冻存睾丸精子用于男性生殖力储备的探讨

目的:通过研究对无精子症患者实施睾丸活检或其他手术时冷冻睾丸精子经复苏后行卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)助孕的临床效果,探讨冻存睾丸精子作为男性生殖力储备的有效性。方法:回顾性分析了在本院实施睾丸活检或其他手术时冷冻睾丸精子的患者96例,其中的55例已在本中心复苏冷冻精子行ICSI助孕共60个周期,评估其冷冻精子复苏、卵子受精、卵裂、可移植胚胎、优质胚胎、临床妊娠及其分娩情况。结果:复苏冻存睾丸精子60个周期均获成功,复苏后行ICSI技术助孕,受精率77.6%(513/661),2PN受精率69.4%(459/661),卵裂率99.4%(510/513),可利用胚胎率84.5%(431/510),优质胚胎率40.8%(208/510);所有周期均有可移植胚胎;新鲜胚胎移植52个周期,临床妊娠30例(临床妊娠率57.7%),双胎妊娠11例(其中1例双胎自然减为单胎),单胎妊娠19例,种植率为38.7%(41/106),流产率为3.33%(1/30)。目前,已经出生了20例健康婴儿(12个男婴,8个女婴),未发现先天缺陷儿;另外13例(7例单胎和6例双胎)继续妊娠中。结论:睾丸精子冷冻复苏后行ICSI助孕可以得到较好的临床结局。冻存睾丸精子是无精子症男性生殖力储备的有效方式。

冷冻方法对人卵裂期冷冻胚胎移植周期妊娠结局的影响

目的探讨慢速冷冻和玻璃化冷冻方法对人卵裂期冷冻胚胎移植周期妊娠结局的影响。方法回顾性分析2011年1月~2015年12月在北京大学第一医院进行卵裂期冷冻胚胎移植的1331个周期,包括慢速冷冻周期431个和玻璃化冷冻周期900个,比较两种不同冷冻方法的胚胎复苏率、完整胚胎率、临床妊娠率、种植率、流产率等各项指标,并分析卵裂球损伤对胚胎发育潜能的影响。结果玻璃化冷冻的胚胎复苏率(92.53%)、完整胚胎率(75.43%)、临床妊娠率(45.72%)、种植率(27.41%)高于慢速冷冻(76.93%、48.46%、39.52%、19.88%,P<0.05);而流产率分别为12.20%、12.56%(P>0.05);周期取消率分别为3.71%、1.33%(P<0.05)。慢速冷冻移植0、1、2、3个无卵裂球损伤胚胎的临床妊娠率分别为:36.2%、37.7%、42.0%、44.3%(P>0.05);玻璃化冷冻移植0、1、2、3个无卵裂球损伤胚胎的临床妊娠率分别为:20.5%、42.3%、48.8%、54.1%(P<0.05)。结论玻璃化冷冻法更适合于人卵裂期胚胎冷冻保存,其冷冻胚胎移植周期的妊娠结局要优于慢速冷冻法;卵裂球损伤对玻璃化冷冻复苏胚胎的发育潜能影响较大。

变性高效液相色谱快速诊断儿童型脊肌萎缩症

目的 建立变性高效液相色谱(denaturinghighperformanceliquidchromatography, DHPLC) 快速诊断儿童型脊肌萎缩症(spinalmuscularatrophy, SMA) 的新方法。方法 (1)用二重聚合酶链反应(PCR) 扩增运动神经元成活基因(survivalmotorneurongene, SMN) 外显子7、8及周围部分内含子序列; (2) 纯化PCR产物以除去其中的引物、dNTP及缓冲液中的盐粒子等成分; (3) 采用多重引物延伸反应特异性检测能将SMN1基因与SMN2基因区分开的3个特异性位点; (4) 将延伸反应的产物用DHPLC在完全变性的条件下分析。结果 将建立的新方法与传统的PCR-酶切法进行盲法对比试验, 检测了30例标本(包含20例SMA患儿和10例正常人群外周血基因组标本) 以验证新方法的特异性和可靠性, 其诊断结果与PCR-酶切法结果完全一致。结论 多重引物延伸反应结合DHPLC分析技术是一种可用于临床SMA基因诊断、产前诊断及胚胎种植前遗传学诊断的高效、灵敏、可靠、快速、简便的新方法。

