p27^(kip1)基因在大鼠自体静脉移植中的表达

目的:观察p27kip1基因在静脉移植模型中的动态表达及与内膜增生的关系。方法:建立大鼠自体静脉移植动物模型,分别于术后1,2,3,7,14,28d取材。Verhoeff染色观察各时间点内膜厚度及管壁厚度;RT-PCR、原位杂交、Western blot检测p27kip1mRNA及蛋白的变化,免疫组化(SABC)法检测p27kip1、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果:术后7d内膜明显增厚,14d内膜增厚达到高峰(P<0.01)。p27kip1蛋白在正常对照血管可见表达,术后3d内无表达,术后7d开始表达,14d明显增高,28d达到高峰(P<0.01)。mRNA的表达于术后7d出现增高,持续表达至28d,其间各时间点之间表达无明显差异。PCNA的表达于术后7～14d达到高峰。结论:p27kip1基因的表达可能是抑制移植静脉内膜增生的环节之一,其可能成为治疗移植血管狭窄、闭塞的目的基因。

低能量红激光局部照射对自体移植静脉内膜增生的影响

目的 探讨低能量红激光局部照射对自体移植静脉内膜增生的影响。方法 取 80只大鼠 ,随机分为单纯自体静脉移植组 (对照组 ,n =40 )和低能量红激光局部照射组 (激光组 ,n =40 )。两组大鼠分别于术后第 3d、7d、14d及2 8d取移植静脉段 (每时相组各 10只 )固定 ,行HE染色、弹力纤维染色及增殖细胞核抗原 (PCNA)免疫组化染色 ,应用光学显微镜和计算机图像分析系统分析测定其内膜厚度和管腔面积。结果 术后第 3d ,两组管腔横截面积及内膜平均厚度差异无显著性意义 (P>0 .0 5 ) ;激光组术后第 7d、14d、2 8d内膜平均厚度低于对照组 (P<0 .0 5 ) ,管腔横截面积明显大于对照组 (P<0 .0 5 ) ;PCNA免疫组化染色结果显示 ,激光组移植静脉平滑肌细胞 (VSMC)增殖受到明显抑制 (P<0 .0 1)。结论 低能量红激光局部照射可以抑制自体移植静脉内膜及VSMC的增生 ,减少再狭窄的发生。

精氨酸对大肠癌病人肿瘤细胞增殖活性的影响

目的 :研究精氨酸 (arginine,Arg)对大肠癌病人的肿瘤细胞增殖活性的影响。 方法 :大肠癌病人 44例、随机分为实验组、对照组。实验组每日静脉输注Arg 2 5g、连续 3d。免疫组化方法 (S P法 )观察肿瘤增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)表达的变化、流式细胞仪检测肿瘤细胞周期各时相百分比。 结果 :实验组PCNA表达显著下降 ,由 5 5 .3%降至 43.9% (P <0 .0 1) ,S期 %及 (S +G2 +M )期 %亦显著降低 ,而对照组各指标均无显著变化 (P >0 .0 5 )。结论 :短期应用药理剂量的Arg可以抑制大肠肿瘤细胞增殖活性 。

13例腹主动脉瘤破裂的急救处理

目的 探讨破裂性腹主动脉瘤及时有效的诊断方法及抢救措施.方法 回顾性分析2002-01～2009-12收治的13例肾动脉下腹主动脉瘤破裂患者的临床资料.临床表现均为腹痛和腰背痛,血压下降或休克,腹部可触及搏动性肿块.所有患者均行开腹止血,腹主动脉瘤切除人工血管植入术.均阻断腹主动脉瘤颈上端的主动脉控制出血,行人工血管重建.结果 术中和术后死亡5 例（38.46%）,3例发生急性肾功能不全,3例发生肺部感染,均经相应治疗后痊愈出院.2例术后无并发症,痊愈出院.结论 CTA、多普勒超声等检查适于生命体征相对稳定的疑似病例.开腹手术是治疗破裂腹主动脉瘤的有效方法,手术控制出血和人工血管植入术是挽救生命的有效手段.

