思维导图在医学实验动物学教学中的应用探索

探索将思维导图应用于医学实验动物学教学,提炼知识要点,整合零散内容,旨在培养学生构建全面系统的专业知识体系的能力,从而激发其学习兴趣,达到提高教学质量和学习效率的目的。

杏仁油对BABL/c小鼠抗炎镇痛作用的研究

目的研究杏仁油对BABL/c小鼠抗炎镇痛作用。方法应用二甲苯诱导小鼠耳肿胀实验法观察杏仁油对BABL/c小鼠抗炎作用;应用小鼠醋酸扭体法、小鼠热板法验证杏仁油对BABL/c小鼠镇痛作用。结果杏仁油高剂量组极显著抑制二甲苯诱导BABL/c小鼠耳肿胀度,与CK对照组差异极显著(P﹤0.01),抑制率为26.67%。杏仁油高剂量组较CK组明显减少BABL/c小鼠扭体次数,抑制率达到35.69%;杏仁油高剂量组在给药30,45,60 min时的痛阈较CK组极显著提高(P﹤0.01)。结论杏仁油对早期耳肿胀炎症模型具有明显的抑制作用,具有较好的镇痛作用,能够显著地减少冰醋酸所致扭体发生的次数,并能显著地提高热板法小鼠的痛阈,不同剂量间具有较明显的量效关系,抗炎镇痛效果明显。

蒙古黄芪根围土壤水浸液对自身种子发芽及生理特性的影响

目的:通过蒙古黄芪根围土壤提取液的生物学试验,研究蒙古黄芪前茬土壤提取液对自身种子萌发及幼苗生长的影响效应,探讨蒙古黄芪连作障碍与自毒作用的关系。方法:设置蒸馏水(CK)、蒙古黄芪根围土壤水浸提液50、100、200和400 mg/m L共5个处理,用于蒙古黄芪自毒作用的生物学试验。结果:当蒙古黄芪根围土壤水浸液浓度小于100 mg/m L时对自身种子出苗率、幼苗根长和活力指数均有显著的促进作用,而当根围土壤水浸液浓度大于200 mg/m L则对各指标没有显著影响效应。高于400 mg/m L的根围土壤水浸液显著抑制自身幼苗SOD活性;高于200 mg/m L的根围土壤水浸液显著抑制自身幼苗POD活性,而显著增加幼苗MDA含量。结论:较低浓度的蒙古黄芪根围土壤水浸液对自身种子萌发出苗和幼苗生长有一定的促进作用,而较高浓度则没有显著的影响效应,但对幼苗细胞膜造成了一定损伤。

外源激素配比对药用植物锁阳愈伤组织诱导的影响

目的筛选最佳激素组合,提高锁阳组织培养效率。方法以锁阳肉质茎维管组织作为外植体,以MS为基本培养基,基于正交实验设计研究三种外源激素配比(NAA、2,4-D和6-BA)以及蔗糖和琼脂浓度对锁阳愈伤组织诱导的影响。结果 NAA、2,4-D和6-BA三种激素对锁阳愈伤组织诱导均有显著影响,不同激素之间对出愈率的作用效应大小为2,4-D>NAA>6-BA,诱导锁阳愈伤组织最佳激素配比为MS+NAA(1.0mg/L)+2,4-D(1.5mg/L)+6-BA(2.0mg/L)。培养基中琼脂浓度和蔗糖浓度对锁阳愈伤组织诱导率有一定影响,蔗糖浓度以30g/L,琼脂浓度以4.5g/L时愈伤组织诱导率最高。结论锁阳愈伤组织诱导最适培养基为MS+NAA(1.0mg/L)+2,4-D(1.5mg/L)+6-BA(2.0mg/L)+蔗糖(30g/L)+琼脂(4.5 g/L)。

甘加型藏羊种质特性研究

本研究以甘加羊为研究对象,通过现场资源调查和实验室分析相结合的方法,对甘加羊种质资源现状、及毛、肉品质进行了系统的研究。结果表明甘加羊属肉毛兼用型异质粗毛羊,主要分布在甘南州夏河县甘加乡、达麦乡和唐尕昂乡,以夏河县甘加乡为中心产区。甘加羊羊毛两型毛、无髓毛和有髓毛的细度分别为43.47μm、24.10μm和91.37μm;甘加羊羊毛含脂率和净毛率分别为6.48%和68.25%。甘加羊羊肉中水分含量低,干物质含量和粗蛋白含量较高,肌肉内脂肪含量适中,灰分含量较低,矿物质、维生素含量丰富,其中Fe和Zn的含量分别为31.80 mg/100g和3.48mg/100g。

