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贝类组织培养及其应用研究 被引量:13
1
作者 郎刚华 王勇 +1 位作者 刘万顺 徐怀恕 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期15-18,共4页
关键词 贝类 组织培养 细胞培养 应用研究
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栉孔扇贝(chlamys farreri)外套膜组织原代培养的初步研究 被引量:16
2
作者 郎刚华 王勇 +1 位作者 刘万顺 徐怀恕 《青岛海洋大学学报(自然科学版)》 CSCD 2000年第1期123-126,共4页
以栉孔扇贝(chlamysfarreri)外套膜为材料,采用几种除菌方法进行除菌处理后,应用自己设计的培养基对其进行了原代培养。实验结果表明,以青霉素、链霉素和复方洗必泰混合溶液除菌,对组织损伤小,除菌彻底。在此培养条件下,栉孔扇贝外套膜... 以栉孔扇贝(chlamysfarreri)外套膜为材料,采用几种除菌方法进行除菌处理后,应用自己设计的培养基对其进行了原代培养。实验结果表明,以青霉素、链霉素和复方洗必泰混合溶液除菌,对组织损伤小,除菌彻底。在此培养条件下,栉孔扇贝外套膜细胞能正常迁出和生长。 展开更多
关键词 栉孔扇贝 外套膜 原代培养 细胞培养
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壳聚糖及其衍生物在生物工程领域中的应用研究 被引量:8
3
作者 郎刚华 陈西广 +1 位作者 刘成圣 刘万顺 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期25-28,共4页
关键词 壳聚糖衍生物 生物工程 应用
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中国对虾淋巴组织的长期原代培养和化学诱变初探 被引量:4
4
作者 郎刚华 王勇 +1 位作者 汪岷 陈西广 《青岛海洋大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2001年第3期411-414,共4页
以中国对虾为实验材料 ,研究影响对虾淋巴组织原代培养的一些因素。研究中发现 ,用75%的乙醇浸泡对虾就可以达到淋巴组织培养无菌的要求 ,当组织块的接种密度为 2 4 0~ 2 60块( 2 5cm2 ) -1时最适。当原代细胞培养 30 d左右 ,细胞会因... 以中国对虾为实验材料 ,研究影响对虾淋巴组织原代培养的一些因素。研究中发现 ,用75%的乙醇浸泡对虾就可以达到淋巴组织培养无菌的要求 ,当组织块的接种密度为 2 4 0~ 2 60块( 2 5cm2 ) -1时最适。当原代细胞培养 30 d左右 ,细胞会因接触抑制而停止生长 ,当接触抑制消除后 ,细胞仍可继续生长。另外 ,还进行了以 N-甲基 - N′-亚硝基胍 ( MNNG)对原代细胞进行诱变的尝试发现诱变后有的细胞呈现出转化细胞的形态 。 展开更多
关键词 中国对虾 淋巴组织 组织培养 原代培养 化学锈变 N-甲基-N'-亚硝基胍
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牛胎盘中肝细胞生长因子的生物学特性 被引量:2
5
作者 郎刚华 王勇 +3 位作者 刘万顺 陈西广 张振宇 李兴诗 《青岛海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1998年第2期288-292,共5页
实验研究来源于牛胎盘的肝细胞生长因子的生物学特性。将新鲜牛胎盘匀浆后经盐析、亲和层析、超滤和离子交换层析可以纯化到一种肝细胞生长因子。实验采用3H-TdR掺入细胞DNA的量来表示肝细胞生长因子促进细胞DNA合成的作用... 实验研究来源于牛胎盘的肝细胞生长因子的生物学特性。将新鲜牛胎盘匀浆后经盐析、亲和层析、超滤和离子交换层析可以纯化到一种肝细胞生长因子。实验采用3H-TdR掺入细胞DNA的量来表示肝细胞生长因子促进细胞DNA合成的作用,用液体闪烁计数来探测3H的放射性。结果表明:该因子对原代培养的大鼠肝细胞、肾细胞的DNA合成都有刺激作用,而且也能刺激原代培养的人胎肝细胞的DNA合成。但对传代培养的小鼠腹水S180细胞的DNA合成则有抑制作用。另外,此因子对热不稳定,经热处理之后,其对大鼠肝细胞的刺激作用和对小鼠腹水S180细胞的抑制作用都降低了。 展开更多
