牛源无乳链球菌sip蛋白抗原优势区的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立

为测定牛源无乳链球菌表面免疫相关蛋白(sip)的抗原性,本实验通过建立间接ELISA方法,对该蛋白的抗原性进行分析及鉴定。根据无乳链球菌sip基因序列,设计一对引物,以临床分离菌株基因组DNA为模板,PCR扩增sip抗原表位优势区编码的基因序列,并将其与原核表达载体pET-30a(+)连接,构建重组质粒pET-sip,转化宿主菌BL21中,经IPTG诱导,获得重组蛋白,western blot分析表明,重组蛋白具有良好的抗原性。以纯化的表达产物作为包被抗原,建立检测无乳链球菌抗体的间接ELISA方法,确定抗原最佳包被浓度为3.125μg/mL,血清最佳稀释度为1∶160,酶标二抗最适稀释度为1∶4 000。应用该方法对无乳链球菌、化脓性链球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌兔阳性血清进行检测,结果表明,该方法具有良好的特异性和灵敏度。

奶牛乳房炎生物制剂研究进展

奶牛乳房炎(Mastitis)是奶牛最常见、最难防治、花费最多的疾病之一.奶牛乳房炎不仅给奶牛业带来极大的经济损失、制约奶牛业发展,还严重影响奶的品质和卫生,从而危及人的健康.目前控制奶牛乳房炎仍以传统的抗生素法治疗为主,但是所带来的耐药菌的产生及药残等成了更为严重的问题.而利用生物制剂防治奶牛乳房炎则具有无药残、不产生耐药、安全绿色的特点,因此愈来愈受人们的关注.本文就奶牛乳房炎生物制剂研究的最新进展进行综述.

一例鹅大肠杆菌病的诊断

鹅大肠杆菌病（Goose E．coli disease，GED）是由鹅致病性大肠埃希氏杆菌所引起的一种细菌性疾病。随着我国集约化养禽业的发展，禽大肠杆菌病在各地发生日趋严重，感染率达5％-30％，病死率几乎高达90％以上，正在成为危害养鹅业的主要疫病之一，多以并发病或继发病的形式出现陉圳，危害极大，给养禽业带来巨大的经济损失。常见感染途径是经带菌卵、呼吸道和消化道传染，以排泄物污染的饮水造成感染发病尤为严重。本文对一起鹅大肠杆菌病进行了诊断，现报告如下：

牛乳中无乳链球菌PCR快速检测方法的建立

根据GenBank公布的的SIP基因序列,设计一对特异性引物,通过对PCR方法的优化,建立了牛无乳链球菌性乳房炎的快速PCR检测方法。用建立的PCR检测方法对患牛乳中无乳链球菌总DNA进行扩增,获得大小为945bp的DNA片段。特异性试验表明,停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌DNA均未扩出条带;敏感性试验表明,该对引物能够检测到的最低DNA浓度为1.25ng;重复试验表明该方法具有良好的重复性和稳定性。

奶牛无乳链球菌内蒙古分离株SIP基因的克隆与序列分析

试验根据GenBank公布的牛源无乳链球菌SIP基因序列设计并合成1对引物,通过PCR扩增获得SIP基因部分扩增产物。序列分析结果表明:SIP基因扩增产物大小为945 bp,编码315个氨基酸残基。标准菌株(+株)与内蒙古分离株(M株)的基因及氨基酸同源性为100%,这2个菌株与Gen-Bank上公布的B群无乳链球菌菌株(DQ914274)SIP基因及氨基酸同源性达到98.94%及99.68%。

高致病性PRRSV ORF6和ORF7基因的遗传变异分析

从GenBank中选取8株国内报道的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒株,应用DNAStar软件对其ORF6、ORF7基因序列进行分析,与VR-2332株、LV株、国内及周边国家分离株进行核苷酸和推导氨基酸同源性比较,并绘制系统进化树.结果表明,高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒株的ORF6、ORF7核苷酸与VR-2332株的同源性为95.1%-95.4%、93.8%-94.1%,与欧洲型（LV）的同源性为69.4%-69.6%、67.9%-68.5%;ORF6、ORF7推导氨基酸与VR-2332株的同源性为97.7%、94.4%-95.2%,与欧洲型（LV）的同源性为80.0%-80.6%、65.3%-66.1%.系统进化树表明,8株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒株仍属于美洲型.说明猪繁殖与呼吸综合征病毒不断变异的现今,ORF6和ORF7基因依然高度保守.

