葛黄颗粒含药血清对乙醇损伤的人肝细胞L-02保护作用观察及其机制探讨

目的观察葛黄颗粒含药血清对乙醇损伤的人肝细胞L-02修复作用,并探讨其可能机制。方法 (1)将L-02细胞分为A、B、C、D、E、F组。除F组外,其余各组均加入乙醇培养基培养24 h制备肝细胞损伤模型,造模后吸走培养液。D、F组加入空白血清(10%正常大鼠血清),A组加入1.25%葛黄颗粒含药血清+8.75%正常大鼠血清,B组加入2.5%葛黄颗粒含药血清+7.5%正常大鼠血清,C组加入5%葛黄颗粒含药血清+5%正常大鼠血清,E组加入5%美他多辛含药血清+5%正常大鼠血清,继续培养6、12、24 h。比较各组细胞上清液谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活力。(2)将L-02细胞按2×104个/孔接种于6孔板中,将其分为a、b、c、d组。除d组外,其余各组均加入乙醇制备肝细胞损伤模型,造模后吸走培养液。b、d组加入空白血清,a组加入5%葛黄颗粒含药血清,c组加入5%美他多辛含药血清,继续培养24 h。比较各组丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、细胞活性氧(ROS)、线粒体膜电位(MMP)、三磷酸腺苷(ATP)。结果与F组比较,D组各时点AST、LDH升高;与D组比较,B组24 h AST、LDH降低,C、E组12 h和24 h的AST、LDH降低;与A组比较,B组24 h AST降低,C组24 h AST及12 h LDH降低,E组12、24 h AST和LDH降低;与B组比较,C、E组12 h AST、LDH降低;与同组6 h比较,C组24 h AST降低,12、24 h LDH降低;与同组12 h比较,B、C、E组24 h AST降低,C组24 h LDH降低;P均<0.05。与d组比较,b组SOD、GSH-px、MMP、ATP降低,MDA、ROS升高(P均<0.05);与b组比较,a组和c组SOD、GSH-px、MMP、ATP升高,MDA、ROS降低(P均<0.05)。结论葛黄颗粒含药血清对乙醇致L-02细胞损伤有一定修复作用,其机制可能是调整细胞内氧化应激水平和线粒体功能。

葛黄颗粒对酒精性肝病大鼠抗氧化应激及调节脂质代谢的作用机制

目的:探讨葛黄颗粒对酒精性肝病(ALD)大鼠抗氧化应激及调节脂质代谢的作用机制。方法:108只SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、葛黄颗粒高、中、低剂量组、对照组(美他多辛),给予40%酒精(1.0 mL/100 g·d),同时隔日给予高脂饲料。4周后高、中、低剂量组分别给予不同剂量的葛黄颗粒(5.3、2.65、1.325 g/kg·d),对照组加用美他多辛(0.09 g/kg·d),持续8周。用RT-PCR法检测肝细胞过氧化物酶体增殖物激活受体-α的表达及肝细胞色素P4502E1的表达,用Western Blot测定肝细胞色素P4502E1的蛋白表达水平,用试剂盒测定肝组织丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活力。结果:与模型组比较,高剂量组和对照组大鼠肝组织中的MDA水平及P4502E1的基因表达和蛋白表达明显降低(P<0.05),而SOD、GSH-PX的活力以及PPAR-αmRNA的表达则显著增加(P<0.05),二组之间无明显差异(P>0.05)。结论 :葛黄颗粒能降低大鼠肝组织中P4502E1 mRNA及其蛋白的表达、MDA含量,增加PPAR-αmRNA的表达、SOD和GHS-PX的活力,表明其具有抗氧化应激及调节脂质代谢的作用,能有效地防治ALD。