近海岸桥梁下部结构波浪力分析

采用雷诺时均Navier-Stokes(RANS)方程和标准k-ε湍流模型建立波浪水槽,分别针对波浪只作用于下部桩基和波浪作用于整个下部组合结构2种工况,模拟分析波浪特性对波浪力的影响.结果表明:波浪入射角为0°时,近岸条件下各桩柱受力大于平床,且前排桩柱受力随桩间距的增加而增加,后排桩柱受力随桩间距的增加而减小;群桩整体受力随波浪KC数和波高比成幂指数规律增加.桥梁下部组合结构整体所受波浪力随波浪入射方向变化较小,随KC数和波高比变化较大,最大增幅为704%;由于桥梁下部组合结构阻水宽度沿垂向变化显著,与KC数相比,波高比能更好地反映波浪特性对桥梁下部组合结构整体受力的影响.

1008个冷冻胚胎移植周期妊娠结局影响因素的分析

目的:探讨影响卵裂期冷冻胚胎移植妊娠结局的相关因素。方法:回顾性分析2011年1月至2014年12月在北京大学第一医院进行卵裂期冻胚移植的1008个周期,探讨患者年龄、不孕年限、不孕类型、内膜准备方式、内膜厚度及类型、受精方式、胚胎冷冻方法、辅助孵化、胚龄、移植胚胎数量及质量等对冷冻胚胎移植妊娠结局的影响。结果:1008个胚胎解冻周期,复苏胚胎2883个,存活2503个(86.8%),完成冻胚移植周期981个(97.3%),临床妊娠周期413个(42.9%),胚胎种植率23.6%,早期流产率14.0%。年轻患者、全胚冷冻后第一次冻胚移植、选择玻璃化冷冻方法、移植≥2枚胚胎尤其是≥2枚优质胚胎的冷冻胚胎移植妊娠率较高。结论:在诸多因素中,年龄、冷冻方法、是否全胚胎冷冻、移植胚胎数目及质量对冻胚移植妊娠结局影响显著。

非梗阻性无精子症患者睾丸组织病理分型不影响生育结局

目的:探讨非梗阻性无精子症(NOA)患者行卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)的助孕结局及睾丸组织病理分型对NOA患者的助孕结局有无影响。方法:回顾性分析2011年1月至2015年12月在我中心行TESE-ICSI助孕的无精子症病例资料,选取不孕原因为单纯男性或男性合并女方输卵管因素且女方年龄在38岁以下的NOA病例73例,共完成105个取卵周期,79个移植周期。按睾丸组织病理分型将ICSI周期分为3组:精子发生低下组、精子成熟阻滞组和唯支持细胞组,统计总体NOA患者和不同组别的男、女方平均年龄、不孕年限、基础FSH值、Gn使用支数、Gn使用天数、hCG日E2值、hCG日P值、内膜厚度、MII卵数、受精、可移植胚胎、优质胚胎、临床妊娠及流产情况。结果:NOA患者的ICSI受精率为67.03%(553/825)、受精失败发生率9.52%(10/105)、可移植胚胎率85.66%(472/551)、优质胚胎率35.03%(193/551)、平均移植胚胎2.10个,临床妊娠44例(55.70%),活婴出生率为53.16%(42/79),未发生出生缺陷。不同组间的男女方平均年龄、不孕年限、基础FSH值、Gn使用支数、Gn使用天数、hCG日E2值、HCG日P值、子宫内膜厚度、MII卵数均无统计学差异。精子发生低下组、精子成熟阻滞组、唯支持细胞组的受精率分别为68.51%、64.39%、61.45%,可移植胚胎率分别为85.05%、90.48%、83.05%,优质胚胎率分别为33.09%、41.67%、38.98%,组间也均无统计学差异(P>0.05);而在临床妊娠率及胚胎种植率方面虽然精子发生低下组(60.00%、37.61%)与唯支持细胞组(62.50%、50.00%)要高于精子成熟阻滞组(37.50%、21.21%),但是没有统计学差异(P>0.05)。结论:NOA患者一旦获得睾丸精子,借助于ICSI助孕可以得到较好的临床结局,睾丸组织的病理分型对临床结局无明显影响。

