LncRNANNT-AS1通过调控miR-582-5p/NCKAP1轴激活Hippo-YAP/TAZ信号通路促进膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭和干细胞干性影响

目的检测膀胱癌中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)烟酰胺核苷酸转氢酶反义RNA1(nicotinamide nucleotide transhydrogenase antisense RNA 1,NNT-AS1)表达情况,研究其对膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭及肿瘤干细胞干性的影响及可能分子机制。方法实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测膀胱癌组织标本及细胞中LncRNA NNT-AS1表达情况;将膀胱癌细胞转染分为sh-NC组,sh-NNT-AS1组,sh-NNT-AS1+inh-582-5p组和sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组。采用CCK-8法检测细胞增殖吸光度值(A值);Transwell实验检测细胞迁移、侵袭穿膜数;细胞成球实验检测干细胞干性。检索starBase和TargetScan数据库,并通过双荧光素酶报告基因实验预测验证LncRNA NNT-AS1和miR-582-5p,miR-582-5p与NCKAP1的靶向结合关系。Western blot检测膀胱癌干细胞标志蛋白(CD44,ALDH1A1,Oct4,Nanog)及Hippo-YAP/TAZ信号通路相关蛋白表达灰度值。结果与癌旁组织相比,膀胱癌组织中LncRNA NNT-AS1表达水平(0.34±0.07 vs 1.15±0.21)明显升高,差异有统计学意义(t=16.364,P<0.001)。与人正常膀胱上皮SV-HUC-1细胞(1.00±0.01)相比,膀胱癌细胞T24,5637,UM-UC-3和TCC-SUP中LncRNA NNT-AS1表达(6.03±0.17,4.66±0.36,5.47±0.26,3.02±0.20)明显升高,差异有统计学意义(t=17.472~51.160,均P<0.001)。与sh-NC组相比,在24,48和72 h时sh-NNT-AS1组细胞增值能力(A值)均显著降低(0.80±0.01 vs 1.07±0.06,1.18±0..07 vs 1.83±0.03,1.89±0.07 vs 2.53±0.06),差异有统计学意义(t=7.688,14.783,12.024,均P<0.05);sh-NNT-AS1组细胞迁移穿膜数(55.00±2.65个vs 354.30±7.84个)、细胞侵袭穿膜数(45.67±2.33个vs 303.00±9.07个)及膀胱癌干细胞成球数(20.85±2.17个vs 41.35±3.67个)显著降低,差异具有统计学意义(t=-62.641,-47.596,8.328,均P<0.001)。与sh-NC组相比,sh-NNT-AS1组细胞中CD44(0.04±0.01 vs 1.12±0.02),ALDH1A1(0.23±0.01 vs 1.16±0.05),Oct4(0.17±0.02 vs 1.10±0.04),Nanog(0.49±0.03 vs 1.24±0.03)的蛋白表达灰度值显著降低,差异具有统计学意义(t=83.656,31.591,36.019,30.619,均P<0.001)。与si-NC组相比,sh-NNT-AS1组CD44+CD133+细胞比例(9.30%±0.79%vs 88.50%±2.77%)明显降低,差异有统计学意义(t=-47.624,P<0.001)。双荧光素酶报告基因检测结果显示miR-582-5p为LncRNANNT-AS1靶基因,NCKAP1为miR-582-5p靶基因;LncRNA NNT-AS1靶向调控miR-582-5p/NCKAP1轴。与sh-NNT-AS1组相比,在24,48,72 h时sh-NNT-AS1+inh-582-5p组细胞增值能力(A值)均明显升高(0.98±0.03 vs 0.73±0.06,1.74±0.04 vs 1.22±0.05,2.33±0.16 vs 1.69±0.14),差异有统计学意义(t=5.977~11.628,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1+inh-582-5p组相比,在24,48,72 h时sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组细胞增值能力(A值)显著降低(0.69±0.04,1.01±0.07,1.39±0.08),差异有统计学意义(t=7.877~16.323,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p组细胞迁移穿膜数(322.31±28.45个vs 81.42±13.22个)、细胞侵袭穿膜数(316.07±30.21个vs 92.13±12.65个)及膀胱癌干细胞成球数(38.55±2.20个vs 18.98±1.16个)显著增加,差异具有统计学意义(t=15.115,13.158,14.592,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p组细胞CD44(1.05±0.08 vs 0.10±0.01),ALDH1A1(1.20±0.16 vs 0.22±0.02),Oct4(1.32±0.14 vs 0.19±0.03),Nanog(0.97±0.12 vs 0.15±0.04),YAP(1.29±0.11 vs 0.42±0.07)和TAZ(1.41±0.16 vs 0.35±0.05)蛋白表达灰度值均显著增加,差异具有统计学意义(t=10.650~21.243,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1+inh-582-5p组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组细胞迁移穿膜数(65.33±12.60个)、细胞侵袭穿膜数(71.08±15.19个)、膀胱癌干细胞成球数(11.36±1.05个)均显著降低,差异具有统计学意义(t=16.125,14.395,21.365,均P<0.001)。与sh-NNT-AS1+inh-582-5p组相比,sh-NNT-AS1+inh-582-5p+si-NCKAP1组细胞CD44(0.25±0.05),ALDH1A1(0.61±0.11),Oct4(0.22±0.08),Nanog(0.44±0.07),YAP(0.25±0.09)和TAZ(0.30±0.04)蛋白表达灰度值显著降低,差异具有统计学意义(t=6.412~17.889,均P<0.001)。结论膀胱癌中LncRNA NNT-AS1表达上调,其对膀胱癌细胞增殖、侵袭及肿瘤干细胞干性的影响,可能是通过调控miR-582-5p/NCKAP1分子轴,激活Hippo-YAP/TAZ信号通路完成。

