前列腺癌CK5^+CK8^+细胞的分选及其分子生物学特性

目的在人前列腺癌细胞系中分选CK5^+CK8^+细胞,了解其分子生物学特性。方法流式细胞术在人前列腺癌细胞系PC3和LNCaP中分选CK5^+CK8^+细胞,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法方法检测LNCaP细胞分选的CK5^+CK8^+细胞CK5、CK8、雄激素受体(AR)和前列腺特异抗原(PSA)的表达,细胞迁移实验检测CK5^+CK8^+细胞迁移能力,琼脂糖凝胶克隆形成实验检测CK5^+CK8^+细胞成瘤能力。采用t检验进行统计学分析。结果采用流式细胞术可以在PC3中分选出(21.3±4.6)%的CK5^+CK8^+细胞,在LNCaP中分选出(1.2±0.4)%的CK5^+CK8^+细胞。与非CK5^+CK8^+细胞相比,LNCaP中分选的CK5^+CK8^+细胞CK5 mRNA表达差异有统计学意义(t=10.435,P<0.001),CK8 mRNA表达差异无统计学意义(t=1.974,P=0.121),AR和PSA mRNA表达差异有统计学意义(t=4.317,3.232;P=0.016,0.037)。蛋白质印迹法检测得到类似结果。细胞培养7 d后,CK5^+CK8^+细胞和非CK5^+CK8^+细胞均可以在Transwell小室迁移生长,迁移细胞数分别为(60±7)个和(32±5)个,2者比较差异有统计学意义(t=6.031,P=0.004)。细胞培养14 d后,CK5^+CK8^+细胞和非CK5^+CK8^+细胞均可以在软琼脂糖凝胶中克隆性生长,阳性克隆数分别为(71±5)个和(27±3)个,差异有统计学意义(t=13.009,P<0.001)。结论人前列腺癌细胞系LNCaP和PC3都可以分选出CK5^+CK8^+细胞,LNCaP中CK5^+CK8^+细胞AR和PSA均有一定程度表达,迁移和成瘤能力增强。

黄芪多糖对前列腺癌PC3细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨黄芪多糖对前列腺癌细胞株PC3细胞增殖和凋亡的影响。方法分别用浓度为0.5、1、2.5、5、10mg/ml的黄芪多糖(APS)干预PC3细胞12、24、36h后,用甲基噻唑基四唑法检测不同浓度APS对PC3细胞增殖的量效和时效关系;台盼蓝染色法测定细胞生长曲线;APS干预24h后流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果APS能抑制PC3细胞的增殖,呈时间与浓度依赖性,不同浓度APS组之间与不同作用时间组之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。APS干预PC3细胞24h后,对照组细胞凋亡率为5.01%,1mg/ml和5mg/ml的APS培养24h细胞凋亡率分别为14.46%和27.71%,较对照组明显增加,且差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论APS能够抑制前列腺癌细胞株PC3细胞的增殖,并诱导其凋亡。

超选择性前列腺动脉栓塞术治疗超大体积前列腺增生的疗效分析

目的探讨超选择性前列腺动脉栓塞术(PAE)治疗超大体积(≥120 ml)前列腺增生的安全性及临床疗效。方法回顾性分析2018年8月至2019年12月于山西医科大学第一医院采用超选择性前列腺动脉栓塞术治疗的18例超大体积前列腺增生患者的临床资料,比较术前与术后1、3、6个月患者的前列腺体积(PV)、前列腺症状评分(IPSS)、生活质量评分(QOL)、最大尿流率(Q_(max))及残余尿量(RUV)等各项指标的差异并观察手术的并发症。结果18例前列腺增生患者行PAE的手术时间为95~190 min,中位手术时间130 min。术后4例出现轻微的耻骨区疼痛和尿道烧灼感,2例出现一过性血尿,3例患者出现发热症状,12例患者于术后第3天成功拔除尿管,拔除尿管后均可自行排尿,其余6例患者拔除尿管时间为术后10~21 d,所有患者术后均未出现严重的并发症。术后1、3、6个月随访时患者的PV、IPSS、QOL、RUV较术前明显降低,Q_(max)较术前明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PAE治疗超大体积前列腺增生安全、有效,在临床上PAE可作为一种治疗超大体积前列腺增生的手术方式。