关键词 牛胎舯 肝细胞生长因子 生物学 原代培养
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中国对虾类淋巴组织培养中细胞异常的病理研究 被引量:2
6
作者 郎刚华 樊廷俊 姜明 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2000年第z1期-,共7页
在对养殖中国对虾和海捕中国对虾的类淋巴 器官进行组织培养时,发现迁出的细胞空泡化、细胞内颗粒较多。培养一周后由养殖中国对 虾类淋巴组织迁出的细胞开始大量脱落,而由海捕中国对虾类淋巴组织培养出的细胞可生长 30d左右。对未经... 在对养殖中国对虾和海捕中国对虾的类淋巴 器官进行组织培养时,发现迁出的细胞空泡化、细胞内颗粒较多。培养一周后由养殖中国对 虾类淋巴组织迁出的细胞开始大量脱落,而由海捕中国对虾类淋巴组织培养出的细胞可生长 30d左右。对未经培养的类淋巴组织及培养的类淋巴组织进行透射电镜观察,发现在养殖中 国对虾类淋巴组织的细胞中除了有球形病毒及球状和多面体状病毒包涵体外,在细胞质中还 含有大量类立克次氏体样原核生物,而且每个细胞中的类立克次氏体均由一单层膜包在一起 ;在海捕中国对虾类淋巴组织的细胞中也发现有球形病毒及球状病毒包涵体,另外还在少量 细胞中发现有类立克次氏体样原核生物存在。感染病毒的组织细胞呈现空泡化、核膜肿胀破 裂、核质固缩、高尔基体肿胀、线粒体嵴消失等病理变化。感染有类立克次氏体样原核生物 的细胞不同程度地呈现出细胞器消失、核染色质固缩等病理结构。 展开更多
关键词 中国对虾 类淋巴 组织培养 病毒 类立克次氏体
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利用玉米粗纤维生产单细胞蛋白的研究 被引量:2
7
作者 郎刚华 王勇 《饲料研究》 CAS 北大核心 1996年第10期20-20,共1页
利用玉米粗纤维生产单细胞蛋白的研究青岛海洋大学海洋生命学院郎刚华中科院海洋所王勇据联合国粮农组织统计,到本世纪末,全球蛋白短缺量将达2500万吨,因此,充分利用地球资源,加速开发廉价蛋白饲料的研究是非常重要的。其中以... 利用玉米粗纤维生产单细胞蛋白的研究青岛海洋大学海洋生命学院郎刚华中科院海洋所王勇据联合国粮农组织统计,到本世纪末,全球蛋白短缺量将达2500万吨,因此,充分利用地球资源,加速开发廉价蛋白饲料的研究是非常重要的。其中以利用可再生资源(植物块根、秸杆、麸... 展开更多
关键词 玉米 粗纤维 单细胞蛋白 蛋白饲料 饲料
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牛胎盘中肝细胞生长因子的纯化 被引量:1
8
作者 郎刚华 王勇 +2 位作者 刘万顺 张振宇 李兴诗 《青岛医学院学报》 CAS 1995年第4期273-276,共4页
用高速离心、分段盐析、亲和层析、超滤和阴离子交换层析法,从牛胎盘中分离纯化出一种肝细胞生长因子。结果表明,此因子的最终得率为0.005mg/g牛胎盘,其分子量约为99000u,它能强烈刺激原代培养大鼠肝细胞的DNA合... 用高速离心、分段盐析、亲和层析、超滤和阴离子交换层析法,从牛胎盘中分离纯化出一种肝细胞生长因子。结果表明,此因子的最终得率为0.005mg/g牛胎盘,其分子量约为99000u,它能强烈刺激原代培养大鼠肝细胞的DNA合成。提示利用自制的亲和层析凝胶,通过此提纯流程可以得到一种肝细胞生长因子。 展开更多
关键词 肝细胞生长因子 胎盘 肝素 纯化
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玉米花粉对非洲蜗牛幼体存活率及生长影响的研究
9