Stat3和Stat5在分化型甲状腺癌组织中的表达及意义

目的:研究分化型甲状腺癌(DTC)组织中信号转导和转录激活因子Stat3和Stat5的表达情况及其与甲状腺癌临床病理因素和相关抑癌基因之间的关系,探讨Stat3和Stat5在DTC发生、发展中的作用。方法:应用免疫组织化学SABC法检测42例DTC[包括38例乳头状癌(PTC)和4例滤泡状癌(FTC)]、30例甲状腺腺瘤(TA)及15例正常甲状腺组织(NTT)中Stat3、Stat5、P53及P21蛋白的表达,比较不同组织中阳性细胞表达率,分析其与DTC临床病理参数的相关性。结果:Stat3和Stat5在DTC组织中的阳性率显著高于TA和NTT(P<0.05),二者表达率与DTC病理分型密切相关(r=0.76,P<0.05;r=0.80,P<0.05);Stat3和Stat5在PTC中的表达率明显低于FTC(P<0.05),且Stat5的表达率明显高于Stat3,二者呈正相关(r=0.78,P<0.05)。DTC组织中P53蛋白阳性表达率(30.9%)明显高于TA(0%)和NTT(0%)(P<0.05)。P21蛋白阳性表达率(14.3%)在DTC组织中明显降低。Stat3和Stat5在DTC组织中表达率分别为54.8%和66.7%,明显高于P53表达率(30.9%),且分别与P53表达率呈正相关(r=0.77,P<0.05;r=0.72,P<0.05),与P21表达率呈负相关(r=-0.87,P<0.05;r=-0.67,P<0.05)。结论:Stat3和Stat5参与DTC病理分型,其异常表达率可能与p53基因的突变、抑癌基因p21的失活有关。Stat3和Stat5表达率的异常增高可能是DTC发生、发展的原因之一。

p27kip1基因纳米粒子抑制鼠移植静脉内膜增殖的实验研究

用美国FDA批准使用的生物可降解材料聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)为载体材料,制备载p27kip1基因的纳米粒子.用激光光散射法测定纳米粒子的平均粒径为288.9nm,粒径呈窄分布,扫描电镜观察纳米粒子表面光滑.DNA含量为3%.包封效率为86%.观察p27kip1基因纳米粒子的体外释放情况,发现DNA体外最初释放速度较大,约1周后释放速度开始减缓,可维持平稳释放15天以上.体外转染大鼠血管平滑肌细胞,用流式细胞仪检测到p27kip1基因纳米粒子对细胞周期进程的抑制作用.建立自体静脉移植大鼠模型,随机分成三组进行试验:p27kip1基因纳米粒子组,空白纳米粒子组,单纯静脉移植组.分别于给药后3天、7天、14天、28天取材,HE染色及Verhoeff染色检测内膜厚度,蛋白质印迹检测P27抑癌基因蛋白的表达,免疫组化SABC法检测移植静脉内膜PCNA、E2F表达.动物模型试验中转基因组内膜平均厚度较其他组明显减少(P<0.01);转基因组PCNA的表达较其他组明显降低(P<0.01);转基因组E2F的表达7￣14天较其他组显著降低(P<0.01);对照组及单纯静脉移植组之间均无明显差异.纳米粒子作为p27kip1基因载体能够有效抑制自体静脉移植后内膜平滑肌细胞的增殖.

无张力疝修补术治疗老年腹股沟复发疝67例

无张力疝修补术具有操作简单、创伤小、恢复快、复发率低的优点，更符合人体腹股沟的解剖生理。目前对成人腹股沟疝的治疗，尢张力疝修补术已逐渐代替了传统的张力性修补术，传统手术修补方法的再次复发率高，而老年人腹股沟疝往往同时合并有慢性咳嗽、慢性支气管炎、肺气肿、

