microRNA在大鼠肥胖模型心肌中的变化

目的建立高脂饮食诱导肥胖易感(obesity prone,OP)大鼠模型,筛查肥胖大鼠心脏微小RNA(microR-NA,或miRNA)的表达变化,寻找肥胖诱发心肌损伤及心律失常相关的miRNA。方法高脂饲料喂饲健康雄性SD大鼠10周后,筛选出肥胖大鼠动物模型。实验结束后,测量体脂肪含量,并收集血清,以检测血脂水平,同时取心脏组织常规抽提总RNA,采用含有468种miRNA的芯片检测系统进行miRNA表达谱差异分析。结果肥胖大鼠睾周脂肪、肾周脂肪、网膜脂肪、体脂肪含量均显著高于基础对照组,甘油三酯水平和总胆固醇显著高于基础对照组;与基础组相比,肥胖模型组的miRNA表达谱中明显差异表达的miRNA共有7个,其中miR-196a、miR-205、miR-369-5p表达上调,miR-206、miR-483、miR-341和miR-204表达下调。结论在大鼠肥胖模型中,部分心肌miRNA的表达发生明显变化,提示miRNA可能参与肥胖诱发心肌损伤和心律失常的调节作用。

三种分子诊断技术对儿童肺结核的诊断价值

目的探讨三种分子诊断技术对儿童肺结核的诊断效能,为儿童肺结核的诊断寻求简单、快速、准确的新方法。方法搜集哈尔滨市胸科医院儿童结核科、哈尔滨市儿童医院呼吸科、哈尔滨医科大学附属第一医院儿科2016年9月至2018年6月收治的2个月至14周岁的疑似肺结核患儿共186例.最后临床诊断肺结核者119例,其中低龄儿54例(45. 4%),年长儿65例(54. 6%);非结核病者67例,其中低龄儿31例(42. 3%),年长儿36例(53. 7%)。应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescen quantitative PCR.FQPCR)、实时荧光核酸恒温扩增检测技术(simultaneous amplification and testing,SA丁)和耐药基因芯片技术分别检测患儿胃液和痰液(年长儿)中的结核分枝杆菌,评价各方法的诊断效能。结果以临床诊断为标准.FQPCR、SAT、耐药基因芯片检测胃液中MTB的敏感度分别为 81.51%(97/119)、78. 15%(93/119)、73.11%(87/119),特异度分别为 86. 57%(58/67)、98. 51%(66/67)、92.54%(62/67).K“pM值分别为0.653,0. 709,0. 603. 3种方法检测年长儿胃液中MTB的敏感度分别为 80. 00%(52/65)、73. 85%(48/65)、67. 69%(44/65),特异度分别为 75. 00%(27/36)、97. 22%(35/36)、88. 89%(32/36);检测年长儿痰液中MTB的敏感度分别为47. 69%(31/65)、41. 54%(27/65)、36. 92%(24/65),特异度分别为88.89%(32/36)、97. 22%(35/36)、91. 67%(33/36),各方法检测的敏感度胃液均高于痰液,差异均有统计学意义(x^2值分别为14.696J3. 898、12. 334,P值均为0.000),各方法检测的特异度胃液和痰液之间差异均无统计学意义(x^2值分别为2. 347,0. 000,0. 158,P值分别为0. 126、1. 000、0. 691);胃液总的阳性检出率为87.69%(57/65),痰液总的阳性检出率为5& 46%(38/65),两者差异有统计学意义(x^2= 14.114,P=0. 000)。结论FQPCR、SAT、耐药基因芯片检测儿童疑似肺结核患者的胃液和痰液中结核分枝杆菌的敏感度高、特异度强,对儿童肺结核的诊断具有重要价值。