作者 郎刚华 王勇 +1 位作者 王学军 冯静仪 《饲料研究》 CAS 北大核心 1996年第6期21-22,共2页
玉米花粉对非洲蜗牛幼体存活率及生长影响的研究青岛海洋大学海洋生命学院郎刚华中科院海洋研究所王勇山东师范大学生物系王学军,冯静仪褐云玛瑙螺(Achatinafulica)又名非洲蜗牛,是一种高蛋白低脂肪的经济动物。据测... 玉米花粉对非洲蜗牛幼体存活率及生长影响的研究青岛海洋大学海洋生命学院郎刚华中科院海洋研究所王勇山东师范大学生物系王学军,冯静仪褐云玛瑙螺(Achatinafulica)又名非洲蜗牛,是一种高蛋白低脂肪的经济动物。据测定,100g干蜗牛肉含蛋白质60.... 展开更多
关键词 玉米花粉 非洲蜗牛 蜗牛 存活率 生长
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大米α-球蛋白的原核表达、抗体制备及检测
10
作者 郎刚华 顾立众 李西腾 《江苏农业科学》 北大核心 2016年第11期34-37,113,共5页
大米α-球蛋白是大米胚乳中主要的盐溶蛋白,也是大米的主要致敏原之一。为了建立起大米α-球蛋白的检测分析方法,将大米α-球蛋白的编码基因亚克隆到表达载体p QE30中,并在大肠杆菌中进行了重组大米α-球蛋白的表达。通过金属亲和层析... 大米α-球蛋白是大米胚乳中主要的盐溶蛋白,也是大米的主要致敏原之一。为了建立起大米α-球蛋白的检测分析方法,将大米α-球蛋白的编码基因亚克隆到表达载体p QE30中,并在大肠杆菌中进行了重组大米α-球蛋白的表达。通过金属亲和层析法对重组大米α-球蛋白进行纯化,以纯化的重组大米α-球蛋白为抗原免疫白兔,制备出了抗大米α-球蛋白多克隆抗体。Western Blotting检测结果显示,该抗体能够特异性地与大米α-球蛋白进行免疫结合反应,抗大米α-球蛋白抗体与目标蛋白的结合呈现出一定的定量关系。并且,利用该抗体构建起了大米α-球蛋白的ELISA检测分析方法,并对3种大米样品中α-球蛋白的含量进行了检测分析。 展开更多
关键词 大米 α-球蛋白 原核表达 抗体 检测分析 WESTERN BLOTTING ELISA
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大米蜡质蛋白的原核表达、抗体制备及检测
11
作者 郎刚华 顾立众 李西腾 《食品与发酵科技》 CAS 2015年第6期53-58,63,共7页
大米蜡质蛋白是大米胚乳中直链淀粉合成的关键酶。它是大米的主要致敏原之一。为了建立起大米蜡质蛋白的检测方法,本研究对大米蜡质蛋白的编码基因进行了亚克隆,并用大肠杆菌合成了蜡质蛋白的重组蛋白片段。通过已纯化的重组蜡质蛋白片... 大米蜡质蛋白是大米胚乳中直链淀粉合成的关键酶。它是大米的主要致敏原之一。为了建立起大米蜡质蛋白的检测方法,本研究对大米蜡质蛋白的编码基因进行了亚克隆,并用大肠杆菌合成了蜡质蛋白的重组蛋白片段。通过已纯化的重组蜡质蛋白片段为抗原免疫白兔,制备了多克隆抗体。该抗体能够特异性地与大米蜡质蛋白进行免疫结合反应,并且,利用该抗体对大米蜡质蛋白质进行了Western-blotting检测和ELISA检测。 展开更多
关键词 大米 蜡质蛋白 原核表达 抗体 检测
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食品生物化学实验课教学法再探
12
作者 郎刚华 顾立众 《教育教学论坛》 2015年第9期243-244,共2页
食品生物化学的实验教学在加深和巩固理论知识的理解、锻炼学生解决实际问题的能力、培养学生的实验操作技能等方面起着重要的作用。为了进一步提高食品生物化学实验课的教学效果,从而加强学生的实验技能和提高学生的综合素质,本人从食... 食品生物化学的实验教学在加深和巩固理论知识的理解、锻炼学生解决实际问题的能力、培养学生的实验操作技能等方面起着重要的作用。为了进一步提高食品生物化学实验课的教学效果,从而加强学生的实验技能和提高学生的综合素质,本人从食品生物化学实验教学的课程特征和现状出发,通过导入图示教学法、适时安排实验设计,以及及时进行实验总结等教学手段,加深了学生对理论知识的理解和掌握,强化了学生的食品生物化学实验技能,激发了学生的学习兴趣,并且培养了学生创造性的思维能力和良好的实验素养,从而为全面提升学生的综合素质奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 食品生物化学 实验教学 图示教学 实验设计 实验总结