纳米粒子介导的BMP-2基因转染对移植血管内膜增生的抑制作用

目的:研究人骨形态发生蛋白2(BMP-2)基因局部转染后,BMP-2基因蛋白过表达对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用,探讨防治移植静脉再狭窄的新途径。方法:以包载BMP-2基因的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)的纳米级粒子混合物(BMP-2-PLGA)转染培养的兔VSMC,作为BMP-2-PLGA纳米粒子组,同时设空白PLGA纳米粒子组及对照组,MTT法测定细胞增殖活性,流式细胞术分析细胞周期。建立自体静脉移植兔模型,随机分成转基因组、空白载体粒子组及单纯静脉移植对照组,分别于术后3、7、14和28d取出移植静脉,Verhoeff染色检测血管内膜厚度,Western blotting法检测BMP-2蛋白的表达,免疫组织化学法检测BMP-2及增殖细胞核抗原(PCNA)表达。结果:与对照组比较,BMP-2-PLGA纳米粒子组细胞发生明显的G1期阻滞(P<0.05),细胞增殖抑制率及细胞凋亡率增加(P<0.05)。与空白载体粒子组及单纯静脉移植对照组比较,转基因组兔血管内膜平均厚度明显减少(P<0.05),空白载体粒子组与单纯静脉移植对照组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白载体粒子组及单纯静脉移植对照组比较,转基因组兔移植静脉组织BMP-2蛋白表达于术后3、7和14d明显增多(P<0.05),PCNA表达于术后7～28d明显降低(P<0.01);空白粒子组与单纯静脉移植对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:BMP-2基因的表达能够有效抑制自体静脉移植后内膜增生及VSMC的增殖,促进体外培养VSMC的凋亡。

大鼠自体移植静脉中转化生长因子β1和基质金属蛋白酶1及其抑制剂的基因表达

目的观察转化生长因子β1和基质金属蛋白酶1及其抑制剂在大鼠自体移植静脉中的动态表达,探讨它们与移植静脉内膜增生之间的关系。方法建立大鼠自体静脉移植模型,随机分成3、7、14和28天组。行苏木素—伊红及Verhoffe染色,计算机图像分析系统测量不同时间点的内膜和血管壁厚度。采用Western印迹和逆转录—聚合酶链反应测定转化生长因子β1、基质金属蛋白酶1及基质金属蛋白酶组织抑制剂1的蛋白及mRNA表达。结果术后7天内膜明显增厚,与对照组比较有统计学意义(P<0.05),术后14天内膜增生达到高峰。转化生长因子β1蛋白表达在术后第3天开始增加,第7天达到高峰,第28天回到基线水平。3天和7天组基质金属蛋白酶1的蛋白水平与对照组比较没有明显差别,14和28天组比对照组明显减少。基质金属蛋白酶组织抑制剂1的蛋白表达在第14和28天明显增加。三者mRNA水平的变化趋势与蛋白表达结果相似。结论转化生长因子β1通过破坏基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶组织抑制剂1之间的平衡,从而使细胞外基质过量堆积,是内膜增生和血管狭窄形成的机制之一。

p27kip1基因纳米粒子在动物模型上的应用

目的p27 Kip1是一种细胞周期素依赖激酶抑制物,它抑制G1期的进程并对其进行调节。方法采用乳化-溶剂挥发法制备含p27kip1的纳米粒子,粒度集中分布在243～343 nm,平均粒度为288．9 nm,粒径呈窄分布,粒度分布指数为0．192。p27Kip1纳米粒子的载基因率为3％。包封效率为86％。p27Kip1基因纳米粒子的体外释放,开始的5 d累积释放曲线接近直线,约1周后释放量开始变慢,释放曲线缓慢上升,可平稳维持释放2周以上。用p27kip1基因纳米粒子转染大鼠动脉平滑肌细胞,分为p27Kip1基因纳米粒子组、空白纳米粒子组、对照组,培养48 h后收集细胞,流式细胞仪测定p27kip1纳米粒子对细胞周期调控的结果显示转染前细胞G1／G0期比例为92．4％,转染后48 h,对照组及空白纳米粒子组G1／G0期比例为64．5％、68．3％,S期为12．4％、10．3％,表明G0／G1→S的过程非常迅速,细胞增殖活跃。而基因组G1／G0期比例为88．3％,S期为7．2％,说明细胞发生G1期阻滞,细胞增殖受到抑制。建立大鼠自体静脉移植模型,随机分成转基因治疗组、空白纳米粒子组、单纯静脉移植组,应用显微...