GeneXpert MTB/RIF检测儿童疑似肺结核患者胃液的诊断价值

目的评价儿童疑似肺结核患者胃液采用GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert”)检测的诊断价值.方法搜集哈尔滨市胸科医院儿童结核科、哈尔滨市儿童医院呼吸科、哈尔滨医科大学附属第一医院儿科2017年9月至2018年12月收治的2个月至14周岁疑似肺结核者155例,其中临床诊断肺结核患者115例、非肺结核患者40例.全部患者于晨起抽取空腹胃液,采用荧光涂片显微镜检查(简称“涂片检查”)、BACTECMGIT960液体培养(简称“MGIT960法”)和GeneXpert 3种方法对胃液标本进行检测.以临床诊断为标准,评价涂片检查、MGIT960法和GeneXpert检测胃液的诊断效能;以MGIT960药敏试验结果为标准,评价GeneXpert检测MTB对利福平耐药性的效能.结果以临床诊断为标准,涂片检查、MGIT960法、GeneXpert检测肺结核患儿的敏感度分别为30.4%(35/115)、54.8%(63/115)、69.6%(80/115);特异度分别为95.0%(38/40)、100.0%(40/40)、97.5%(39/40).115例临床诊断为肺结核的患儿中,在涂阳培阳、涂阴培阳、涂阴培阴时,GeneXpert法检测的阳性率分别为96.7%(29/30)、81.8%(27/33)、40.4%(19/47);在涂阳培阴时,GeneXpert法检测阳性例数为5例(5/5);在涂阳、涂阴、培阴时,GeneXpert法检测的阳性率分别为97.1%(34/35)、57.5%(46/80)、46.2%(24/52);以MGIT960为标准,GeneXpert检测的敏感度为88.9%(56/63).115例临床诊断的肺结核患儿,MGIT960法和GeneXpert检测均阳性的患儿为56例,MGIT960药敏试验结果显示利福平耐药11例,利福平敏感45例;GeneXpert检测利福平耐药13例,利福平敏感43例;以MGIT960药敏试验结果为标准,GeneXpert检测MTB对利福平耐药性的敏感度为100.0%(11/11),特异度为95.6%(43/45),与MGIT960药敏试验结果具有较好的一致性(Kappa值=0.894).结论GeneXpert法检测儿童结核病胃液MTB的敏感度高、特异度强,培阴时也有较高的检出率;其利福平耐药性检测与MGIT960药敏试验结果有较好的一致性,对儿童肺结核的诊断及指导治疗具有良好的应用价值.

肥胖大鼠血脂和体脂肪变化及心室肌细胞内钙离子强度与心律失常发生的关系

目的观察高脂饮食诱导肥胖（DIO）大鼠血脂和体脂肪变化，探讨心室肌细胞内钙离子强度与心律失常发生的关系。方法健康雄性SD大鼠60只，体质量200～250g。将大鼠按体质量随机分为对照组（15只）和高脂饮食组（45只），高脂饮食组采用高脂饮食诱导法建立肥胖大鼠模型。喂养12周后，在高脂饮食组筛选体质量增加明显的大鼠进入肥胖组（15只）。两组各选8只大鼠舌下注射0．1mg／kgBaCl2，诱导心律失常，应用标准Ⅱ导联心电图连续监测1h，评价大鼠心律失常发生率及严重程度。采集两组大鼠腹主动脉血，分离血清，测血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇。分离大鼠肾周脂肪、睾周脂肪和肠系膜脂肪，称重、计算体脂比。酶解法分离大鼠单个心室肌细胞，应用激光共聚焦技术记录细胞内钙离子强度（[Ca^2＋]i）。结果肥胖组大鼠体脂比[（7．71±0．74）％]明显高于对照组[（4．69±0．37）％]，两组比较差异有统计学意义（t=3．650，P〈0．05）；血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平，肥胖组[（1．26±0．04）、（0．58±0．10）、（0.51±0．04）mmol／L]与对照组[（0．92±0．08）、（0．29±0．03）、（0．31±0．04）mmo]／L]比较显著增高（z值分别为3．801、2．778、3．536，P〈0．05）；肥胖组大鼠心律失常发生率高于对照组（χ^2=5．333，P〈0．05），心律失常评分肥胖组（2．5±0．6）高于对照组（0）；肥胖组大鼠心室肌细胞内钙离子强度（247．96±20．03）明显高于对照组（174．25±23．13），两组比较差异有统计学意义（t=2．409，P〈0．05）。结论肥胖大鼠心律失常发生率增加，血脂升高，心肌细胞内钙离子积聚是引发肥胖源性心律失常的主要机制之一。