雄激素受体对从前列腺癌LNCaP细胞分选出的CK5+CK8+细胞的作用及其调控机制

目的探讨雄激素受体(AR)对从前列腺癌LNCaP细胞中分选出的CK5+CK8+细胞的作用及其调控机制。方法采用流式细胞术从LNCaP细胞中分选CK5+CK8+细胞,使用慢病毒载体携带AR基因转入CK5+CK8+细胞。实验分为转入AR的AR CK5+CK8+组和转入空载体的V CK5+CK8+组,在1、10 nmol/L二氢睾酮(DHT)培养条件下,采用蛋白质印迹法检测AR、p-AKT和bcl-2蛋白的表达,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、细胞迁移实验和琼脂糖凝胶克隆形成实验检测AR对CK5+CK8+细胞生物学特性的影响。采用MTT法检测应用AKT信号通路活化抑制物LY 294002(LY)、γ-生育三烯酚(γ-TT)和(或)诱导AR表达的5-氮胞嘧啶(5-AZA)对CK5+CK8+细胞增殖的影响。结果AR基因转入CK5+CK8+细胞后,AR表达增强,p-AKT和bcl-2蛋白表达水平降低。在1、10 nmol/L DHT作用2、4、6 d后,AR CK5+CK8+组细胞较V CK5+CK8+组细胞增殖受抑制程度高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。DHT 1、10 nmol/L作用3 d后,AR CK5+CK8+组细胞较V CK5+CK8+组细胞迁移能力下降[迁移细胞数:(54±9)个比(113±21)个,(13±3)个比(34±6)个],差异均有统计学意义(t=4.450,P<0.01;t=5.157,P<0.01)。DHT 1、10 nmol/L作用3周后,AR CK5+CK8+组细胞较V CK5+CK8+组细胞成瘤能力弱[克隆数:(39±7)个比(105±16)个,(41±6)个比(86±6)个],差异有统计学意义(t=6.631,P<0.01;t=8.662,P<0.01)。5 nmol/L LY+10 nmol/L 5-AZA、5 nmol/L LY+5 nmol/Lγ-TT、10 nmol/L 5-AZA+5 nmol/Lγ-TT、2.5 nmol/L LY+5 nmol/L 5-AZA+2.5 nmol/Lγ-TT联合1 nmol/L DHT或10 nmol/L DHT作用2、4、6 d均能抑制CK5+CK8+细胞增殖(均P<0.05)。结论AR可以抑制从LNCaP中分选出的CK5+CK8+细胞增殖,导致细胞迁移和成瘤能力下降;其可能通过抑制AKT-bcl-2信号通路的活化而发挥作用。

气肿性膀胱炎一例报告

气肿性膀胱炎是一种罕见的膀胱炎症,严重者可危及生命。我院收治1例气肿性膀胱炎患者,同时合并前列腺增生、糖尿病、双侧肾输尿管积水、双侧输尿管末端积气。给予积极监测并控制血糖、留置导尿、抗感染等治疗后,复查CT提示膀胱腔内及壁内气体减少,各项检查指标均较前好转,各项指标正常后拔除尿管,随诊1个月未复发。

肠道菌群与前列腺癌发生发展的相关机制

本文探讨了前列腺癌(prostatic cancer,PCa)与肠道菌群发生发展的关系,并从高脂饮食通过肠道菌群影响前列腺癌的发生发展、肠道菌群影响睾酮代谢及前列腺癌激素抵抗等方面进一步探究肠道菌群促进前列腺癌发生发展的可能机制,并阐述了肠道菌群与前列腺癌的诊断、治疗及预后的新进展,同时也为将来的治疗方向提供新的思路。

p21和REST基因与肥大细胞诱导前列腺癌细胞神经内分泌分化的相关性研究

目的初步探讨p21和元件-1沉默转录因子(REST)基因在肥大细胞诱导前列腺癌细胞出现神经内分泌分化过程中的表达变化及两者的相关性。方法利用孔径为0.4μm的TnmSWell小室将人前列腺癌细胞(PC-3)与肥大细胞(P815)进行共培养,倒置显微镜观察PC-3细胞的形态变化;CCK-8实验及平板克隆形成实验检测诱导前后PC-3的细胞活性及增殖能力变化;实时荧光定ft PCK法(KT-qPCK)检测诱导前后PC-3细胞中神经内分泌标志物[突触素(SYP)、嗜铬蛋白A(CHGA)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)]、p21、REST的mRNA表达变化:结果与P815细胞共培养后,PC-3细胞形态从梭形变为较长的、带有树突状结构的不规则形,且细胞间隙变大。CCK-8实验结果显示,PC-3+P815组细胞0D值低于PC-3组细胞(P<0.05),但是随着共培养时间的延长,PC-3+P815组细胞0D值先下降后上升。平板克隆形成实验结果显示,P815浓度为10^(4)/孔、共培养4 d的PC-3+P815组细胞克隆形成率低于PC-3组细胞(P<0.05)。RT-qPCR实验结果显示,P815浓度为10^(4)/孔、共培养4 d的PC-3+P815组细胞相对PC-3组细胞来说,NSE、SYP、CHGA表达显著上调(P<0.05),p21表达上调(P<0.05),KEST表达下调(P<0.05)。结论肥大细胞可能诱导前列腺癌细胞出现了神经内分泌分化,并且P21和REST基因与这一过程存在一定的相关性。