不同来源精子行卵胞浆内单精子注射临床结局分析

目的:比较不同来源精子行卵胞浆内单精子注射的临床结局。方法:回顾性的分析2008年1月～2011年12月在我中心行ICSI助孕的患者,选取不孕原因为单纯性严重少、弱、畸精症和无精症的,且年龄在35岁或35岁以下的153例患者入组本研究,共完成165个取卵周期,146个移植周期。按精子来源分为两组:射出精子组(严重少、弱、畸精症组)和睾丸精子组,比较两组间的女方平均年龄、不孕年限、基础FSH值、Gn支数、Gn天数、HCG日E2值、内膜厚度、MII卵数、受精、卵裂、可移植胚胎、优质胚胎、临床妊娠及流产情况。结果:两组间的女方平均年龄、不孕年限、基础FSH值、Gn支数、Gn天数、HCG日E2值、子宫内膜厚度、MII卵数、2PN卵裂率、可移植胚胎率、优质胚胎率、流产率、多胎率无统计学差异;睾丸精子组的受精率、2PN受精率较射出精子组高(72.3%vs 82.0%,P<0.01;67.9%vs72.9%,P<0.05),差异均有统计学意义;虽然睾丸精子组的临床妊娠率、种植率(60.7%、42.0%)高于射出精子组(50.0%、35.6%),但是两组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:睾丸精子行ICSI助孕可以得到较好的临床结局,不比严重少、弱、畸精子症患者精液中的精子差。

IVF-ET周期中控制性超促排卵对阴道微生态的影响

目的:了解IVF-ET周期中控制性超促排卵(COH)对阴道微生态的影响。方法:选取2010年4月～2010年10月在北京大学第一医院生殖与遗传中心接受GnRHa-长方案降调节IVF-ET治疗的患者100例,在COH前检查阴道微生态,在HCG注射日再次检查阴道微生态情况,两次结果进行自身对照研究。结果:100例患者中,COH前有微生态失调者13例,其中BV 2例(2%),菌群正常功能下降9例(9%),菌群异常2例(2%)。COH后,菌群失调者42例(42%),其中VVC 9例(9%),BV 6例(6%),BV中间型3例(3%),菌群正常功能下降15例(15%),菌群异常9例(9%),有统计学差异(P<0.05)。87例COH前检查阴道微生态正常者中,COH后34例发生微生态失调(39.9%)。13例COH前检查阴道微生态失调者中,COH后8例发生微生态失调(61.5%),有统计学差异(P<0.05)。结论:接受COH治疗的患者容易发生阴道微生态失调,COH前已经有阴道微生态异常的患者更容易发生微生态失调,建议在进行COH治疗前和取卵手术前进行阴道微生态检查,对BV和VVC患者取卵前采取药物治疗,阴道菌群异常和功能下降患者要密切观察。