腹腔镜单部位腹内缝扎与单孔腹膜外结扎治疗儿童鞘膜积液对血清炎症因子的影响

目的采用经脐单部位两孔腹腔内疝环缝扎术(intracorporeal purse-suturing,IP)和单孔腹腔镜监视下腹膜外内环结扎术(extracorporeal knotting,EK)治疗鞘膜积液患儿,比较术前和术后外周静脉血中的炎症因子的变化,探讨这两种术式对患儿的手术应激以及恢复情况的差异。方法2019年1月至6月,在定州市人民医院治疗的鞘膜积液患儿中,52例纳入本研究,随机分为IP组和EK组,每组26例。术前、术后3 h、24 h采集外周静脉血标本,检测血清白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α水平。统计学方法采用重复测量的方差分析、独立样本t检验。结果IP组和EK组患儿的月龄、性别、侧别等方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。EK组手术时间、麻醉时间均短于IP组。IP组术前、术后3 h、术后24 h血清IL-6、IL-10和TNF-α水平比较,差异均有统计学意义(P=0.000),术后3 h均明显高于术前,术后24 h虽有下降,但仍然高于术前水平。EK组术前、术后3 h、术后24 h的3种炎症因子水平比较,差异也有统计学意义(P=0.000),术后3 h均高于术前,但术后24 h下降并接近术前水平。术前IP组和EK组血清IL-6、IL-10和TNF-α水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。术后3 h和24 h,IP组血清IL-6、IL-10和TNF-α水平均高于EK组(P值均<0.01)。结论采用EK或IP手术闭合鞘状突内口治疗儿童鞘膜积液,EK手术的应激反应和手术伤害比IP手术更加轻微,促炎因子和抑炎因子更快恢复至术前水平。

腹腔镜与开腹胆囊切除术治疗急性结石性胆囊炎的疗效及VAS评分影响评价

在急性结石性胆囊炎中分析利用腹腔镜与开腹胆囊切除术治疗的疗效以及VAS评分影响。方法 于时间范围为2020年2月-2022年2月之间,在我院收治的患者中选取急性结石性胆囊炎100例,按照抽签法将其分为两组,即对照组50例实施开腹胆囊切除术,观察组50例实施腹腔镜胆囊切除术。在此基础上对比两组病人的治疗效果、VAS评分、手术相关指标、术后并发症发生率以及血清炎性因子水平。结果 两组病人分别实施不同的胆囊切除方式,在术前以及术后收集病人的相关数据进行分析,通过分析后可发现观察的相关指标表现优于对照组,即采用腹腔镜能够取得较好的治疗效果,病人的疼痛程度也较轻,p0.05。结论 在治疗急性结石性胆囊炎的时候,和开腹胆囊切除术相比,通过腹腔镜切除胆囊能够取得较好的疗效,能够在对机体产生较小的创伤情况下,取得较佳的治疗效果,在临床上有着重要的使用意义。

动脉灌注化疗栓塞术介入治疗肝癌的效果观察及价值体会

在肝癌中实施动脉灌注化疗栓塞术介入治疗后,分析其治疗效果以及价值体会。方法:在我院收治的患者中选取50例肝癌患者,选择的时间范围介于2018年1月-2019年1月,将选取的50例病例按照平均分配的原则分为每组25例,共2组。其中一组为对照组在治疗中采取经导管肝动脉栓塞术(TAE)进行治疗,另一组为观察组在治疗中实施经动脉灌注化疗栓塞术治疗(TACE)。在此基础上持续性关注两组病人的身体健康,收集相关数据,进行治疗前后AFP、VEGF、HIF-1α血清肿瘤标志物含量,肝功能指标,两年期复发率及生存率,生存质量的对比。结果:两组病人经不同的临床手术方式治疗以后,对其进行为期两年的观察,收集并准确记录所需数据,经过对比可发现,观察组病例的相关数据展示优于对照组,意味着治疗效果等多方面的对比和对照组病人相比较好,p0.05。结论:在肝癌患者中实施动脉灌注化疗栓塞介入治疗可有效提升疾病治疗效果,对病人来说有着重要意义,能够降低疾病复发率,提升生活质量等多方面。

腹腔镜胆囊切除术对胆结石的治疗效果观察及VAS评分影响评价

胆结石病人应用腹腔镜胆囊切除术对其作用明显。方法:实验目标均为我院在2021.1.-2021.12.期间接收的胆结石病人,参与实验人数为150例,通过抽签的形式,将150例胆结石病人平均分为两个治疗组,对照组(开腹胆囊切除术治疗手段)以及观察组(腹腔镜胆囊切除术干预),每组病人数量为75例。将两组病人的生活质量评分、临床指标、并发症发生率、满意度、治疗效果几项内容进行分析对比。结果:通过对病人采取不同的治疗措施,临床效果显示通腹腔镜胆囊切除术治疗效果对胆结石病人来说更加理想。结论:对胆结石进行腹腔镜胆囊切除术干预有临床推广意义。