bFGF在肌腱损伤修复中的研究进展

肌腱损伤是临床常见的疾病之一,由于肌腱是致密结缔组织,而肌腱细胞是高度分化的间充质细胞,分化增殖能力较弱,因此,肌腱损伤后很难自行愈合。而通过手术修复后又需较长时间行外固定,既影响功能锻炼,又易导致粘连,从而影响手术效果。目前研究表明,多种细胞因子对肌腱愈合均有促进作用,特别是碱性成纤维细胞生长因子（b FGF）,因其具有刺激血管生成、成纤维细胞增殖、迁移及分泌胶原的作用而备受关注[1]。

微小RNA-181c靶向调控半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3信号通路对脑出血大鼠神经的保护作用

目的:探讨微小RNA(miR)-181c对脑出血(ICH)大鼠神经的作用及靶向半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)信号通路调控ICH的分子机制。方法:选取60只SD雄性大鼠,采用随机数字表法分为假手术组(Sham组)、ICH组、表达miR-181c激动剂组(ICH+agomir组)和表达miR-181c抑制剂组(ICH+antagomir组),每组15只。提取各组大鼠脑组织RNA,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测miR-181c的表达水平;采用苏木精-伊红(HE)染色、尼氏染色、Zea Longa评分标准评估各组大鼠脑损伤及神经功能;采集各组大鼠脑脊液,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、3-硝基酪氨酸(3-NT)及4-羟基壬烯酸(4-HNE)的水平;提取各组大鼠脑组织蛋白,采用蛋白质免疫印迹实验检测Caspase-3剪切体/Caspase-3前体的表达水平。采用生物信息学分析、荧光素酶报告基因实验分析miR-181c对Caspase-3的靶向调控关系,两组间比较采用独立样本t检验。结果:RT-qPCR结果显示,ICH组miR-181c的表达水平低于Sham组(0.56±0.09比1.00±0.13,t=7.230,P<0.05)。HE染色结果显示,ICH组神经元细胞数量减少、体积变小、排列不齐,出现空泡样改变,核固缩、破裂,ICH+agomir组上述改变减轻。尼氏染色结果显示,ICH+agomir组神经元细胞浆中的尼氏小体数量多于ICH组(98.30±14.12比48.90±9.20,t=9.337,P<0.01),ICH+antagomir组与ICH组比较差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA结果显示,ICH+agomir组大鼠脑组织TNF-α、IL-1β、3-NT和4-HNE的水平显著低于ICH组[TNF-α:(3.30±1.25)ng/ml比(8.22±1.66)ng/ml,t=9.120,P<0.01;IL-1β:(9.87±3.02)ng/ml比(15.14±2.93)ng/ml,t=8.183,P<0.01;3-NT:(23.39±3.44)pg/ml比(45.61±2.65)pg/ml,t=7.902,P<0.01;4-HNE:(10.10±1.75)pg/ml比(14.93±2.63)pg/ml,t=5.778,P<0.05]。蛋白质免疫印迹结果显示,ICH组Caspase-3剪切体/Caspase-3前体的表达水平显著高于Sham组(2.63±0.58比1.00±0.10,t=8.190,P<0.01),ICH+agomir组大鼠脑组织Caspase-3剪切体/Caspase-3前体的水平显著低于ICH组(1.52±0.37比2.63±0.58,t=5.398,P<0.05)。生物信息分析结果显示,miR-181c与Caspase-3有互补的核苷酸序列,miR-181c mimics+野生型-Caspase-3组细胞荧光素酶活性显著低于NC mimics+野生型-Caspase-3组(0.52±0.07比1.03±0.08,t=6.334,P<0.01)。结论:miR-181c通过靶向抑制Caspase-3信号通路,减轻大鼠ICH后神经功能损伤和继发性脑水肿,降低脑组织的氧化应激水平和炎性反应,对ICH大鼠具有保护作用。