肉鸡盈利新概念

肉鸡养殖过程中如何获得更高的经济效益是养殖户的终极目标，也是兽医工作者努力奋斗的方向。根据肉鸡疾病发展迅速且不易控制的特点而知养好肉鸡关键在于预防，大量临床实践证明只要是鸡群发病。就会增加治疗成本和死淘率损失等成本支出，从而减少经济收益。因此实践养殖中想要获得满意的经济效益．就必须从饲养管理入手预防疾病的发生和发展。怎样做才能获取更高的经济效益呢？笔者通过大量的实践经验和临床分析建议从以下几点人手：1勤擦洗水槽饮水是肉鸡养殖中的关键一步，

当前引起鸡产蛋率下降的病因分析

1发病及流行特点 该病是2010年末开始发生至今,具有一定的区域性流行性,病情发展迅速,迄今为止河北、河南、江苏、山西、山东、东北等省份的大中小型鸡场均有报道,

一例因鸡舍干燥引发肉鸡气囊炎的治疗

寒冷季节,在肉鸡养殖过程中,鸡舍保温是第一要素,通风也往往因为保温而受到限制。如果鸡舍内通风不良,氨气、二氧化碳、硫化氢等有害气体增多就会破坏呼吸道上皮黏膜的免疫屏障,再加上致病菌（支原体、大肠杆菌、流行性感冒等）的侵袭,鸡群就容易发生气囊炎。现将诊治的一气囊炎病例介绍如下：

合理免疫新城疫

家禽养殖过程中,新城疫已成为临床上发病率最广泛,危害最大的传染病之一。本病一年四季都可发生,各种品种的鸡都易感,以呼吸困难、下痢、神经紊乱、黏膜和浆膜出血为特征,具有很高的发病率和死亡率。鉴于当前为新城疫的高发期,特组织专题希望给您带来帮助。

怎样才能合理免疫新城疫疫苗

家禽养殖过程中，新城疫已成为临床上发病率最广泛、危害最大的传染病之一。各种品种的鸡都易感，多以非典型症状出现。而且发病日龄和发病季节已没有明显的流行特点。在基层养殖过程中，有的养殖户没有系统的养殖知识，他们往往只是听从别人的意见，人家怎么说就怎么做，所以对新城疫的免疫存在很多误区，导致免疫失败，成为临床新城疫发病越来越频繁的原因之一。

副猪嗜血杆菌研究现状及综合防控

副猪嗜血杆菌(HPS)属于巴斯德菌科嗜血杆菌属,革兰氏阴性菌,是猪上呼吸道一种常在菌。主要造成猪只的肺炎、脑膜炎、关节炎、浆膜炎和败血症。发病日龄主要集中在保育阶段的仔猪,特别是在猪群感染猪蓝耳病或者猪圆环病毒病等免疫抑制性疾病时,极易继发副猪嗜血杆菌病,对国内外养猪业造成巨大经济损失。本文通过对该病的病原学、流行病学和综合防控简要概述,以期对养殖场有效防控副猪嗜血杆菌防控提供一定的帮助。

这群鸭子怎么了?

约1/2的鸭子精神沉郁,体重比正常鸭子小1/3;1/3的鸭子出现眼流泪……1发病特点菏泽地区闫某饲养了白鸭10000只,分两棚饲养,10日龄时其中一棚鸭子出现零星死亡,因几天前鸭出现轻微感冒和呼吸道症状,正在投喂药物,没有在意,13日龄时死亡数量增加到30多只,遂打电话求诊。2临床症状可见约1/2的鸭子精神沉郁。

牛乳腺炎无乳链球菌内蒙古分离株sip基因抗原表位序列的高效表达及其抗原性鉴定

目的本实验的目标是克隆、高效表达牛源无乳链球菌的sip基因抗原优势区序列,并进行其抗原性鉴定。方法根据GenBank中已公布的牛源无乳链球菌sip基因序列抗原表位序列设计1对引物,以无乳链球菌分离菌株基因组DNA为模板,PCR扩增sip抗原表位序列,并进行克隆、测序、转化、表达及抗原性鉴定。结果克隆的sip基因抗原表位序列为897 bp,编码299个氨基酸,与GenBank中公布的牛无乳链球菌sip基因(AF151361)比对后,其相似性为99.8%,氨基酸相似性为99.7%;经高效表达后其可溶性表达率48.7%。重组蛋白的分子质量单位为40.3 ku。经纯化得到纯度在90%以上的SIP蛋白,Western blot显示重组蛋白能被抗无乳链球菌血清识别。结论本研究成功构建了rSIP-pET30(a)重组质粒,并高效表达SIP,且该重组蛋白具有抗原性,为建立奶牛隐性乳腺炎抗体监测方法与乳中无乳链球菌的检测方法奠定了基础。

鸡产蛋下降防治对策

鸡产蛋下降症状的轻重、死亡率的高低、产蛋恢复的快慢、与饲养管理水平和是否及时采取积极的治疗措施有很大关系。在临诊实践中采取哪种治疗方案就要看具体的临床症状和发病原因，但无论采取那种措施在控制死亡上会有一些治疗效果。