卵泡液中AMH水平与卵巢反应性及妊娠结局关系的探讨

目的研究卵泡液中抗苗勒氏管激素(follicular fluid anti-müllerian hormone,FFAMH)水平与控制性超促排卵(controlled ovarian hyper-stimulation,COH)过程中卵巢反应性与妊娠结局的关系。方法选择在北京大学第一医院妇产科生殖与遗传医疗中心行COH治疗的137例不孕症女性为研究对象,依据卵巢反应性将其分为三组。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测各组FFAMH浓度。结果卵巢低反应组、正常反应组和高反应组卵泡液中AMH水平比较,其差异具有统计学意义(P<0.001);进行组间比较后,卵巢低反应组与正常反应组、高反应组之间的FFAMH水平差异,均具有统计学意义(均P<0.001);而卵巢正常反应组与高反应组之间的FFAMH水平差异无统计学意义(P=0.399)。113例实行新鲜周期移植的不孕症女性中,妊娠组与未妊娠组的FFAMH水平比较,其差异具有统计学意义(P<0.001)。FFAMH水平对妊娠结局有一定的预测效能,但预测价值较低(AUC=0.688)。结论在COH治疗过程中,FFAMH水平与卵巢反应性和临床妊娠结局相关。FFAMH水平对妊娠结局有一定的预测效能,但预测价值较低。

大Y染色体核型对男性生育力的影响及临床意义

目的:探讨大Y染色体核型对男性生育力的影响及其临床意义。方法:回顾性分析2139例男性患者的外周血细胞核型分析结果,并将其分为两组,包括不良妊娠结局或羊水穿刺胎儿染色体异常者(A组),严重少、弱精症或无精症等男性不育者(B组)。比较不同组别之间的大Y检出率之间的差异并进行临床分析。结果:A组1326例,B组813例,共检出68例大Y染色体核型。其中,A组检出大Y核型47例,检出率为3.54%;B组检出大Y核型21例,检出率为2.58%。对于A组中大Y核型检出者其配偶同时进行染色体核型分析。对检出的68例大Y核型进行分析,临床效应表现为弱精症者13例,占19.11%;无精症者8例,占11.76%;其配偶曾有胚胎停育11例,占16.17%;自然流产者6例,占8.82%;羊水穿刺胎儿染色体异常者16例,占23.52%,两组间大Y核型检出率比较无统计学显著差异。结论:大Y染色体核型,作为一种遗传多态性,可能具备一定的临床效应,与男性生精功能降低及对胚胎发育的影响,值得关注及深入研究。

基础雄激素及卵泡液雄激素水平与卵巢反应性及妊娠结局关系的探讨

目的:探讨基础雄激素及卵泡液雄激素水平与卵巢反应性及妊娠结局的关系。方法:选取行IVF/ICSI助孕治疗的130例不孕症女性,将研究对象分为卵巢储备功能低下组、卵巢储备功能正常组。ELISA法检测基础雄激素及卵泡液中睾酮浓度。结果:卵巢储备功能低下组中,卵巢低反应组与正常反应组的基础雄激素水平比较,差异有统计学意义(P=0.037);两组卵泡液中雄激素水平比较,差异无统计学意义(P=0.475)。卵巢储备功能正常组中,卵巢低反应组与正常反应组的基础雄激素水平及卵泡液雄激素水平比较,差异均无统计学意义(P=0.426,P=0.594)。20例进行新鲜周期移植的卵巢储备功能低下患者中,未妊娠组与妊娠组基础雄激素水平及卵泡液中雄激素水平比较,差异均无统计学意义(P=0.400,P=0.656)。89例进行新鲜周期移植的卵巢储备功能正常患者中,未妊娠组与妊娠组的基础雄激素水平及卵泡液中雄激素水平比较,差异均无统计学意义(P=0.380,P=0.930)。结论:卵巢储备功能低下患者,基础雄激素水平与卵巢反应性相关,而与妊娠结局无关;卵泡液中雄激素水平与卵巢反应性和妊娠结局无关。卵巢储备功能正常患者,基础雄激素和卵泡液中雄激素均与卵巢反应性及妊娠结局无关。