低能量红激光局部照射对移植血管内膜平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的：研究低能量红激光局部照射对自体移植静脉段内膜平滑肌细胞增生与凋亡的影响及其可能机制。方法：建立80只大鼠自体静脉移植模型。随机分成低能量红激光局部内膜照射组，对照组，每组按取材天数3、7、14、28天随机分成4个亚组，每组10只，取材固定，行HE染色，Verhoeff弹力纤维染色，增殖细胞核抗原（PCNA），p53,blc-2,bax免疫组化（SABC法）测定，TUNEL法检测VSMC凋亡，计算机图像分析仪测量移植血管内膜厚度，计算细胞增殖及凋亡百分比。结果：术后两组移植静脉段的内膜平均厚度，激光组明显低于对照组（P<0.05);PCNA阳性片示，激光组VSMC增殖较对照组受到明显抑制（P<0.01)。凋亡检测示，凋亡指数14、28天激光组高于对照组（P<0.01);p53的表达，两组间无明显差异（P>0.05)；bax/bcl-2的表达，14、28天激光组高于对照组（P<0.05)。结论：低能量红激光局部照射可以抑制自体移植静脉的内膜增生及VSMC的增殖，促进VSMC的凋亡，减少再狭窄的发生，其机制可能是通过bax,bcl-2基因的表达来实现的。

乳房手术中医源性损伤27例分析

乳房手术中医源性损伤２７例分析闻博教授赵启凤，赵庆森，张健，郎晓讴，吴树森沈阳医学院附属中心医院（１１００２４）因乳房疾病取手术治疗的病人临床常见，术中医源性损伤来院求医者也非罕见，１９８４～１９９３年，接治有明显症状及体征的２７例。本文从解剖学观点...

疝环填充式无张力疝修补术后补片感染20例临床分析

目的:分析疝环填充式腹股沟疝无张力修补术后补片感染的原因,探讨临床防治对策。方法:对20例腹股沟疝在疝囊高位结扎后行无张力修补术,术后感染患者的资料进行回顾性分析。结果:本组患者手术时间30～80min,平均45min。感染发生于术后3周内12例,发生于3周后8例,其中4例再次手术去除补片,另外16例全身应用抗生素或局部换药治疗,均治愈出院,随访6～18个月感染无复发。结论:人工补片无张力疝修补术发生术后感染应根据其具体情况决定是否去除补片或应用抗生素治疗。

超声诊断在脾外伤的应用评估

超声诊断在脾外伤的应用评估沈阳医学院附属中心医院普外科（１１００２４）曾克，郎晓讴沈阳医学院附属中心医院电诊科徐凤媛辽宁省中医研究院普外科（１１００３１）王佳禾在腹部脏器的损伤中，脾脏的损伤是最多见的，其发病率几占各种腹部损伤的４０～５０％（１）。单...

Skp2-P^27kip1通路及其相关凋亡基因在结肠癌组织中的表达及意义

目的:探讨Skp2和P27kip1蛋白在结肠癌中的表达及其相关性,阐明两者在结肠癌的发生和发展中的作用。方法:应用免疫组织化学SABC法检测50例结肠癌患者癌组织和20例正常结肠组织中Skp2、P27kip1、P53和Bcl-2蛋白的表达,比较不同组织中阳性细胞表达百分比,分析其与结肠癌临床病理参数的相关性。结果:与正常组织比较,结肠癌组织中Skp2蛋白阳性表达率增加(P<0.05),P27kip1蛋白阳性表达率降低(P<0.05)。Skp2蛋白阳性表达率在临床Duck’s分期C和D期结肠癌、低分化结肠癌及伴有淋巴结转移的结肠癌组织中增加(P<0.05),P27kip1蛋白阳性表达率在临床Duck’s分期A和B期结肠癌、高分化结肠癌及无淋巴结转移的结肠癌组织中增加(P<0.05)。P53和Bcl-2蛋白在低分化结肠癌组织中均高表达(P<0.05)。结肠癌中Skp2与P27kip1的表达率呈负相关关系(r=-0.282,P<0.05),与P53及Bcl-2蛋白阳性表达率分别呈正相关关系(r1=0.345,r2=0.231,P<0.01)。结论:Skp2和P27kip1蛋白的异常表达参与了结肠癌组织的分化、浸润和转移,相关凋亡基因P53及Bcl-2蛋白表达上调可能是其作用机制之一。