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透视企业人才评价 进一步完善高职人才素质的探讨
13
作者 郎刚华 《教育教学论坛》 2015年第31期228-229,共2页
随着企业招聘体系和用人机制的逐步完善,企业对高职毕业生的综合素质又提出了更高的要求,针对相关企业人事部门负责人提出的具有代表性的建议和看法,为在高职教育中进一步提高人才综合素质,本文从进一步推进双证书制度,提高高职院校毕... 随着企业招聘体系和用人机制的逐步完善,企业对高职毕业生的综合素质又提出了更高的要求,针对相关企业人事部门负责人提出的具有代表性的建议和看法,为在高职教育中进一步提高人才综合素质,本文从进一步推进双证书制度,提高高职院校毕业生的自信心,树立正确的择业观,以及掌握充分的应聘技巧等方面进行了探讨。 展开更多
关键词 高职院校 招聘 双证书制度 自信心 择业观 应聘技巧
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羧甲基壳多糖毒理学研究 被引量:27
14
作者 刘万顺 陈西广 +5 位作者 张学成 刘晨光 丛日山 金林 郎刚华 王森民 《中国海洋药物》 CAS CSCD 1997年第3期17-19,共3页
羧甲基壳多糖的毒理学研究,包括急性皮肤毒性、急性经口毒性、长期经口毒性。研究结果表明羧甲基壳多糖属安全无毒物质。对小白鼠急性皮肤毒性LD_(50)>2200mg/kg,急性经口毒性LD_(50)>5001mg/kg长期经口毒性实验,采用高、中、低3... 羧甲基壳多糖的毒理学研究,包括急性皮肤毒性、急性经口毒性、长期经口毒性。研究结果表明羧甲基壳多糖属安全无毒物质。对小白鼠急性皮肤毒性LD_(50)>2200mg/kg,急性经口毒性LD_(50)>5001mg/kg长期经口毒性实验,采用高、中、低3个剂量组,对大白鼠体重增长百分率、血象、内脏外观、肝肾功能及肝、肾组织学检查,均未发现异常。 展开更多
关键词 甲壳质 羧甲基壳多糖 毒理学
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甲壳质及其衍生物生理活性研究进展 被引量:20
15
作者 王真 陈西广 +2 位作者 郎刚华 刘万顺 刘晨光 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第9期30-32,共3页
关键词 甲壳质 衍生物 生理活性
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6-O-羧甲基壳多糖的细胞毒性效应研究 被引量:7
16
作者 陈西广 王真 +3 位作者 刘万顺 刘晨光 郎刚华 刘成圣 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2000年第z1期-,共4页
采用溶血试验和细胞毒性试验研究6 -O-羧甲基壳多糖的细胞毒性效应,结果表明:1% 浓度的6-O-羧甲基壳多糖对红细胞溶 血率小于5%,说明该材料无溶血现象。以手术缝合线和500μg/mL的苯酚为对照研究不同分 子量的6-O-羧甲基壳多糖分别在... 采用溶血试验和细胞毒性试验研究6 -O-羧甲基壳多糖的细胞毒性效应,结果表明:1% 浓度的6-O-羧甲基壳多糖对红细胞溶 血率小于5%,说明该材料无溶血现象。以手术缝合线和500μg/mL的苯酚为对照研究不同分 子量的6-O-羧甲基壳多糖分别在1000μg/mL和2000μg/mL浓度下对大白鼠皮肤成纤维细胞 生长的影响,经过2d,4d,7d细胞培养,细胞增殖率均大于100%,说明该材料对成纤维细胞 无毒性效应且对大白鼠皮肤成纤维细胞有促进生长的作用,分子量越小促生长作用越强,随 着培养时间延长促生长作用亦增强。此研究在一定程度上证明,6-O-羧甲基壳多糖作为医 用生物材料在细胞毒性方面是安全的。 展开更多