精液中白细胞与精液质量的关系研究

目的:探讨精液中白细胞对精液各主要参数的影响。方法:回顾性分析216例男性不育患者的精液质量,根据WHO推荐的方法进行精液常规及精子形态学分析,利用联苯胺法进行白细胞检测,并将患者分为白细胞精子症(>1×106/mL)和非白细胞精子症(≤1×106/mL)两组。结果:与非白细胞精子症组(n=152)相比,白细胞精子症组(n=64)的精子密度明显降低[(38.36±23.16)×106/mL vs(47.14±19.70)×106/mL,P<0.01],活动率明显下降(43.50%±11.49%vs 48.17%±10.28%,P<0.01),a+b级精子比率明显下降(31.00%±10.64%vs 35.87%±10.66,P<0.01),正常形态精子百分率明显降低(10.75%±4.40%vs 12.31%±3.84%,P<0.05),而白细胞精子症组的精液液化异常发生率较非白细胞精子症组明显增高(14.06%vs 4.61%,P<0.05)。结论:白细胞精子症可导致精子密度、活动率及正常形态精子百分率的降低,并可引起精液液化异常发生率的增高。

微创睾丸穿刺取精结合卵泡浆内单精子注射治疗男性梗阻性无精子不育症

目的探讨微创睾丸穿刺取精(TESE)结合卵泡浆内单精子注射(ICSI)治疗男性梗阻性无精子所致不育症。方法利用微创睾丸穿刺取精术获得精子,同时经阴道B超引导穿刺取卵,12h内行ICSI,48h内放入女性宫腔内。结果13例不育夫妇有5例(38%)获得妊娠。结论TESE结合ICSI是治疗男性梗阻性无精子所致不育症的有效方法。

男性年龄与体外受精-胚胎移植治疗结局的相关性分析

目的：探讨男性年龄对体外受精-胚胎移植（IVF-ET）治疗结局的影响。方法：按照男方年龄将接受常规IVF-ET治疗的188对夫妇分为四组：年龄〈31岁组53例,31~35岁组78例,36~40岁组37例,〉40岁组20例。分析男方年龄对IVF-ET治疗结局的影响。结果：本研究中各组间女方年龄、不孕年限、内膜厚度、基础FSH值、Gn总量、获卵总数、MII卵数、可移植胚胎率、优质胚胎率等结果比较均无显著性差异（P〉0.05）,男方精液体积、精子密度、前向运动精子比率均无明显差异（P〉0.05）,36~40岁组（9.3±3.0）和〉40岁组（9.5±2.6）的正常形态精子比率显著低于〈31岁组（13.5±2.8）和31~35岁组（12.6±2.7）（P〈0.05）,而且36~40岁组的受精率（76.6%）显著低于〈31岁组（83.1%）和31~35岁组（81.4%）（P〈0.05）。另外,〈31岁、31~35岁、36~40岁、〉40岁组的着床率分别为：50.91%、41.32%、21.35%、23.4%（P〈0.05）,妊娠率分别为64.15%、62.82%、40.54%、45.0%（P〈0.05）,均呈一定的下降趋势。而各组间的流产率无显著差异（P〉0.05）。结论：随着年龄的增长,正常形态精子比率及IVF的受精率、胚胎着床率及妊娠率呈现下降的趋势,但仍需进一步的研究。

精子形态对体外受精-胚胎移植治疗结局的影响

目的:探讨正常形态精子百分率对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的影响。方法:回顾分析于本中心接受治疗的238个IVF-ET周期,根据WHO推荐的Diff-Quik染色方法及评价标准进行精子形态学分析,共分为三组:A组:5%<正常形态精子百分率≤10%,B组:10%<正常形态精子百分率<15%,C组:正常形态精子百分率≥15%,比较各组精子形态与IVF-ET治疗结局的关系。结果:各组间女方年龄、不孕年限、男方年龄、女方基础FSH值、Gn天数、Gn总量、hCG日E2值、hCG日P值、内膜厚度、获卵总数、MⅡ卵数等结果比较均无显著性差异(P>0.05),三组患者的受精率、2PN受精率、多精受精率、2PN卵裂率、可移植胚胎率、优质胚胎率、着床率、妊娠率、流产率、多胎率等均无显著性差异(P>0.05)。结论:当正常形态精子百分率>5%时,精子形态对常规IVF的治疗结局没有影响。