Foxp3 β-catenin在乳腺癌组织中的表达及其与临床预后的关系

目的:探讨叉头状/翼状螺旋转录因(Foxp3)、β-连环蛋白(β-catenin)在乳腺癌组织中的表达及其与临床预后的关系。方法:选取2016年8月至2018年8月本院乳腺癌及其癌旁正常组织80例,采用免疫组织化学法检测组织中Foxp3、β-catenin表达情况,分析二者与乳腺癌病理特征及生存预后的关系。结果:乳腺癌组织中Foxp3、β-catenin表达阳性率明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);乳腺癌组织中Foxp3、β-catenin表达与临床分期、病理分级、淋巴结转移有关(P<0.05);乳腺癌组织中Foxp3与β-catenin表达呈正相关(P<0.05);生存曲线分析显示,Foxp3、β-catenin表达阳性者1年生存率明显低于Foxp3、β-catenin表达阴性者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Foxp3、β-catenin与乳腺癌的发生发展有关,二者表达呈正相关,提示检测二者表达可作为评估乳腺癌临床预后的重要指标。

保留胰腺的十二指肠肿瘤的手术疗效临床分析

目的:探讨保留胰腺的十二指肠切除术(PSD)的临床应用。方法:回顾性分析行PSD患者的临床资料。结果:本组包括6例早期恶性肿瘤,3例潜在恶性肿瘤,3例良性肿瘤。结论:保留胰腺的十二指肠切除术治疗十二指肠周围的良性和某些低度恶性病变是一种较为理想的选择。

^(32)P局部照射对移植静脉内膜平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的 研究 β射线局部照射对自体移植静脉内膜平滑肌细胞 (VSMC)增生与凋亡的影响及可能机制。 方法 建立 80只大鼠自体静脉移植模型 ,随机分成32 P局部照射组、对照组 ,每组按 3、7、14、2 8d随机分成 4个亚组、每亚组 10只。取材固定 ,弹力纤维染色 ,增殖细胞核抗原、p5 3、bcl 2、bax免疫组化测定 ,TUNEL法检测静脉平滑肌细胞的凋亡 ,计算机图象分析仪测量移植血管内膜厚度 ,计算细胞增殖及凋亡百分比。 结果 术后 2组移植静脉段的内膜平均厚度 :7、14、2 8d ,照射组明显低于对照组 (t=15 694 ,P <0 0 5 ) ;7、14d照射组VSMC增殖较对照组受到明显抑制 (t =60 15 7,P <0 0 1)。凋亡指数 14d照射组高于对照组 (t=5 6 176,P <0 0 1)。p5 3的表达 ,2组间差异无显著性意义 (t=0 4 73 ,P >0 0 5 ) ,bax与bcl 2的表达 ,14d照射组高于对照组 (t=9 783 ,P <0 0 5 )。 结论 32 P局部照射可以抑制自体移植静脉的内膜增生及VSMC的增殖 ,促进VSMC的凋亡 ,可能是通过bax、bcl

纳米粒子介导的p27^(kip1)基因转染对静脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的探讨以纳米粒子为载体的人p27kip1基因转染对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用。方法聚乳酸聚乙醇酸共聚物包载p27kip1基因,制备纳米级粒子混合物。转染培养的大鼠血管平滑肌细胞,流式细胞仪分析细胞周期。建立自体静脉移植动物模型,随机分成转基因组、空白载体对照组、单纯静脉移植组。分别于术后3、7、14、28d取材,进行苏木素伊红(HE)及Verhoeff染色检测内膜厚度、Westernblot检测p27kip1基因蛋白的表达、免疫组织化学法,检测外周血增殖细胞核抗原(PCNA)、E2F表达。结果转基因组表达蛋白,3、7、14d较其他俩组明显增多(P<0.05);转基因组内膜平均厚度较其他组明显减少(P<0.01),对照组及单纯静脉移植组之间差异无统计学意义(P>0.05);转基因组PCNA的表达7～28d较其他组明显降低(P<0.01),其E2F的表达7～14d较其他组显著降低(P<0.01);对照组及单纯静脉移植组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论纳米粒子可以作为转基因载体,p27kip1抑癌基因的表达能够有效抑制自体静脉移植后内膜平滑肌细胞的增殖。