蒙古黄芪植株水浸液的自毒作用研究

目的:通过对蒙古黄芪植株各部位提取液的生物学试验,探讨蒙古黄芪是否存在自毒作用,以及自毒作用与连作障碍的关系。方法:设置蒸馏水(CK)、蒙古黄芪根、茎和叶水浸提液各12.5、25、50和100 mg/mL 4个浓度,共计13个处理,用于黄芪自毒作用的生物学实验。结果:当蒙古黄芪根、茎和叶水浸提液的浓度达到25 mg/mL时,对自身种子萌发和幼苗生长有抑制作用,且随水浸提液浓度的升高,这种抑制作用增强;就综合化感效应而言,茎水浸提液的抑制作用>叶水浸提液>根水浸提液。发芽指数和幼苗活力指数对水浸提液比其他指标更为敏感。结论:蒙古黄芪植株水浸提液对自身种子萌发和幼苗生长具有明显的抑制作用,且抑制作用具有一定的浓度依赖性,蒙古黄芪自毒作用是造成连作障碍的原因之一。

不同前茬对当归药材产量及品质的影响

目的:比较不同作物茬口对当归药材产量和品质的影响。方法:采用大田跟踪调查测产,挥发油和浸出物含量分别按照2005年版中国药典附录(XD)项下甲法和醇溶性浸出物测定法项下的热浸法(附录XA)测定。结果:小麦、黄芪和马铃薯茬当归药材的产量和一等归出成率均显著高于当归茬口,而三等归出成率分别较当归茬降低,其中总产和一等归出成率分别较当归茬提高192.43%、183.07%、175.67%和267.67%、176.78%、196.44%;三等归出成率分别较当归茬降低49.22%、57.29%和43.45%。不同茬口当归药材质量有明显差异,其中黄芪茬口的挥发油含量和和藁苯内酯含量显著高于其他茬口,小麦茬口的浸出物含量显著高于其他茬口。结论:不同前茬对当归药材产量和品质有显著影响,综合产量和品质分析结果,在当地常见4种茬口中以黄芪茬口的产量和品质最佳,小麦茬口次之。

细粒棘球蚴Eg95蛋白减毒沙门氏菌重组株的构建与免疫原性分析

目的探讨以减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)为载体构建细粒棘球蚴口服活载体疫苗的可行性。方法将细粒棘球蚴Eg95基因插入到表达载体p YA3341中,构建重组质粒p YA3341-Eg95,并用PCR和酶切鉴定。将重组质粒先后电转入减毒沙门氏菌X3770和X4550,获得重组菌株St-Eg95,蛋白质印迹(Western blotting)分析重组菌Eg95蛋白的表达情况。将重组菌St-Eg95体外培养传10代,每隔一代提取质粒,利用PCR鉴定重组质粒的稳定性。BALB/c小鼠30只,随机均分为6组,其中4组分别经口灌胃给予St-Eg95 1×109、1×1010、1×1011和1×1012 cfu/ml,100μl/只,余下2组分别经口灌胃给予等体积野生型沙门氏菌1×107 cfu/ml和PBS,常规饲养30 d,观察生存情况。另取15只BALB/c小鼠,均分为3组,分别为St-Eg95免疫组、阴性对照组和空白对照组,St-Eg95组和阴性对照组按5×1010cfu/ml剂量的重组菌和阴性菌分别经口灌胃免疫小鼠,0.5 ml/(只·次),共2次,间隔2周。分别于免疫前和末次免疫后2、4和6周采血,收集血清。用细粒棘球蚴Ig G抗体检测试剂盒(间接ELISA)检测Eg95蛋白的Ig G抗体滴度。于末次免疫后6周处死小鼠,用噻唑蓝(MTT)法检测特异性脾淋巴细胞增殖活性。结果经PCR和酶切鉴定表明,重组质粒p YA3341-Eg95构建成功,在重组菌St-Eg95中有目的蛋白Eg95的表达,相对分子质量(Mr)约为18 000,与预期大小一致。重组菌传10代后,PCR仍可扩增到约486 bp的Eg95基因片段。安全性实验结果显示,灌胃给予重组菌和PBS的小鼠30 d后均存活,活动正常;给予野生型沙门氏菌的小鼠均于4 d后死亡。间接ELISA检测结果显示,末次免疫后2周St-Eg95组小鼠特异性Ig G抗体水平即明显升高,显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05);末次免疫后4周抗体水平达到最高值,约1∶1 700。小鼠淋巴细胞增殖试验结果显示,末次免疫后6周,St-Eg95组小鼠的脾淋巴细胞刺激指数(SI值)达到1.94±0.15,显著高于阴性对照组(1.14±0.12)和空白对照组(1.03±0.03)(P<0.05)。结论构建了能稳定表达细粒棘球蚴Eg95蛋白的口服减毒沙门氏菌重组株,并具有良好的免疫原性和安全性。

