24株,占38.71%,革兰阴性菌31株,占50.00%,真菌7株,占11.29%。细菌感染组、真菌感染组IL-6、PCT、CRP、WBC水平高于无感染组(P<0.05),细菌感染组PCT水平高于真菌感染组(P<0.05);尿8-oxoGsn水平比较为细菌感染组>真菌感染组>无感染组(P<0.05);重症肝病真菌感染患者尿8-oxoGsn水平与IL-6、PCT、CRP、WBC水平正相关(r=0.769、0.845、0.963、0.756,P<0.05);尿8-oxoGsn判断重症肝病是否合并医院感染、鉴别真菌或细菌感染的曲线下面积为0.978、0.780(P<0.05),灵敏度、特异性为87.00%和97.22%,100.00%和58.33%。结论重症肝病合并医院真菌感染患者尿8-oxoGsn与IL-6、PCT、CRP、WBC水平正相关,可用于诊断是否合并医院感染,并鉴别感染病原菌类别。

艾滋病感染者/患者合并感染乙肝病毒、丙肝病毒、梅毒的检测及研究

目的研究对艾滋病感染者/患者(HIV/AIDS)合并感染丙肝病毒(HCV)、乙肝病毒(HBV)、梅毒(TP)进行检测的作用与效果。方法纳入我院收治的134例HIV/AIDS病例,纳入时间为2016年11月-2019年2月,借助酶联免疫法(ELISA)对HIV/AIDS患者的HCV、HBV、TP等各项抗体进行检测,借助流式细胞仪对HIV感染患者的CD4/CD8细胞进行检测,观察比较其结果。结果有89例HIV/AIDS患者合并感染HCV,感染率为66.42%,有42例合并感染梅毒,感染率为31.34%,29例合并感染HBV,感染率为21.64%。结论对于HIV/AIDS患者来说,HCV就是其十分普遍的合并感染的一种病原体,在对其实施治疗期间,应注重各项护肝对策,总体进行治疗。