哮喘大鼠树突状细胞CCR7对共刺激分子CD80、CD86表达的影响研究

目的 通过观察哮喘大鼠树突状细胞CCR7对共刺激分子CD80、CD86表达的影响,研究其在免疫耐受中的作用。方法 建立哮喘大鼠模型,提取骨髓来源的树突状细胞,将编码过表达CCR7基因的重组腺病毒及有靶向CCR7基因的短发夹RNA腺病毒载体转染树突状细胞(DC)。同时培养脾脏来源T淋巴细胞,与转染后的DC行混合淋巴细胞反应,采用MTT比色法测定淋巴细胞增殖能力;采用蛋白质免疫印迹试验检测DC中CCR7的蛋白表达水平;流式细胞仪检测DC表面CD80、CD86表达;酶联免疫吸附法检测IL-10、IL-12、TGF-β表达水平。结果 CCR7基因过表达组CCR7蛋白表达水平增高,CD80、CD86表达水平较哮喘组明显升高,CCR7基因敲低组二者的表达水平较哮喘组降低(P<0.001);IL-12在CCR7基因敲低组较哮喘组明显升高;CCR7基因过表达组IL-10及TGF-β表达水平较敲低组升高,CCR7基因敲低组TGF-β蛋白表达水平较哮喘组明显降低(P<0.001)。结论 共刺激分子的激活可能通过DC表面CCR7表达的介导来实现。同时,CCR7可影响IL-10、IL-12和TGF-β的蛋白表达水平来诱导哮喘免疫耐受。