前列腺增生大鼠模型的建立

目的:探讨丙酸睾酮对去势和不去势SD大鼠前列腺增生的影响。方法:8周龄雄性SD大鼠25只,随机分为正常对照组(n=5)、不去势模型组(n=15)及去势模型组(n=5);不去势模型组按注射丙酸睾酮剂量又分为不去势低剂量组、中剂量组和高剂量组,注射剂量分别为1.25,2.5,5 mg/(kg·d);去势模型组无菌切除双侧睾丸1周后注射丙酸睾酮5 mg/(kg·d);去势模型组和不去势模型组均连续注射丙酸睾酮4周,于末次给药后分离大鼠前列腺,检测其湿重、体积和脏器系数;组织切片HE染色,光镜下观察前列腺组织变化。结果:不去势小剂量组和中剂量组的前列腺湿重、体积和脏器系数增加,与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),不去势高剂量组和去势组的前列腺体积和脏器系数与正常对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.01);去势组和不去势组大鼠前列腺体积和腺腔大小均较正常对照组增大,且不去势组前列腺腺体与周围组织界限更清楚,腺腔内乳头状突起也比去势组更加明显。结论:使用不去势、皮下注射5 mg/(kg·d)丙酸睾酮的方法可有效的建立前列腺增生大鼠模型。

细粒棘球蚴重组St-Eg 95-Eg.ferritin疫苗构建及生物学特性检测

构建表达细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白的重组口服减毒鼠伤寒沙门菌活载体疫苗株并评价其生物学特性。将细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合基因插入到表达载体pYA3341中,构建重组质粒pYA3341-Eg95-Eg.ferritin,将重组质粒分别电转入减毒鼠伤寒沙门菌X3770和X4550,获得重组疫苗菌株St-Eg95-Eg.ferritin,对重组菌的稳定性、生长状态及安全性进行分析。结果表明,经PCR和酶切鉴定成功构建重组质粒pYA3341-Eg95-Eg.ferritin,Western blot检测Eg95-Eg.ferritin蛋白在重组菌中获得表达;生物学特性研究结果表明,重组质粒可稳定存在,且不影响重组菌的生长状态,小鼠口服试验证实,重组菌安全无毒性。成功构建能稳定表达细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白的口服减毒鼠伤寒沙门菌活载体疫苗株,将为研究包虫病口服基因工程疫苗奠定基础。

沙生药用植物锁阳愈伤组织诱导研究

目的为扩大和提高锁阳资源的利用效率。方法以锁阳肉质茎的不同组织部位作为外植体,以MS为基本培养基,筛选诱导愈伤组织产生的最佳外植体。结果以MS为基本培养基附加2,4-D 2.0 mg/L、6-BA 1.0 mg/L和NAA1.0 mg/L,在暗培养、20℃条件下锁阳肉质茎的维管组织部分是诱导愈伤组织的最佳外植体,髓部较差,鳞片叶未诱导出愈伤组织。结论初步筛选出了适宜锁阳愈伤组织诱导的外植体和培养条件。

枸杞蜂花粉提取物对SD大鼠前列腺增生的影响

目的探讨枸杞蜂花粉提取物对丙酸睾酮复制的大鼠前列腺增生的抑制作用。方法 SD大鼠皮下注射丙酸睾酮,复制前列腺增生模型,随机分成3组:模型对照组、水提物组、醇提物组,每组10只,枸杞蜂花粉水提物和醇提物用生理盐水配制成相当于原料枸杞蜂花粉3g·mL-1的浓度,以0.5mL/100g的容量进行灌胃,连续给药30d,计算各组前列腺湿重、体积以及前列腺指数,光镜下观察前列腺组织形态变化。结果模型组的前列腺重量、体积和前列腺脏器系数均高于空白对照组(P<0.01);醇提物组的前列腺重量、体积和前列腺脏器系数低于模型对照组(P<0.05);水提物组与模型对照组比较各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论枸杞蜂花粉的醇提物有一定的抑制前列腺增生的作用。