底坎对减缓采沙河床桥墩冲刷的效果及机理研究

针对采沙河床演变引起的桥墩冲刷问题,通过水力学分析和水槽试验研究底坎设置对上游桥墩减冲的效果,运用粒子图像技术观测水流紊动结构的变化,分析底坎尺度和水流变化与桥墩减冲效率的相关性。结果表明:相同水流条件下,桥墩减冲效率与底坎的相对高度以及底坎与桥墩之间的距离有关;桥墩减冲效率随来流强度的增大而减小;在试验范围内,底坎的高度与水深之比为1/5~1/3、底坎位于桥墩下游1~1.5倍桥墩直径的距离时,对桥墩的减冲效果最佳,桥墩的减冲效率可达20%~30%;底坎的减冲机理是通过降低水流紊动强度、切应力及紊动涡量降低水流的输沙能力,从而实现对桥墩的防护。

促性腺激素释放激素拮抗剂预防中重度卵巢过度刺激综合征的疗效分析

目的:探讨促性腺激素释放激素(GnRH)拮抗剂在预防IVF-ET过程中并发中重度OHSS的效果,旨在寻找预防中重度OHSS的有效措施。方法:回顾性分析我院生殖医学中心2014年4月至2015年12月接受IVF-ET助孕,HCG日血清雌二醇(E2)>4000 pg/m L和/或获卵数≥15个而取消新鲜胚胎移植行全胚冷冻的患者共102例。其中对照组在取卵后进行临床观察,共55例;思则凯组在取卵后第3d(D3)予GnRH拮抗剂思则凯0.25 mg,皮下注射,1次/d,共3d,共47例。计算轻、中、重度OHSS的发生率,对思则凯组和对照组住院患者的临床资料进行分析。结果:思则凯组重度OHSS的发生率(6.4%)明显低于对照组(21.8%,P=0.028)。思则凯组住院患者的住院率、住院天数、临床指标异常发生率(如血液浓缩、肝肾功能损害、卵巢大小及腹水量)、腹腔穿刺率均低于对照组住院患者。结论:在IVF-ET治疗中,GnRH拮抗剂可以显著降低中重度OHSS的发生,减少住院治疗的几率与时间,有效预防中重度OHSS。

控制性超促排卵下卵巢低反应的预测及妊娠结局的研究

目的:研究控制性超促排卵下卵巢低反应的预测指标及妊娠结局情况。方法:选择拟行IVF/ICSI助孕治疗的152名不孕症女性,根据卵巢反应性分为两组:低反应组(获卵数<4个)、非低反应组(获卵数≥4个)。收集不孕症女性的相关临床资料进行分析。结果:卵巢低反应的发生率为18.42%(28/152)。两组中年龄、基础FSH值、FSH/LH值、AFC有显著性差异。多因素Logistic回归分析显示:年龄和AFC进入回归模型,年龄与卵巢反应性呈负相关,AFC与卵巢反应性成正相关。周期取消率为19.74%(30/152),卵巢低反应组(35.71%,10/28)明显高于非低反应组(16.13%,20/124)。移植周期临床妊娠率为51.64%(63/122),卵巢低反应组(22.22%,4/18)明显低于非低反应组(56.73%,59/104)。结论:年龄和AFC可用于卵巢低反应的预测。卵巢低反应可导致周期取消率升高、临床妊娠率降低。

钙对人卵母细胞皮质颗粒排放的调节及与经典型蛋白激酶C关系

目的探讨经药物处理人卵母细胞,钙引起人卵母细胞皮质颗粒排放的机制。方法分别用蛋白激酶C (PKC)激活剂、抑制剂及钙离子载体处理人卵母细胞,使用激光共聚焦扫描显微镜观察PKC的转位及皮质颗粒的排放。结果使用PKC激活剂处理后,卵母细胞出现了明显的PKCα和γ的转位,但未观察到皮质颗粒的排放。钙离子载体 A23187可以引起明显的皮质颗粒的排放,但未出现PKC的转位。结论PKC不介导人卵母细胞内钙离子升高引起的皮质颗粒的释放。