彝药斯赤列甲醇提取物对骨关节炎模型大鼠的治疗作用及靶点预测

背景:彝族人民将斯赤列用于治疗骨折、跌打劳伤、关节炎等。作者所在课题组前期研究发现斯赤列活性部位水提取物(SAW-A)和二氯甲烷提取物(SAW-B)可通过促进成骨细胞增殖、分化和成熟相关基因的表达发挥促进骨折愈合作用,但其活性部位甲醇提取物(SAW-C)对骨关节炎的治疗作用尚不清楚。目的:探讨斯赤列甲醇提取物对骨关节炎的治疗作用,并通过网络药理学技术筛选斯赤列甲醇提取物治疗骨关节炎的有效靶点。方法:通过大鼠前交叉韧带切断手术复制大鼠骨关节炎模型,术后连续灌胃斯赤列甲醇总提物21 d,于造模第21天进行X射线影像学观察,测量膝关节宽度,检测血清中氧化应激指标和关节腔灌洗液中炎症因子水平,苏木精-伊红染色病理学观察,测量全层软骨厚度和透明软骨厚度,番红-固绿染色观察关节软骨蛋白聚糖含量。构建“药物-成分-疾病-靶点”网络,对有效靶点进行GO富集分析和KEGG富集分析,运用cytoscape软件构建蛋白互作网络图。结果与结论:①斯赤列甲醇提取物可降低骨关节炎大鼠关节腔灌洗液中肿瘤坏死因子α与血清中前列腺素E2、丙二醛水平,提高超氧化物歧化酶水平;缓解由骨关节炎所致的关节肿胀;改善关节软骨组织病理状态,维持关节全层软骨、透明软骨厚度以及软骨下骨中骨小梁面积;防止关节软骨中蛋白聚糖的流失,对软骨有保护作用;②网络药理学结果表明,斯赤列甲醇提取物的作用靶点可能与抑制TNF、AKT1、IL-6、MAPK3、SRC等因子释放,以及抑制EGFR信号通路和AGE-RAGE信号通路的过度激活有关。

两种斯赤列提取物促进成骨细胞的增殖与分化

背景:在骨稳态中,成骨细胞和破骨细胞通过释放多种调节因子在骨重塑中发挥重要作用,一旦两种细胞功能和活性的动态平衡被打破,则易引起骨质疏松等骨骼疾病。彝族人民常用斯赤列治疗跌打损伤、骨折创伤等,作者所在课题组前期研究发现斯赤列的水提取物(SAW-A)和二氯甲烷提取物(SAW-B)为其治疗骨折的活性部位,具有促进骨折愈合、改善骨质疏松的作用,但其活性部位对成骨细胞增殖、分化作用的影响尚不清楚。目的:探讨斯赤列改善骨质疏松的活性部位——水提取物(SAW-A)和二氯甲烷提取物(SAW-B)对成骨细胞增殖与分化的影响。方法:胶原酶消化法提取新生SD大鼠颅骨成骨细胞,CCK-8试剂盒检测SAW-A和SAW-B的细胞毒性;分别给予SAW-A(312.5 mg/L)和SAW-B(156.15 mg/L)干预大鼠第3代成骨细胞,于24,48,72 h用CCK-8试剂盒检测成骨细胞增殖活性;流式细胞仪检测SAW-A、SAW-B干预6 d后对细胞活性的影响,通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色检测SAW-A、SAW-B干预后成骨细胞的增殖分化情况,实时荧光定量PCR检测成骨相关基因RUNX2、骨涎蛋白、骨钙蛋白和Ⅰ型胶原蛋白A1的相对表达量。结果与结论:①实验结果表明,SAW-A和SAW-B干预后48 h及72 h,均可明显提高成骨细胞的增殖能力,且SAW-B的作用要强于SAW-A;②流式细胞仪结果表明,SAW-A和SAW-B分别干预成骨细胞6 d后,二者均有抑制细胞凋亡的作用;③碱性磷酸酶和茜素红的染色结果显示,SAW-A和SAW-B均可促进成骨细胞成骨矿化;④SAW-A、SAW-B处理后,成骨细胞分化标记基因RUNX2、骨涎蛋白、骨钙蛋白和Ⅰ型胶原蛋白A1相对表达量均有上升,而且SAW-B促进骨涎蛋白和Ⅰ型胶原蛋白A1基因表达的作用比SAW-A强;⑤表明斯赤列提取物SAW-A和SAW-B均具有促进成骨细胞分化的作用。

骨关节炎病理变化过程的研究进展

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是全世界老年人中常见的导致残疾和疼痛的慢性疾病,其特点是关节软骨的退行性改变、软骨下骨硬化、骨赘的形成、骨软骨血管生成和关节炎症,最终发生关节软骨退变、断裂、缺损,甚至整个关节面的损害。目前OA的发病机制尚未阐明,有效的治疗药物仍缺乏。本文就骨关节炎早期到晚期病理变化的动态过程进行综述。

城市生活垃圾分类处理发展方向及建议探讨

结合广东省中山市生活垃圾分类处理案例,从政策推行、落实等方面对中山市生活垃圾分类处理情况展开分析,通过总结中山市管理经验对城市生活垃圾分类处理发展方向进行探讨,提出推动城市生活垃圾分类处理的资源化、无害化、减量化和智能化发展的建议。

浅析环境保护的重要性及环境管理应用

随着科学、经济的不断发展，在当今的社会里，城市是人口大量聚居的地方，城市生态环境的好坏，对市民的身心健康影响至深。因此，环境的保护也是对建设也越来越重要。现在谈经济指标的多，讲环境保护的少，这是环保意识不强的表现。环境涉及方面很广，处处都能成为污染的源头。所以发展是第一要务，环保更关系到可持续发展。

天麻酚性成分组合物减轻LPS刺激致BV2细胞炎症模型的影响

目的探讨天麻4个酚性成分的组合物对LPS刺激致BV2细胞炎症模型的影响。方法复制LPS刺激致BV-2细胞炎症模型;以NO、TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2和IL-10的含量及BV-2细胞活化后膜蛋白CD16/32、CD206表达的变化为指标,考察天麻酚性成分组合物的作用。结果采用1μg/mL浓度的LPS刺激BV-2细胞24 h可成功复制BV2细胞炎症模型;阳性药物米诺环素(1μmol/L)、天麻酚性成分组合物(10μg/mL)能明显减少LPS刺激BV-2细胞释放NO、TNF-α、IL-6、PGE2的含量(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,10 ng/mL的IL-4、1μmol/L的米诺环素和1、0.1、0.01μmol/L的天麻酚性成分组合物能下调膜蛋白CD16/32的表达(P<0.01),并上调膜蛋白CD206的表达(P<0.01),使CD206/CD16/32比值增大。结论天麻酚性成分组合物可明显抑制BV-2细胞炎症反应,并能促进促炎表型的M1型小胶质细胞转化为抗炎表型的M2型小胶质细胞。