关键词 6-O羧甲基壳多糖 生物材料 细胞毒性 溶血
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海藻糖研究进展 被引量:11
17
作者 于春燕 郎刚华 刘万顺 《青岛大学学报(自然科学版)》 CAS 2000年第2期55-59,共5页
海藻糖(Trehalosc)是自然界中广泛分布的一种双糖。它在生物体内既可以作为结构成分,又可以用于提供能量,而且,它是许多生物的抗逆代谢物。研究发现海藻糖对干燥的酶、抗体、生物组织及食物等都有保护作用。本文对海藻糖的性质、... 海藻糖(Trehalosc)是自然界中广泛分布的一种双糖。它在生物体内既可以作为结构成分,又可以用于提供能量,而且,它是许多生物的抗逆代谢物。研究发现海藻糖对干燥的酶、抗体、生物组织及食物等都有保护作用。本文对海藻糖的性质、分布、生物学功能和应用研究进行综述。 展开更多
关键词 海藻糖 性质 生物学功能 应用 双糖
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产碱蛋白酶海洋弧菌的筛选 及其培养条件的研究 被引量:4
18
作者 刘万顺 刘成圣 +4 位作者 刘晨光 陈西广 邹松涛 郎刚华 贺君 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2000年第z1期-,共7页
运用酪蛋白平板法从海水中筛选分离出一株分泌高活性碱性蛋白酶的 海洋弧菌。对其产酶最适条件进行了优化试验。结果表明:在pH8,含2%NaCl,含蛋白胨、蔗 糖和酵母膏,接种量2%,23℃,培养35h条件下,产酶活性最高。发酵液中酶的活性可... 运用酪蛋白平板法从海水中筛选分离出一株分泌高活性碱性蛋白酶的 海洋弧菌。对其产酶最适条件进行了优化试验。结果表明:在pH8,含2%NaCl,含蛋白胨、蔗 糖和酵母膏,接种量2%,23℃,培养35h条件下,产酶活性最高。发酵液中酶的活性可达719 μ/mL。 展开更多
关键词 海洋弧菌 海洋碱性蛋白酶 培养条件
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青岛文昌鱼LIM类同源框基因反义寡核苷酸对其胚胎发育的影响 被引量:2
19
作者 王勇 郎刚华 +1 位作者 徐永立 张培军 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 2000年第4期431-437,共7页
研究了青岛文昌鱼LIM类同源框基因Bblim反义寡核苷酸对文昌鱼胚胎发育的影响。根据已克隆的Bblim基因序列 ,设计并合成了对应于该基因同源框区的两条反义寡核苷酸链 ,用电脉冲方法将其导入文昌鱼受精卵。结果表明 :反义寡核苷酸与随机... 研究了青岛文昌鱼LIM类同源框基因Bblim反义寡核苷酸对文昌鱼胚胎发育的影响。根据已克隆的Bblim基因序列 ,设计并合成了对应于该基因同源框区的两条反义寡核苷酸链 ,用电脉冲方法将其导入文昌鱼受精卵。结果表明 :反义寡核苷酸与随机序列寡核苷酸都不影响胚胎细胞分裂 ,而反义寡核苷酸能抑制胚胎细胞Bblim基因的表达。还发现只存在于导入反义寡核苷酸的幼体中的两种畸形———一是在幼体的腹侧近咽部有一圆形突起的结构 ;另一是在幼体色素与尾鳍之间约二分之一处的腹侧有一距状突起。这两种畸形均发生于文昌鱼幼体腹侧的近体表部位 。 展开更多
关键词 青岛文昌鱼 Bblim LIM 同源框基因 反义寡核苷酸 胚胎发育 电脉冲
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甲壳质及其衍生物作为贴壁依赖性动物细胞生长微载体的研究现状 被引量:2
20
作者 刘成圣 陈西广 +2 位作者 刘晨光 刘万顺 郎刚华 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期20-22,共3页
关键词 甲壳质微载体 细胞培养 贴壁依赖性动物细胞
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