PDS加强缝合联合早期功能锻炼预防肌腱粘连的实验研究

目的研究一种新的缝合方法(PDS加强缝合)联合早期功能锻炼对减轻或防止肌腱粘连形成的作用。方法健康成年Leghorn鸡60只,体重2.0~2.5 kg,雌雄不限,随机分为3组:A组为单纯缝合;B组为普通缝合+早期功能锻炼;C组为PDS加强缝合+早期功能锻炼,每组20只。于术后第4周、8周进行大体解剖学、组织形态学、生物力学观察和羟脯氨酸含量测定。采用Kruskal-Wallis H检验、Nemenyi法检验、方差分析和t检验进行统计学分析。结果 B、C组吻合口与周围组织粘连较少,光镜下B、C组含较丰富的成纤维细胞,排列规则。粘连评分结果示:术后4、8周A组与B、C组的差异均有统计学意义(H4=12.12,P4=0.002<0.05;H8=9.50,P8=0.009),粘连程度均为A>B、C。肌腱滑移距离示:术后4周A组(2.71±0.51)距离最短,与B组(4.80±0.64)和C组(4.96±0.62)比较差异有统计学意义(F=35.896,P<0.05);术后8周A组(3.34±0.43)距离亦最短,与B组(5.59±0.52)和C组(5.83±0.56)比较差异有统计学意义(F=58.599,P<0.05)。肌腱的抗张强度示:术后4周C组(8.38±0.44)优于A组(6.44±0.41)和B组(7.54±0.54),差异有统计学意义(F=34.391,P<0.05);术后8周A组(13.29±0.72)、B组(13.73±0.45)、C组(13.44±0.51)三组间差异无统计学意义(F=1.210,P>0.05)。羟脯氨酸含量示:术后4周B组(1.60±0.32)和C组(1.69±0.23)含量较A组(1.20±0.39)丰富,差异有统计学意义(F=3.997,P<0.05);术后8周B组(2.73±0.50)和C组(2.40±0.34)含量仍多于A组(1.77±0.29),差异有统计学意义(F=3.997,P<0.05)。结论 PDS加强缝合可以为术后早期功能锻炼提供足够的强度支持,而术后早期功能锻炼会防止或减少肌腱粘连。

依达拉奉对大鼠肢体缺血再灌注损伤的影响

目的探讨依达拉奉干预大鼠肢体缺血再灌注损伤后对Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性的影响及超微结构的改变,为治疗肢体缺血再灌注损伤提供新的方法。方法制作大鼠肢体缺血再灌注损伤模型,依达拉奉灌注组(ME组)于再灌注前5 min经左股静脉注射依达拉奉,模型组(M组)及正常组(N组)则给予等量的生理盐水。于再灌注24 h时,取每组大鼠右胫前肌,用光镜及电镜观察其形态学变化,并检测Na+-K+-ATP、Ca2+-ATP酶活力。采用方差分析和LSD法进行统计学分析。结果 (1)光镜结果显示:ME组比M组肌纤维形态较整齐,形态较整齐,水肿程度及炎细胞浸润均减轻;(2)电镜结果显示:ME组与M组比较,M线、Z线较清晰,线粒体肿胀减轻,线粒体数量及嵴增多;(3)Na+-K+-ATP酶活力显示,N组(13.24±2.14)U/mgprot酶活力最高,ME组[(10.15±1.79)U/mgprot]和M组[(5.19±0.58)U/mgprot]酶活力逐渐减低,差异有统计学意义(F=60.817,P<0.001),组间差异均有统计学意义(P<0.05);(4)Ca2+-ATP酶活力显示:N组[(2.71±1.38)U/mgprot]酶活力高于ME组[(1.89±0.37)U/mgprot],以M组[(0.32±0.27)U/mgprot]酶活力最低,差异有统计学意义(F=21.056,P<0.001),组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论依达拉奉可以减轻大鼠肢体缺血再灌注区域线粒体的损伤,相应地提高Na+-K+-ATP酶及Ca2+-ATP酶的活力,从而减轻肢体缺血与再灌注损伤,为临床缺血与再灌注损伤的预防及治疗提供新的方法。