应用过氧化氢发生器对实验动物屏障环境及设施消毒效果的观察

目的观察过氧化氢(H2O2)蒸汽对屏障环境内表面、台面以及空气的消毒效果。方法用BIOQUELL Z过氧化氢气体发生器将浓度为30%的H2O2液体分别按6 mL/m3、9 mL/m3和12 mL/m3的用量进行汽化熏蒸处理,作用60 min,检测屏障环境空气落下菌数和表面细菌数。结果 6 mL/m3用量能够杀灭二更、清洁走廊、洁存间、次清洁走廊和缓冲间等空气落下菌较少区域的空气细菌;9 mL/m3用量可以完全杀灭动物饲养室的空气细菌,但不能完全杀死动物饲养室内表面细菌;而12 mL/m3用量可以完全杀死动物饲养室内表面细菌。结论H2O2蒸汽消毒适合屏障环境微生物的控制,操作简单,效果明显。

硅对不同程度干旱胁迫下甘草种子萌发和幼苗生长的影响

目的:研究不同程度干旱胁迫下硅对甘草种子萌发和幼苗生长阶段的调控效应及其最佳浓度。方法:通过水培发芽试验,采用不同浓度PEG-6 000水溶液模拟干旱胁迫环境,根据生产实践设置较多水平的干旱胁迫(0%、5%、10%、15%、20%、25%、30%PEG-6 000),设置了3个硅(K2Si O3)浓度(0、1、3 m M)。结果:轻中度(5%-15%PEG)干旱胁迫对甘草种子萌发和幼苗生长没有明显的抑制,重度(≥20%PEG)干旱胁迫明显抑制甘草生长、降低其幼苗生物量。施硅能显著促进试验所设条件下甘草种子萌发及其幼苗生长,且这种促进效应因硅浓度和干旱胁迫程度而异,具体表现为:在所有干旱条件下1 m M硅的促进作用明显强于3 m M;就1 m M硅而言,在重度(≥20%PEG)干旱胁迫下的促进作用强于轻中度(5%-15%PEG)干旱胁迫。结论:硅参与了干旱条件下甘草生长发育的生理生化进程,从而缓解干旱胁迫,促进其生长,但硅具体参与了哪些生理生化过程,需要进一步证实。

细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合基因在昆虫细胞/杆状病毒中的表达

目的利用昆虫细胞/杆状病毒系统表达细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白,用于开发包虫病新型疫苗以及建立相关血清学诊断方法等研究。方法从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后提取总RNA为模板,通过RT-PCR扩增细粒棘球蚴Eg95和Eg.ferritin基因,采用基因拼接法将Eg95和Eg.ferritin融合,将该融合基因Eg95-Eg.ferritin插入到p Fast Bac DUAL载体中,构建重组转座载体后转化DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染Sf-9昆虫细胞,传毒3代,对表达蛋白进行Western blot鉴定。结果成功克隆了Eg95和Eg.ferritin基因,通过柔性氨基酸linker成功获得了融合基因Eg95-Eg.ferritin,经PCR和酶切鉴定成功构建了重组质粒p Fast Bac DUAL-Eg95-Eg.ferritin,Western blot结果证实表达蛋白能够被包虫病人标准阳性血清识别。结论在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中成功表达了细粒棘球蚴Eg95-Eg.ferritin融合蛋白,与包虫病人标准阳性血清具有良好的反应性。

NaCl胁迫对银柴胡药材活性成分含量及其积累量的影响研究

[目的]研究盐胁迫对银柴胡药材产量和活性成分相对含量及积累量的影响,以明确盐胁迫对银柴胡药材产量和质量的影响效应,为银柴胡的规范化栽培提供理论依据。[方法]盆栽控盐试验栽培柴胡一年生幼苗,土壤盐含量设置为2、3、4 g/kg 3个水平;利用紫外分光光度法测定银柴胡药材中总黄酮和总皂苷的相对含量,并结合产量计算其积累量。[结果]随着土壤中NaCl含量的增加,银柴胡药材产量呈现逐渐下降的趋势;药材中总黄酮和总皂苷相对含量呈现逐渐升高的趋势,而其积累量呈先升高后降低的趋势。[结论]盐胁迫显著提高银柴胡药材产量、总黄酮和总皂苷的含量,当土壤盐含量为3 g/kg时,银柴胡药材总黄酮和总皂苷积累量均较高,有利于银柴胡药材的优质高产栽培。

