目的观察华蟾素注射液对乳腺癌MDA-MB-231细胞E-cad、N-cad表达的影响,探讨华蟾素注射液对乳腺癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响,探讨华蟾素注射液抑制乳腺癌转移机制。方法采用四氮唑蓝(MTT)比色法观察高、中、低剂量华蟾素注射液(100mg/...目的观察华蟾素注射液对乳腺癌MDA-MB-231细胞E-cad、N-cad表达的影响,探讨华蟾素注射液对乳腺癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响,探讨华蟾素注射液抑制乳腺癌转移机制。方法采用四氮唑蓝(MTT)比色法观察高、中、低剂量华蟾素注射液(100mg/L、25mg/L、6.25mg/L)对MDA-MB-231细胞增殖的影响;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测法检测MDA-MB-231细胞中E-cad/N-cad m RNA表达水平;蛋白印迹法(Westernblot)检测MDA-MB-231细胞中E-cad/Ncad蛋白表达水平。结果高浓度组华蟾素注射液48h对MDA-MB-231细胞抑制率较中、低剂量组明显(54.54%比50.20%、37.80%),差异有统计学意义(P<0.05),q RT-PCR实验结果显示空白对照组、华蟾素注射液高剂量组、中剂量组、低剂量组E-cad相对表达量依次为(1.05±0.04)%、(8.77±1.54)%、(3.74±1.56)%、(1.64±0.30)%,N-cad相对表达量依次为(1.18±0.19)%、(0.34±0.19)%、(0.79±0.20)%、(0.84±0.07)%。华蟾素可以上调E-cad表达,下调N-cad表达,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。Westernblot结果显示华蟾素注射液能降低N-cad蛋白的表达,上调E-cad蛋白的表达。结论华蟾素能通过上调E-cad表达和下调N-cad表达,抑制MDA-MB-231细胞的上皮间质转化(EMT)转变,从而降低乳腺癌MDA-MB-231细胞的转移能力。展开更多
文摘目的观察华蟾素注射液对乳腺癌MDA-MB-231细胞E-cad、N-cad表达的影响,探讨华蟾素注射液对乳腺癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响,探讨华蟾素注射液抑制乳腺癌转移机制。方法采用四氮唑蓝(MTT)比色法观察高、中、低剂量华蟾素注射液(100mg/L、25mg/L、6.25mg/L)对MDA-MB-231细胞增殖的影响;实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测法检测MDA-MB-231细胞中E-cad/N-cad m RNA表达水平;蛋白印迹法(Westernblot)检测MDA-MB-231细胞中E-cad/Ncad蛋白表达水平。结果高浓度组华蟾素注射液48h对MDA-MB-231细胞抑制率较中、低剂量组明显(54.54%比50.20%、37.80%),差异有统计学意义(P<0.05),q RT-PCR实验结果显示空白对照组、华蟾素注射液高剂量组、中剂量组、低剂量组E-cad相对表达量依次为(1.05±0.04)%、(8.77±1.54)%、(3.74±1.56)%、(1.64±0.30)%,N-cad相对表达量依次为(1.18±0.19)%、(0.34±0.19)%、(0.79±0.20)%、(0.84±0.07)%。华蟾素可以上调E-cad表达,下调N-cad表达,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。Westernblot结果显示华蟾素注射液能降低N-cad蛋白的表达,上调E-cad蛋白的表达。结论华蟾素能通过上调E-cad表达和下调N-cad表达,抑制MDA-MB-231细胞的上皮间质转化(EMT)转变,从而降低乳腺癌MDA-MB-231细胞的转移能力。