肱骨干骨折手法整复与手术治疗的探讨

目的探讨肱骨干骨折采用手法整复和手术治疗的优劣,以探寻更好的治疗肱骨干骨折的方法。方法回顾性分析2012年至2015年我院就诊的46例肱骨干骨折患者,其中23例采用传统手法整复小夹板固定,另23例采用手术方法切开内固定,46例患者均获得6个月以上随访,对比分析46例患者接受治疗1个月、3个月、6个月后功能恢复情况。结果23例手法整复除1例畸形愈合外其余患者均获得痊愈,骨折对位对线良好,患肢功能恢复良好;手术治疗的23例患者中,1例术后发生内固定器断裂,1例内固定器松动导致骨不连,2例发生不明原因骨不连,3例患者功能恢复较差。结论传统手法整复加小夹板固定对治疗肱骨干骨折优势明显,可推广使用。

酒精性股骨头坏死发病机理及治疗现状的研究进展

酒精性股骨头坏死发病与脂肪栓塞、骨内高压、凝血功能异常、脂质转化以及细胞凋亡、基因多态性等有关,中医认为与体质等因素有关。治疗方法主要为保守疗法,如限制饮酒、功能训练、控制血脂、减轻负重、用药、高压氧、电刺激、关节训练、放血疗法等,各有优劣,适用于早期以及部分中晚期患者。手术治疗包括髓芯检验、关节置换术、骨移植等,近年来臭氧自体血回输、基因治疗、干细胞移植发展迅速。

葛黄颗粒对酒精性肝病模型大鼠的防治作用

目的通过动物实验观察葛黄颗粒对酒精性肝病(ALD)模型大鼠的防治作用。方法 SD大鼠分为6组:正常组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、对照组,每组18只。除正常组给予蒸馏水和普通饲料外,其余各组均给予40%乙醇(1.0mL·100g^(-1)·d^(-1))灌胃,隔日给予高脂饲料。4周后高、中、低剂量组加用不同剂量的葛黄颗粒,对照组加用美他多辛,持续8周。用苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏组织的病理形态学改变,用全自动生化分析仪检测血清门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC),用比色法测定肝组织的TG、TC;结果在模型组中,血清AST、ALT、TG、TC水平,肝组织中的TG、TC水平显著升高(P<0.05);干预后,上述指标在高剂量组和对照组中的表达明显降低(P<0.05);中、低剂量组降低不明显(P>0.05);高剂量组和对照组之间差异无统计学意义(P>0.05);结论葛黄颗粒对ALD有较好的防治作用。

葛黄颗粒含药血清对乙醇诱导L-02肝细胞损伤的保护作用及其机制研究

目的观察葛黄颗粒含药血清对乙醇诱导的L-02肝细胞损伤的保护作用并探讨其分子机制。方法将SD大鼠分3组:空白对照组、葛黄颗粒组(3.1g·100g^(-1)·d^(-1))、美他多辛组(0.1g·100g^(-1)·d^(-1)),每组20只,每日灌胃给药2次,连续给药5d后,取血制备含药血清。构建3%乙醇干预24h诱导的体外肝细胞损伤模型。L-02肝细胞分为6组,包括正常组、模型组、葛黄颗粒高、中、低剂量组及阳性对照组,L-02肝细胞接种培养24h后,正常组加入含10%正常大鼠血清的培养基,模型组在正常组基础上同时加入3%乙醇,葛黄颗粒高、中、低剂量组则加入3%乙醇及不同体积比的葛黄颗粒含药血清,阳性对照组加入3%乙醇和美他多辛含药血清,干预24h后,收集上清液及L-02肝细胞。采用全自动生化分析仪检测上清液天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH),流式细胞仪检测细胞凋亡,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Fas、FasL、caspase3、caspase8mRNA的表达。结果在模型组中,细胞上清液AST、LDH的水平,L-02细胞的凋亡率及Fas、FasL、caspase3、caspase8mRNA的表达水平均较正常组明显增高(P<0.05),经相应干预后,上述各项检测指标在葛黄颗粒中、高剂量组和阳性对照组中的表达水平均显著下降(P<0.05);中剂量组和阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),高剂量组和阳性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论葛黄颗粒含药血清可降低细胞上清液中AST、LDH的水平,下调Fas、FasL、caspase3、caspase8mRNA的表达,减少凋亡率,对酒精性肝病的保护作用可能与抑制细胞凋亡有关。