中药锁阳水煎剂对大鼠前列腺增生及氧化应激的影响

目的:研究锁阳水煎液对大鼠前列腺增生的影响及作用机制。方法:60只SD大鼠随机均分为空白对照组、前列腺增生模型组、前列康治疗组、锁阳水煎液高、中、低剂量治疗组6组。除空白对照组外,各组大鼠注射丙酸睾酮制作前列腺增生模型,模型组和空白对照组以生理盐水灌胃,前列康治疗组用前列康(570mg·(kg·d)-1)灌胃、锁阳干预组用锁阳水煎液120、80、40mg·(kg·d)-1灌胃。60天后处死大鼠,观察前列腺湿重及指数的变化,采用试剂盒法检测SOD、GSP活性和MDA含量。结果:各治疗组大鼠前列腺湿重和指数均显著低于模型组;SOD和GSH明显高于模型组,且MDA含量明显低于模型组。结论:锁阳水煎液可抑制大鼠前列腺增生,其作用可能与改善组织中氧化应激水平有关。

回药回回豆降低高血脂大鼠TC和TG的作用研究

[目的]研究回回豆水煎剂对高血脂大鼠血清中中总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)的降低效果,为回回豆抗大鼠高血脂症的研究提供理论依据。[方法]建立大鼠高血脂模型,检测回回豆对大鼠血清中TC、TG的影响效应。[结果]1血清TG、TC与对照组比较显著增加,表明造模成功;2给药28 d后,回回豆水煎液低、中、高剂量组与模型组比较,TC分别降低了16.7%、18.6%、17.5%,TG分别降低了7.8%、7.8%、7.8%;回回豆水煎液低、中、高剂量组均与对照组无显著差异。[结论]回回豆水煎剂可降低高血脂大鼠血清中TC和TC的浓度。

不同产地栽培甘草药材中黄酮类成分含量对比及其与土壤因子的相关性研究

目的:研究不同产区栽培甘草黄酮类成分含量差异及其与土壤因子的关系。方法:以内蒙古、甘肃、宁夏3个产区栽培的3年生甘草药材及根围土壤为材料,测定甘草中黄酮类成分含量,分析相应土壤理化特性及矿质元素等含量,通过通径和回归分析研究土壤因子对甘草黄酮类成分含量的影响。结果:总黄酮含量在甘肃较高、内蒙古和宁夏基本相当,异甘草素含量在甘肃较高、宁夏次之、内蒙古较低,甘草查尔酮和甘草素含量在不同产区差异较大。土壤因子对甘草黄酮类成分含量有显著影响,总黄酮的土壤决定因子为Cu和Ca,甘草查尔酮的土壤决定因子为Fe、速效磷和K,异甘草素的土壤决定因子为K、Ca、交换性K^(+)、过氧化氢酶活性和速效钾,甘草素的土壤决定因子为Mn、Ca和pH。结论:不同产区甘草药材黄酮类含量差异明显,黄酮类成分最主要的土壤决定因子为Ca和K。

硅对盐胁迫下甘草非药用部位总黄酮、总皂苷积累动态的影响

目的:明确甘草非药用部位总黄酮、总皂苷的积累动态及外源硅对其非药用部位总黄酮、总皂苷积累的影响效应,为甘草药用资源的综合利用提供理论依据。方法:采用盆栽试验栽培甘草植株,在其生长周期内动态采集甘草非药用部位,采用UV-Vis法测定甘草非药用部位中总黄酮、总皂苷含量。结果:甘草叶中总黄酮、总皂苷含量显著高于茎中。甘草茎中总黄酮含量在生长周期呈"V"型变化规律,而叶中总黄酮含量呈倒"V"型。不同浓度外源硅明显提高了不同采样时期甘草茎、叶中总黄酮、总皂苷含量,且这种促进效应的大小因采样时期、采样部位和硅浓度不同而异。综合而言,0.6 g/kg外源硅对总黄酮、总皂苷积累的促进作用最强。结论:硅对盐胁迫下甘草非药用部位茎、叶中总黄酮、总皂苷的积累有明显的促进作用。